La brucellose UMC 2014-15 2012-2013 Unité Maladies Contagieuses 1 Plan du cours 1- Généralités 2- la brucellose bovine 2-A Situation épidémiologique 2-B Aspects réglementaires 3- la brucellose des petits ruminants 4- la brucellose des suidés (cf. MRC2) UMC 2014-15 2012-2013 Unité Maladies Contagieuses 2 1-Quelques généralités Maladie pérenne touchant de nombreuses espèces et provoquant majoritairement des avortements Répartition quasi-mondiale Zoonose majeure UMC 2014-15 2012-2013 Unité Maladies Contagieuses 3 1-Généralités L’agent pathogène Genre Brucella : coccobacille non sporulé 6 espèces principales : abortus, melitensis, suis, ovis, canis, neotomae Bactérie très résistante dans le ME. Chaque espèce affecte préférentiellement un hôte donné Plusieurs biovars / espèce ( de tropisme d’hôte, de virulence, de localisation géographique traçabilité) UMC 2014-15 2012-2013 Unité Maladies Contagieuses 4 1-Généralités Hôtes préférentiels et symptomatologie associée aux différentes Brucella Espèce Brucella Avortement Orchiépididymite Arthrite, bursite Bovins B. abortus +++ + + Ovins-Caprins B. melitensis +++ + + Porcins B. suis +++ + ++ Ovins B. ovis ± +++ - Chien B. canis +++ + ++ Cheval B. abortus ± ± +++ Lièvre B. suis - + - HOMME B. melitensis - + +++ Maladie réglementée de catégorie 1 : toutes espèces de mammifères et toutes espèces de Brucella (sauf B. ovis & B. suis 2) UMC 2014-15 2012-2013 Unité Maladies Contagieuses 5 1-Généralités Principaux aspects cliniques Généralement asymptomatique Sinon : manifestations essentiellement génitales : 1/ Femelle : avortement (cf. définition réglementaire) - Unique dans > 80% des cas - Rétention placentaire fréquente - endométrite (et surinfections) - stérilité temporaire ou définitive 2/ Mâle : Orchite +/- épididymite Symptômes extra-génitaux (Hygroma, arthrites) UMC 2014-15 2012-2013 Unité Maladies Contagieuses 6 1-Généralités Excrétions et matières virulentes Excrétion • avant, pendant, après (2-3 semaines) avortement ou en absence de signes cliniques • peut durer toute la vie : surtout chèvre Matières virulentes • Produits d’avortement Excrétion maximale : bovin 1012 – 1013 Brucella /ml milliers de génisses • Lait, Sperme,…(urine… sueur, poils…) • Aérosols : DI50 = 104 à 105 TRES CONTAGIEUX UMC 2014-15 2012-2013 Unité Maladies Contagieuses 7 1-Généralités Brucellose et réponse immunitaire Réponse humorale : • Reflet sensibilisation organisme (Ac non protecteurs) • Peut persister toute la vie • Réactions croisées avec Ag environnement : Surtout Yersinia enterocolitica 09, qui réponse Transitoire en général (<30j chez 60% BV) - Surtout animaux jeunes - Souvent <2% des animaux troupeaux ) Réponse cellulaire : • Bcp moins de réponses non spécifiques ECA = Epreuve cutanée allergique : cf. infra UMC 2014-15 2012-2013 Unité Maladies Contagieuses 8 1-Généralités Modes de transmission Verticale 5% à 10% des veaux restent porteurs - sans symptôme, - réaction négative aux tests dépistage (Immuno-tolérants) Horizontale Directe Cohabitation (voie digestive, cutanée conjonctivale, respiratoire, vénérienne…) Indirecte Locaux, matériel, pâtures contaminés UMC 2014-15 2012-2013 Unité Maladies Contagieuses 9 1-Généralités Objectifs Objectif : Justifier l’interprétation et la faisabilité des résultats des différentes techniques de dépistage et de diagnostic et les appliquer à une étude de cas UMC 2014-15 2012-2013 Unité Maladies Contagieuses 10 1-Généralités Prélèvements Dépistage Diagnostic (avortement) Sécrétions génitales Bactériologie : -bactérioscopie Color° de Stamp -PCR -culture et biotypage Sang, Lait Sérologie Sang Sérologie UMC 2014-15 2012-2013 Unité Maladies Contagieuses 11 1-Généralités Mise en évidence d’une réponse immunitaire 1/ Réponse humorale • Dans le sang E.A.T. ELISA RFC (individuel / mélange ou EAT : Epreuve à l’antigène tamponné RFC : Réaction de fixation du complément • Dans le lait (mélange) ELISA lait de mélange Très spécifique et très sensible = test de référence UMC 2014-15 2012-2013 Unité Maladies Contagieuses 12 1-Généralités 2/ Réponse cellulaire ECA = épreuve cutanée allergique Mise en évidence d’une réaction d’H.S.R. Technique Similaire à IDT chez bovins (injection paupière chez petits ruminants) Mesure initiale du pli de peau Injection ID de 0,1mL de brucelline Lecture : 72h plus tard Si épaississement pli de peau ≥ 2mm = positif Si épaississement du pli de peau < 2mm = négatif Interprétation : échelle troupeau Caractéristiques Très spécifique (~100 %) Peu sensible (60-80%) UMC 2014-15 2012-2013 Unité Maladies Contagieuses 13 1-Généralités Caractéristiques des tests immunologiques 1. Réponse humorale Ac sérum Ac lait Sensibilité EAT FC ELISA ELISA lait de mélange Spécificité UMC 2014-15 2012-2013 Unité Maladies Contagieuses 14 1-Généralités 2. Réponse cellulaire : ECA Ac sérum Ac lait Sensibilité EAT ECA FC ELISA ELISA lait de mélange Spécificité ECA : Epreuve cutanée (intra-dermo) allergique (brucelline) UMC 2014-15 2012-2013 Unité Maladies Contagieuses 15 1-Généralités 3. Applications : stratégie mise en jeu a/ Tests de1ère intention : ELISA Tests 1ère intention Association systématique EAT/ELISA à RFC 100% Sensibilité 100% Spécificité EAT FC UMC 2014-15 2012-2013 Unité Maladies Contagieuses 1-Généralités a/ Tests de2ème intention : ELISA Tests 1ère intention Association systématique EAT/ELISA à RFC EAT 100% Sensibilité Option 1 : répétition mêmes tests après délai suffisant FC 100% UMC 2014-15 2012-2013 Unité Maladies Contagieuses Spécificité 1-Généralités a/ Tests de2ème intention : ELISA Tests 1ère intention Association systématique EAT/ELISA à RFC 100% Sensibilité 100% Spécificité EAT FC Option 2 (si possible) ECA systématique si RFC + ECA UMC 2014-15 2012-2013 Unité Maladies Contagieuses 2-Brucellose BV 2 - La brucellose bovine Danger sanitaire de 1ère catégorie (si isolement de toute Brucella sauf B. ovis ou B. suis biovar 2) UMC 2014-15 2012-2013 Unité Maladies Contagieuses 19 2A-Brucellose BV 2a - Situation épidémiologique en France Objectif : Exposer la situation épidémiologique en France, son évolution et la situation actuelle UMC 2014-15 2012-2013 Unité Maladies Contagieuses 20 2A-Brucellose BV Evolution en France de 2005 à 2011 Incidence des cheptels infectés (1995 à 2011) Statut Officiellement Indemne en 2005 Rautureau et al., Bilan MRC 2011 = Aucun cas de brucellose bovine entre 2003 et 2011 UMC 2014-15 2012-2013 Unité Maladies Contagieuses 21 2A-Brucellose BV Brucellose bovine : 2012 Cas n°1, Calais, 22/03/2012 : vaches originaires de Belgique B. abortus biovar 3 Cas n°2, Alpes, 06/04/12 : Avortement d’une vache Surprise ! B. melitensis biovar 3 (consommation fromage au lait cru) 3 cas humains Source : bouquetins infectés = Foyer autochtone (biovar fréquent chez Bv avant 1999) Gestion: - Elevages : mesures de surveillance renforcées + de biosécurité dans les alpages - Bouquetins : abattage partiel (Anx > 5ans) Absence de cas bovins déclarés depuis 2012 UMC 2014-15 Unité Maladies Contagieuses 2012-2013 2B-Brucellose BV Objectifs Objectif : Présenter les mesures réglementaires de lutte UMC 2014-15 2012-2013 Unité Maladies Contagieuses 23 2B-Brucellose BV Historique rapide de la lutte en France Taux de prévalence annuelle d’infection cheptel 50% 15% 1965 1975 Lutte Début lutte obligatoire Toute la France 1984 0,5% 0,02% 0% 1990 2003 2005 France « indemne » au plan européen Départements les + atteints Prophylaxie médico-sanitaire Prophylaxie sanitaire stricte Interdiction vaccination UMC 2014-15 2012-2013 Unité Maladies Contagieuses 24 2B-Brucellose BV 2b - Aspects réglementaires UMC 2014-15 2012-2013 Unité Maladies Contagieuses 25 2B-Brucellose BV Prophylaxie et surveillance Prophylaxie Contrôle sérologique de tous les troupeaux Laitiers : 1 ELISA mélange/an Allaitants : 20% des BV>24 mois Surveillance Déclaration et investigation de tous les avortements UMC 2014-15 2012-2013 Unité Maladies Contagieuses 26 2B-Brucellose BV Que faire en cas d’avortement ? Avortement : Expulsion du fœtus ou du veau, soit né mort soit succombant dans les 48 h après la naissance (Article R.223-79 du Code Rural) Déclaration OBLIGATOIRE Prise de sang (tube sec) EAT et RFC Ecouvillonnage du col LE MEME JOUR ? (f° DDPP) - analyse (bactériologie, PCR) réalisée si résultats sérologiques positifs pour les deux tests • Possible de manière différée, mais : - 15 jours post-avortement - Pas de traitement antibiotique UMC 2014-15 2012-2013 Unité Maladies Contagieuses 27 2B-Brucellose BV Les différentes catégories de cheptels UMC 2014-15 2012-2013 Unité Maladies Contagieuses 28 2B-Brucellose BV Définitions réglementaires : Cheptels Cheptel qualifié = Officiellement indemne (O.I.) Suspect d’être infecté si bovin suspect Cheptel non qualifié INFECTE 1ère catégorie si bovin infecté Susceptible d’être infecté : Lien épidémiologique avec cheptel infecté UMC 2014-15 2012-2013 Unité Maladies Contagieuses 29 2B-Brucellose BV Cheptel OI : Attribution qualification Constitution ou création d’un cheptel : 1. Introduction de Bv cheptel O.I. o o Quarantaine Contrôle favorable* (Bv > 24 mois, 30j avant départ): - Elisa (individuel ou mélange): si non négatif EAT - EAT : si non négatif RFC *Dérogation au contrôle à l’introduction (depuis 2005) : Si délai entre départ et arrivée des BV 6 jours (Sauf si exploitation départ classée à risque) 2. Pas de contacts autres espèces sensibles 3. Déclaration des avortements UMC 2014-15 2012-2013 Unité Maladies Contagieuses 30 2B-Brucellose BV Cheptel OI : Maintien de la qualification 1. Contrôle annuel Sérum : 1 EAT (ou Elisa mélange) 20% Bv >24 mois ou Lait : 1 Elisa sur lait de mélange 2. Introduction de BV cheptel O.I. (idem acquisition) Dérogation au contrôle à l’introduction (depuis 2005) 3. Déclaration des avortements 4. Visite obligatoire (annuelle) par le VS = contrôle maîtrise F. risque brucellose (+TB…) par éleveur UMC 2014-15 2012-2013 Unité Maladies Contagieuses 31 2B-Brucellose BV Différentes catégories d’animaux Qui permettent de définir les catégories de cheptels UMC 2014-15 2012-2013 Unité Maladies Contagieuses 32 2B-Brucellose BV Définitions réglementaires des animaux Animaux indemnes : cheptel qualifié Animaux non indemnes : Infectés Contaminés Suspects En cours de confirmation UMC 2014-15 2012-2013 Unité Maladies Contagieuses 33 2B-Brucellose BV Animal indemne « Animal qui provient d’un troupeau indemne » et n’a pas avorté et sans test sérologique défavorable (si testé) UMC 2014-15 2012-2013 Unité Maladies Contagieuses 34 2B-Brucellose BV Animal en cours de confirmation 1. Bv d’un élevage O.I. • Contexte clinique Avortement, en attente résultats sérologiques • Contexte de prophylaxie un sérum EAT et FC positifs Elevage reste indemne Immobilisation Bv en attente résultats investigations complémentaires 2. Bv d’un troupeau non O.I. (suspect, susceptible d’être infecté) Immobilisation en attente des résultats UMC 2014-15 2012-2013 Unité Maladies Contagieuses 35 2B-Brucellose BV Animaux suspects • Signes cliniques Avortement et EAT et FC positifs ou ELISA et FC positifs ou A partir d’1 prélèvement de sang • Prophylaxie Sérum : 2 EAT et FC positifs sur 1 bovin [ 60 jours] lait : 2 Elisa lait de mélange positifs [ 60 jours] 1 ECA positif Elevage suspect APMS Tests complémentaires cas index Autres Bv élevage en cours de confirm° 36 UMC 2014-15 2012-2013 Unité Maladies Contagieuses 2B-Brucellose BV Les animaux infectés 1. Dans un élevage jusqu’alors (supposé) non infecté Isolement et identification de Brucella (sauf B. ovis) PCR positive 2. Dans un élevage déjà reconnu infecté Si réaction sérologique ou allergique positive Elevage infecté APDI* Abattage total UMC 2014-15 2012-2013 Unité Maladies Contagieuses 37 2B-Brucellose BV Les animaux contaminés Dans un élevage infecté : Tous les bovins autres que les bovins infectés = tous ceux fournissant une réponse négative à un test APDI* Abattage total UMC 2014-15 2012-2013 Unité Maladies Contagieuses 38 2B-Brucellose BV Bilan : définitions réglementaires des animaux et élevages et liens entre eux ELEVAGES Officiellement indemnes ANIMAUX Indemnes Officiellement indemnes Susceptibles d’être infectés Suspects Suspects Infectés UMC 2014-15 2012-2013 Unité Maladies Contagieuses En cours de confirmation : Suspects Infectés Contaminés 39 Bilan : différentes catégories de bovins 2B-Brucellose BV STATUT CIRCONSTANCES Indemne Appartient à un élevage indemne -Avortement en attente résultat EAT et FC En cours de -Dépistage : Sérum EAT+ et FC+ confirmation -Appartient à un troupeau indemne ou susceptible d’être infecté ou suspect -Avortement et sérologie + (EAT + et FC+ OU Suspect d’être ELISA+ et FC) Non infecté -1 ECA+ indemne - dépistage : 2 EAT+ et FC+ à 60j d’intervalle Infecté Contaminé -Mise en évidence Brucella (culture ou PCR) -Séro+ si appartient à un cheptel infecté Séro- mais appartient à un cheptel infecté UMC 2014-15 2012-2013 Unité Maladies Contagieuses 40 2B-Brucellose BV Mesures dans les troupeaux UMC 2014-15 2012-2013 Unité Maladies Contagieuses 41 2B-Brucellose BV Mesures dans troupeaux suspects d’être infectés APMS mesures de police sanitaire • Recensement, identification ; • Isolement bovins suspects ; • Interdiction entrée, sortie ; • Investigations, tests diagnostiques • Interdiction vente lait (+ produits) cru(s) ; thermisation obligatoire. • Recouvrement de la qualification si résultats favorables UMC 2014-15 2012-2013 Unité Maladies Contagieuses 42 2B-Brucellose BV Mesures dans les cheptels infectés APDI mesures de police sanitaire Mesures générales Blocage Recensement et identification des espèces sensibles Marquage et abattage total : tous les Bv : délai 30 j (y compris races d’intérêt local) NDVS*, reconstitution & requalification cheptel. *NDVS = nettoyage - désinfection –UMC vide sanitaire 2014-15 Unité Maladies Contagieuses 2012-2013 43 2B-Brucellose BV Mesures dans troupeaux susceptibles d’être infectés • « DD(CS)PP peut décider APMS » • Tout ou partie des mesures des cheptels suspects. • Retour qualification si résultats favorables. • Possible surveillance sérologique renforcée par la suite. UMC 2014-15 2012-2013 Unité Maladies Contagieuses 44 2B-Brucellose BV Bilan : mesures dans les troupeaux O.I. O.I. avec Bv en C.C.* APMS APDI Suspect Infecté Susceptible d’être infecté APMS ? *en C.C. = en cours de confirmation UMC 2014-15 2012-2013 Unité Maladies Contagieuses 45 3-Brucellose Pt Rm 3 - La brucellose des petits ruminants Danger sanitaire de 1ère catégorie (si isolement de toute Brucella sauf B. ovis ou B. suis biovar 2 UMC 2014-15 2012-2013 Unité Maladies Contagieuses 46 3-Brucellose Pt Rm Généralités • • • • • • Brucella melitensis (France : biovar 3) Très pathogène pour l’Homme Facilité de propagation (aérienne) Pathogène pour les bovins Infection du bassin méditerranéen Historique France • Chèvres peu infectées • Ovins (historiquement surtout Sud-Est) UMC 2014-15 2012-2013 Unité Maladies Contagieuses 47 3-Brucellose Pt Rm Brucellose des petits ruminants Des tableaux contrastés en f° des espèces : Manifestations cliniques Avortement (3ème mois) Peu voire pas de signes Rétention placentaire, cliniques stérilité temporaire, mammite… ! Persistance de l’infection Auto-stérilisation » Mais… persistance à vie fréquente mais… de l’infection persistance possible UMC 2014-15 2012-2013 Unité Maladies Contagieuses 48 3-Brucellose Pt Rm Brucellose PR : évolution 1995-2011 Répartition historique Evolution de l’incidence (France , 1995-2011) Rautureau 2011 2012 : 64 départements officiellement indemnes (UE) Aucun cas de brucelloseUMCovine et caprine depuis 2004 2014-15 Unité Maladies Contagieuses 2012-2013 49 3-Brucellose Pt Rm Brucellose des ovins : Type de prophylaxie France indemne Prophylaxie sanitaire stricte Interdiction vaccination depuis 2008 Rythme variable selon dpts, annuel si lait cru ♂ : Tous > 6 mois ♀ : > 25 % en âge de reproduction (min 50 brebis) PS individuelles UMC 2014-15 2012-2013 Unité Maladies Contagieuses EAT Si + RFC 50 3-Brucellose Pt Rm Brucellose des caprins : type de prophylaxie Prophylaxie strictement sanitaire Rythme variable selon dpts, annuel si lait cru EAT sur tous les caprins > 6 mois PS individuelles UMC 2014-15 2012-2013 Unité Maladies Contagieuses Si + EAT FC 51 3-Brucellose Pt Rm Brucellose PR : Principales ≠ réglementaires p/t Brucellose Bv Mesures : brucellose Bv mais : - D.O. avortements : Suspect si 3 avortements en max 7 jours, avec EAT et RFC+ - Pas d’utilisation de tests ELISA - Dérogation abattage total si Brucella autre que B. melitensis ou B. abortus UMC 2014-15 2012-2013 Unité Maladies Contagieuses 52 Les différentes catégories d’animaux 3-Brucellose Pt Rm STATUT CIRCONSTANCES Indemne Appartient à un cheptel indemne -Résultat non négatif EAT et FC -Appartient à troupeau où 3 avortements En cours de détectés en 7j max confirmation -Appartient à troupeau suspect ou susceptible d’être infecté -EAT+ et FC+, 2 fois à 60 j d’intervalle Non Suspect d’être -ECA + indemne infecté -Avortement et résultats (EAT + et FC+) Infecté Contaminé -Isolement et identification de Brucella (sauf B. ovis ou B. suis biovar 2) (culture ou PCR+) -(EAT+ et/ou FC+) ou ECA+ si cheptel infecté 2013-14 Appartient à cheptel infecté UMC et séro - Bru UMC 2014-15 Unité Maladies Contagieuses 2012-2013 53 53 4-Brucellose Suidés 4 - La brucellose des suidés Cf. cours MR suidés (A3) UMC 2014-15 2012-2013 Unité Maladies Contagieuses 54 Conclusion Ruminants : Considérée éradiquée jusqu’à début 2012 surveillance ruminants domestiques (D.O. avortements !) et faune sauvage (infection chronique bouquetins : problème non encore éliminé) maîtrise des risques, enquête en cas de foyer Brucellose : Problème économique ET zoonotique majeur La vigilance reste de mise ! UMC 2014-15 2012-2013 Unité Maladies Contagieuses 55