SBI4U L. Kutchaw 2015 RA: J’explique les mécanismes d’expression génétique, la réplication de l’ADN, le dogme central et les principales découvertes ayant contribué au développement du génie génétique moléculaire et j’évalue les enjeux retombés de ceux-ci. Chez les procaryotes, la transcription comporte moins d’étape. La copie du gène sous forme d’ARNm est utilisé directement pour la traduction. Chez les eucaryotes, le transcrit primaire est modifié avant d’être exporté du noyau vers le cytoplasme. Les introns (sections non-codantes) sont excisés (épissage des introns), une coiffe est ajouté à l’extrémité 5`et une queue poly-Adénine est ajouté à l’extrémité 3`. Ces structures protège le ARNm mature dans le cytoplasme. ARNm eucaryote ARNm mature coiffe Queue: polyA ARNpol site de terminaison 5` 3` Brin qui sert de matrice (noncodant) promoteur Direction de la transcription ARNm nucléotides http://www.nature.co m/scitable/topicpage/ dna-transcription426# procaryotes -35 -10 eucaryotes Procaryotes (bactéries) Eucaryotes (organismes multicellulaires et la levure) ARN polymérase (un complexe) Lecture de 3`à 5 ARN polymérase (3 types de complexes) ARNpol I ARNr, ARNpol II ARNm et ARNpol III ARNt et autres petits ARN Lecture de 3`à 5` Site pour débuter l’initiation: promoteur Site pour débuter l’initiation: promoteur à l’extrémité 5`du gène (environ 10 pb et (boîte TATA) à -25pb et site TFIIB à -35 35 pb avant le gène). Ces sites donnent pb à l’extrémité 5`du gène un lieu de liaison à ARNpol Élongation (rapide) 5`à 3`, ajout des nucléotides libres pour former le ARNm La chromatine doit être acessible… Élongation (lente) 5`à 3`, ajout des nucléotides libres pour former le ARNm Terminaison ARNm traduit directement Terminaison transcrit primaire de l’ARNM est modifié pour produire du ARNm mature RNA Transcription by RNA Polymerase: Prokaryotes vs Eukaryotes par Suzanne Clancy, Ph.D. © 2008 Nature Education http://www.nature.com/scitable/topicpage/rna-transcription-by-rna-polymerase-prokaryotes-vs-961 5` 3` Leucine (a.a.) lié à l’aide de ligase aminoacyl-ARNt Codon ARNm: CUU Les mutations monogéniques Mutation ponctuelle (séquence des nucléotides) Mutation du cadre de lecture (séquence des nucléotides) Mutation silencieuse (effet sur le polypeptide) Mutation faux-sens (effet sur le polypeptide) Mutation non-sens (effet sur le polypeptide) Mutations chromosomiques Délétion Duplication Inversion Translocation réciproque Agent interne – Transposons Agent externe – Mutagène Mutagènes physiques (ex. rayons X, rayons UV) Mutagènes chimiques (ex. nitrites, vapeurs d’essence, fumée de cigarette) Les mutations donnent la variété génétique, elles peuvent être positive, négative ou neutre. Une mutation à effet positive sur le phénotype peut être favorisé par la sélection naturelle et mener à l’évolution ADN polymérase répare plusieurs mutations avant même qu’elles se manifestent sous forme de phénotype. Photoréparation pour les mutations induites par le rayonnement UV Réparation nonspécifique: il existe des complexes de protéines capables d’exciser des nucléotides érronés pour permettre à ADNpol de les remplacer