Evaluation de la réponse immunitaire spécifique chez la souris

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Université d’Oran
Faculté des Sciences
Département de Biologie
Laboratoire de Physiologie de la
Nutrition et de Sécurité Alimentaire
Thème :
Devant le Jury composé de :
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MEMOIRE DE MAGISTER
Option : Physiologie de la Nutrition et la Sécurité Alimentaire
Présenté par Melle GUENDOUZ MALIKA
Soutenu en : 2010
Devant les membres du jury :
Président : Mr BOUTIBA Z. Professeur, Université d’Oran
Examinateur : Mr KHEROUA O. Professeur, Université d’Oran
Mr SAHRAOUI T. Maître de Conférence A, Université d’Oran.
Rapporteur : Mr SAIDI D. Professeur, Université d’Oran.
Co-rapporteur :
Mme HOUDJEDJ-MEHEDI N. Chargée de Cours, Université d’Oran.
Evaluation de la réponse immunitaire spécifique chez la
souris Swiss après ingestion subchronique de la
tartrazine

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À Dieu, En qui j’ai toujours cru, En qui je croirai toujours.
À mes parents, sans qui je n’aurai jamais réalisé tout ce parcours.
Ce mémoire leur est dédié.
À mes soeurs et mes frères pour leur soutien et leurs
encouragements continus.
Je le dédie à toute ma famille et mes amies.

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Remerciements
Ce travail a été réalisé au laboratoire de Physiologie de la Nutrition et de Sécurité
Alimentaire sous la direction de Monsieur Djamel SAIDI Professeur de Physiologie au
Département de Biologie (Université d’Oran).
Que Monsieur SAIDI et Monsieur KHEROUA veuillent accepter mes remerciements les
plus sincères pour la confiance qu’ils m’ont accordée durant la réalisation de ce travail et surtout
pour m'avoir accueillie au sein de leur équipe de recherche
J’exprime mes plus vifs remerciements à Monsieur Djamel SAIDI pour son encadrement
scientifique, sa disponibilité, ses conseils pertinents. Merci de m’avoir guidée avec patience et
d’avoir consacré autant d’heures pour les corrections de ce manuscrit.
Merci à Monsieur Zitouni BOUTIBA Professeur à l’Université d’Oran qui me fait
l’honneur de présider ce jury. Je lui suis reconnaissante d’avoir accepté ce rôle, et de me faire
l’honneur de juger mon travail.
J’exprime toute ma gratitude à Monsieur Omar KHEROUA Professeur à l’Université
d’Oran qui a bien voulu agir en tant qu’examinateur et qui m’a fourni de précieux conseils tout
au long de la réalisation de ce travail.
J’adresse mes vifs remerciements à Monsieur Toufik SAHRAOUI Maître de Conférence à
l’Université d’Oran, pour sa participation dans l’évaluation de ce travail. Qu’il trouve ici
l’expression de ma très profonde reconnaissance.
Ma profonde reconnaissance va aussi à Mme Nabila HOUDJEDJ-MEHEDI, Chargée de
Cours à l’Université d’Oran, pour sa grande rigueur scientifique et ses conseils avisés. Je la
remercie profondément de m’avoir procuré un coencadrement rigoureux et si précieux.
Ce travail n’aurait pas été aussi efficace sans la contribution de nombreuses personnes dont
le savoir être et le savoir faire méritent d’être soulignés. Merci à : Mme Tabak bessaih, zaoui
chahinaz, Dr Fellah H, Dr Fellah Setti L.
Mes remerciements vont tout particulièrement à Mr Abdellah CHEKROUN pour son aide
scientifique, Mme Hanane NEGAOUI pour toutes ses connaissances qu’elle a su partager avec
joie. Je la remercie pour son aide et ses conseils qui m’ont été précieux pour la réalisation de ce
travail.
Un grand merci et tous mes encouragements à toute ma promotion de magister : Melle Amina
BRAHIM, Melle Fatima TBAHRITI, Melle Nasira LAHOUEL, Melle Abir HADDI, et Melle
Soade BOUDALI et Mr Omar ALAMI.
.
Que toutes les personnes du laboratoire de Physiologie de la Nutrition et de Sécurité
Alimentaire, trouvent ici, l'expression de ma vive reconnaissance : Melle Hanane KADDOURI,
Mr Kamel Edine EL MECHERFI, Mr Khaled NAAMAN, Mme Samia ADDOU, Mr Fateh
MEZMAZ.
Merci infiniment à tous.

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RESUME
La tartrazine est un colorant alimentaire synthétique, très incriminé dans les réactions
d’intolérances chez les personnes sensibles. Les mécanismes physiopathologiques impliqués et
l’immunotoxicité de ce colorant sont peu connus.
Le but de notre travail est d’évaluer la réponse immunitaire spécifique après ingestion
subchronique de la tartrazine chez la souris Swiss, utilisée comme modèle expérimental.
2 groupes de souris comprenant chacun 12 mâles et 12 femelles âgées de 4 semaines et
pesant en moyenne 19g sont utilisés. Les animaux sont nourris à l’aide d’un régime standard et
reçoivent pendant 90 jours consécutifs de l’eau de breuvage supplémentée de tartrazine aux
concentrations respectives de 0,45% et 1%. Chaque essai est comparé à un traitement contrôle
(eau de boisson sans tartrazine) comprenant également 12 mâles et 12 femelles.
Quotidiennement, est déterminé le volume de tartrazine diluée dans l’eau de boisson consommé
par les souris et hebdomadairement le poids corporel.
Après 90 jours d’expérience, 6 souris de chaque groupe sont immunisées par voie sous
cutanée avec une émulsion de SAB et d’adjuvant complet de Freund. Les teneurs des IgG anti-
SAB sont déterminés par méthode ELISA. La rate, le thymus et l’intestin sont prélevés pour
l’étude cytologique et histologique puis la rate et le thymus sont pesés pour déterminer le poids
relatif.
Les résultats obtenus montrent que:
 La consommation subchronique de la tartrazine ralentit significativement l’évolution du
poids corporel des groupes traités à 0,45% et 1% de tartrazine comparés aux témoins
(p<0,05).
 une diminution du poids relatif de la rate chez les animaux mâles traités à 1% de tartrazine
et du thymus chez les mâles du groupe traités à 0.45% de tartrazine (p<0,05).
 La cinétique comparative des titres en IgG anti-SAB montre une diminution très
significative de la teneur en IgG anti-SAB chez les animaux mâles traités à 0,45% et 1%
de tartrazine comparé aux témoins immunisés au J28 ( p<0,01).
 L’observation des coupes histologiques révèlent une modification de l’architecture
tissulaire au niveau de la rate et du thymus avec une augmentation des infiltrats
lymphocytaires ainsi qu’une atrophie villositaire primaire chez les animaux mâles et
femelles traités à la tartrazine aux doses de 0,45% et 1%.
 Sur le plan cytologique, on distingue une hyperplasie cellulaire chez les souris traitées à la
tartrazine à la dose de 0,45% et une atrophie lymphocytaire avec une malformation des
cellules lymphocytaires marquée chez les animaux traités à 1% de tartrazine.
Conclusion: L’ingestion subchronique de la tartrazine entraîne une diminution de la teneur en
IgG-anti SAB sériques chez les mâles et modifie le nombre et la taille des cellules immunitaires
intestinales et l’architecture tissulaire de la rate et du thymus et affecte donc la fonction du
système immunitaire.
Mots clés : Tartrazine – Consommation subchronique – Souris Swiss – IgG – Rate –Thymus –
Intestin.

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SUMMARY
Tartrazine is a synthetic food colorant, very implicated in intolerance reactions in sensitive
individuals. The pathophysiological mechanisms involved and immunotoxicity of this dye is poorly
understood.
The aim of this work is to evaluate the specific immune response after subchronic ingestion of
tartrazine in the Swiss mice, used as experimental model.
2 groups of mice, understanding/including each one 12 males and 12 females 4 weeks old
and weighing on average 19g are used. The animals are feed using a standard diet and receive
during 90 days consecutive water breuvage supplemented with tartrazine with the respective
concentrations of 0,45% and 1%. Each test is compared with to a control treatment (drinking
water without tartrazine) also including 12 males and 12 females. Daily, is determined the
volume of tartrazine diluted in the water of drink consumed by mice and the body weight of each
mouse was also recorded on a weekly basis.
After 90 days of experiment, 6 mice in each group were immunized subcutaneously with
an emulsion of SAB and Freund's complete adjuvant. The contents of the IgG anti-SAB are
determined by ELISA method. The spleen, thymus and intestine were taken for the cytological
and histological study then the spleen and thymus are weighed to determine the relative weight.
The results obtained show that:
 The subchronic consumption of tartrazine to slow down meaningfully the evolution of the
body weight of the groups treated to 0,45% and 1% of tartrazine compared to the witnesses
(p<0,05).
 Reduction in the relative weight of spleen in the male animals treated with 1% of tartrazine
and the thymus in the males of the group treated with 0,45% of tartrazine (p<0,05).
 The comparative kinetic of the titles in IgG anti-SAB shows a decrease in amount of IgG
anti-SAB in male animals treated with 0,45% and 1% tartrazine compared with controls
immunized at D28 (p <0,01).
 Observation of histological sections revealed a change in tissue architecture in the spleen and
thymus with increased lymphocyte infiltration and villous atrophy primary among males and
females treated at doses of tartrazine 0,45 % and 1%.
 On cytological level, there is cell hyperplasia in mice treated with tartrazine in doses of
0,45% and lymphocytic atrophy with lymphocytic cells malformation marked in animals treated
with 1% tartrazine.
Conclusion: the subchronic ingestion of tartrazine causes a decrease in the amount of IgG anti-
serum SAB of males mice and modifies the number and size of intestinal immune cells and the
tissular architecture of the spleen and the thymus and thus affects the immune system function.
Keywords: Tartrazine - Consumption Subchronic - Swiss mice - IgG- Spleen- Thymus- Intestine.