Titre: Développement d’une méthode de typage moléculaire à haute résolution pour l’étude de la phylogénie et de l’évolution des xanthomonads phytopathogènes Unité: UMR RPB (Résistance des Plantes aux Bio-agresseurs) – IRD Montpellier Contact: Dr. Ralf Koebnik (http://www.biopred.net/koebnik/koebnik.html) Institut de recherche pour le développement 911, Avenue Agropolis, BP 64501; 34394 Montpellier, Cedex 5 Tel: 04.67.41.62.28; Fax: 04.67.41.61.81; Email: [email protected] Contexte: Plusieur espèces de Xanthomonas, dont X. oryzae pv. oryzae (Xoo) et X. citri pv. citri (Xcc), se disséminent facilement et ont par un impact élevé sur des cultures importantes. Ils font partie des agents pathogènes classés comme « agents biologiques », c’est à dire organismes pouvant être utilisés pour le bioterrorisme. À la lumière de cette classification, le développement de moyens de lutte efficaces contre Xoo et Xcc est primordial. Notre objectif majeur ici, est de développer une méthode simple, nouvelle, rapide, sensible et robuste pour le typage moléculaire de souches. Comme « proof of concept » nous proposons de développer ces méthodologies sur deux espèces modèles de Xanthomonas dont l’impact de l’épidémie représente déjà (ou peut représenter) une menace pour la sécurité alimentaire. Les techniques proposées sont universellement applicables, reproductibles et utilisables rapidement et à un moindre coût dans différents laboratoires et environnements. Elles pourront être facilement utilisables en cas d’introduction accidentelle ou intentionnelle de l’agent pathogène. En résumé, l’originalité de ce projet réside dans l’identification, la caractérisation et l’exploitation de loci CRISPR (Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats) de souches Xanthomonas, loci dont la variabilité facilement exploitable n’avait pas encore été explorée pour les bactéries phytopathogènes. La connaissance des mécanismes qui sous-tendent le développement des maladies bactériennes et l’apparition de nouvelles souches dépend étroitement de la dimension géographique et de l’étude de la génétique des populations. Ces études dépendent de la disponibilité d’outils de typage performants. Notre projet repose donc sur une approche multidisciplinaire qui inclue la surveillance épidémiologique de pathogènes importants et a des applications directes pour le contrôle et la gestion des maladies. Ce projet de part les pathogènes ciblés contribuera à améliorer la sécurité alimentaire globale et à développer des nouveaux outils de tracabilité notamment en cas d’action de bioterrorisme. Le projet a un soutien de l’Agence Nationale de la Recherche (Projet « XANTHracing »). Domaines: Phytopathologie et phylogénétique Profil candidat: Microbiologie; biologie moléculaire; bioinformatique Programme: - Désign et évaluation des amorces CRISPR - Analyse à moyenne échelle des loci CRISPR (hybridation, PCR, séquencage) - Analyse bioinformatique des données CRISPR (base de données, phylogénétique) Références de bases: • Deveau H, Garneau JE, Moineau S (2010). CRISPR/Cas system and its role in phage-bacteria interactions. Annu. Rev. Microbiol. 64: 475-493. • Grissa I, Vergnaud G, Pourcel C (2007). The CRISPRdb database and tools to display CRISPRs and to generate dictionaries of spacers and repeats. BMC Bioinformatics 8: 172. • Horvath P, Barrangou R (2010). CRISPR/Cas, the immune system of bacteria and archaea. Science 327: 167-170. • Marraffini LA, Sontheimer EJ (2010). CRISPR interference: RNA-directed adaptive immunity in bacteria and archaea. Nat. Rev. Genet. 11: 181-190.