RECONSTITUTION IMMUNITAIRE APRÈS ALLOGREFFE : LES CELLULES NK APPARAISSENT EN PRÉSENCE D’ATG SÉRIQUE D’après la communication orale de E. Jol-­‐van Der Zijde, abstract #0071 EBMT 2015 – 22-­‐25 Mars 2015 Rédigé par le Docteur Blandine MERLE (Hôpital de Hautepierre, Strasbourg) Introduction Il est important de mesurer la concentration active d’ATG (5-­10%, fraction qui se lie aux lymphocytes et les déplète) et d’Alemtuzumab plutôt que de raisonner sur la dose administrée En effet, il existe d’importantes différences inter-­individuelles pour une même dose administrée Exemple : concentration active chez 2 patients, après administration d’ATG à la Pt 1. AUC 231 U*jours/L 20 10 0 -­‐7 0 7 14 21 28 35 42 49 Jours post-­‐transplant 56 63 70 Fraction active d’ATG (U/ml) Fraction active d’ATG (U/ml) même posologie (10 mg/kg) pour thalassémie Pt 2. AUC 26 U*jours/L 20 10 0 -­‐7 0 7 14 21 28 35 42 49 56 63 70 Jours post-­‐transplant 2 D’après la communication orale de E. Jol-­‐van Der Zijde, abstract #0071, EBMT 2015 Introduction Une optimisation de la sérothérapie doit permettre : • La prévention de la GVH aiguë • La prévention du rejet de greffe Sans compromettre la reconstitution lymphocytaire Méthodes : • Dosage de la fraction active d’ATG : cytométrie en flux • Dosage de l’alemtuzumab : ELISA • Etudes des sous populations lymphocytaires : cytométrie en flux La reconstitution immunitaire est définie par • Lymphocytes T CD3+ > 100/uL • Lymphocytes NK CD3-­ CD56+ > 50/uL 3 D’après la communication orale de E. Jol-­‐van Der Zijde, abstract #0071, EBMT 2015 Reconstitution immunitaire après sérothérapie Une forte concentration sérique (ATG ou alemtuzumab) est associée à une reconstitution immunitaire retardée AUC prégreffe AUC postgreffe CD3+ µL [ATG] ou [C1H] dans le sérum HSCT Jours post-­‐greffe 4 D’après la communication orale de E. Jol-­‐van Der Zijde, abstract #0071, EBMT 2015 Reconstitution immunitaire après sérothérapie La reconstitution NK est légèrement plus lente avec l’alemtuzumab (non significatif) # cells T-­cells : CD3+ NK : CD56+ B-­cells : CD19+ 1000 1000 1000 100 100 100 10 10 10 < 1 < 1 < 1 1 2 3 6 12 1 Mois Contrôle en bonne santé 2 3 6 12 Mois ATG 1 2 3 6 12 Mois Alemtuzumab p>0,005 Campath versus ATG 5 D’après la communication orale de E. Jol-­‐van Der Zijde, abstract #0071, EBMT 2015 Résultats Concentrations sériques d’ATG ou d’Alemtuzumab au jour de la reconstitution immunitaire : Alemtuzumab (ug/mL) Reconstitution T 0,03 0,008 Maximum 1,00 0,20 Reconstitution NK 0,16 0,32 Maximum 7,00 2,20 jour T ou la récupération des cellules NK NK Médiane Sérum [ATG] ou [C1H] au CD3+ µL Médiane [ATG] ou [C1H] dans le sérum ATG (AU/mL) HSCT Jours post-­‐greffe La reconstitution NK a lieu en présence de fortes concentrations sériques d’ATG et alemtuzumab 6 D’après la communication orale de E. Jol-­‐van Der Zijde, abstract #0071, EBMT 2015 Résultats La concentration sérique d’ATG a un impact : • Sur le délai de reconstitution NK : § Fortes concentrations d’ATG : J+23 Faibles concentrations : J+22 Sur le phénotype NK : § • § Fortes concentrations d’ATG associées à une augmentation du phénotype CD16-­ % cellules NK CD16-­‐ Total cellules NK p=0,0004 1000 Faible concentration d’ATG 80 64 60 40 Forte concentration d’ATG Contrôle 35 10 1 241 100 % cellules NK CD16-­‐ 100 149 Nb de cellules NK/µL p=0,0362 20 0 7 D’après la communication orale de E. Jol-­‐van Der Zijde, abstract #0071, EBMT 2015 Conclusion En présence de fortes concentrations sériques d’ATG, la reconstitution immunitaire T ne se fait pas, au contraire de la reconstitution NK La majorité des cellules NK apparaissant en présence de fortes doses d’ATG sont de phénotype CD16-­ (64% vs 35% à faible concentration et 5% chez les témoins) 8 D’après la communication orale de E. Jol-­‐van Der Zijde, abstract #0071, EBMT 2015