resume-microbiologie

Examen de biologie
Structure générale d’une bactérie = cellule procaryote
Généralités :
- Taille de l’ordre du micron
- Forme :
o Sphériques = coques
o Cylindriques ou bâtonnets = bacilles
o Spiralées = spirilles
La paroi :
- Coloration de Gram  bactéries GRAM + et bactéries GRAM – selon la couleur qu’elles ont
suite au test de GRAM
- Elle est flexible : pour que la bactérie puisse se déplacer facilement
- Elle empêche la bactérie d’exploser par phénomène de turgescence, lors que la bactérie se
trouve en milieu de fortement dilué. La pression osmotique varie de 5 à 20 atm et varie en
fonction du milieu dans lequel la bactérie se trouve.

Les bactéries Gram + :
Elles ont une couche de Peptidoglycane importante
Les peptidoglycanes :
- constitué de nombreux polymères de sucres
Une succession de NAG = N-acétylglucosamine et de NAM = acide N-acétylmuramique
- ces chaines de sucre sont reliées entre elles par l’intermédiaire de tétra peptides sur lesquels
il existe un lien covalent = pont penta peptidique (5 Gly) entre la L Lys et la D Ala d’un autre
tétra peptide
D’où - paroi rigide (grâce aux lient covalent et pont H)
En + de cette couche de peptidoglycanes il y a aussi :
- les acides lipotéïchoîques présentent sur toutes les Gram + = PERMANENTS
- les acides téchoïques présentent sur certaines Gram + = OPTIONNELS
Ce sont des polymères soit de glycérol phosphates soit de ribitol phosphates
Leur rôle : antigènes

Les bactéries Gram - :
Elles sont constituées de quelques peptidoglycanes
Les chaines sont reliée entre elles via un lien direct entre l’acide méso DAP et le D Ala de 2
tétrapeptides voisins. Ce type de liaison va donner moins de rigidité, le peptidoglycane sera plutôt
mou
En plus de cette couche de peptidoglycanes les Gram – ont une membrane externe :
- une bicouche lipidique constituée de phospholipides, de lipopolysaccharides (LPS) et de
protéines
- apporte une certaine rigidité à la paroi des Gram – pour palier à la faible couche de PG

Comparaison des Gram – et Gram + :
Gram +
Gram –
Dans le peptidoglycane on retrouve de la L Lys
Dans le peptidoglycane on retrouve de l’acide
méso DAP
Les chaines de peptidoglycanes sont liées via des
pont penta peptidique (5Gly), possible de se lier
à 2 chaines voisines
Les chaines de peptidoglycanes sont liées via des
liens directs entre l’acide méso DAP d’une
chaine et le D Ala d’une autre chaine, possible de
se lier à juste 1 chaine voisine
La paroi est très épaisse car contient beaucoup
de couches de peptidoglycanes
La paroi est très peu épaisse car elle contient
peu de couches de peptidoglycanes
Elles ne possèdent pas de membrane externe
Elles ont une membrane externe
Teste de Gram :
- Faire un prélèvement dans une culture de bactéries pure (= une seul souche) avec une anse
de platine (boucle de 5 µl) ; le milieu = suspension ≠ solution
- Etaler sur une lame de verre
- Chauffer au bec bunsen afin de fixer les bactéries
- Ajouter une solution de Crystal violet (= colorant), il pénètre dans le cytoplasme des Gram –
mais pas celui des Gram + à cause de la couche de peptidoglycane trop épaisse.
- Ajouter une solution de lugol (=I2+KI) qui va se complexer avec le cristal violet
- On lave ensuite la lame avec une solution d’alcool et acétone
- On ajoute un dernier colorant le Safranin
- A la fin de ces différentes étapes :
o Les Gram + = coloration pourpre
o Les Gram - = coloration rouge

La membrane externe des Gram - :
Elle se compose de :
- Phopholipides
- Les lipopolysaccharides sont constitués d’un lipide (rôle : endotoxine) et d’un antigène
- les protéines :
o protéines majeurs :
 il y en a 3 à 4 types
 70% des protéines membranaires
 Ex : les protéines matricielles (= PORINES)
 Rôle : transfert de petites molécules et ions
o Protéines mineures :
 Une 12é de types
 Rôle : transportes spécifiques et récepteurs
o Lipoprotéines :
 Forme des liens covalents avec le peptidoglycane