DEV12.08 A-0609 SESSION 2009 ___________ Filière BCPST-Véto BIOLOGIE Epreuve A Durée : 3 h 30 ____________ L’usage de la calculatrice, d’abaques et de tables est interdit pour cette épreuve Sujet : Les acides ribonucléiques N.B.1 : L’étude de ces molécules est envisagée chez les eucaryotes, les procaryotes et les virus. Le contrôle de leur synthèse est exclu. N.B.2 : Les formules de quelques nucléotides et le code génétique sont fournis en annexe au verso de cette feuille. ____________ ANNEXE QUELQUES NUCLEOTIDES LE CODE GENETIQUE Barème de correction du devoir N°3 : soin, écriture, schémas titrés annotés, orthographe, qualité de la rédaction Introduction : amener L’ADN = acide nucléique support de l’information génétique des êtres vivants (eu + noyau ; pro + nucléoïde, expression génétique liée à d’autres acides nucléiques les ARN, également support d’info. de certains virus (particules nucléoprotéines parasites absolus de cellules poser « les » A.R.N. pluriel = diversité de séquences et donc de structures en relation avec leurs fonctions lors de l’expression de l’information génétique limiter et donner le plan : approches de la diversité biochimique puis diverses modalités de synthèse selon l’organisme (ou le virus) considéré et enfin leur coopération f (relation structure/fonction ) lors de la synthèse des protéines ILa biochimie des ARN A- Des macromolécules polynucléotidiques séquencées : Bases puriques/ pyrimidique, ribose U ARN/T ADN exp. Rapports A/U et G/C différents de 1 => simple brin (monocaténaire) mais Complémentarité possible A///U C//G avec le document en Annexe, PM variable Liaison phosphodiester bases modifiées (CH3) D D B- La diversité des ARN : Séparation : extraction par solvants organiques = f(solubilité) ; Centrifugation sur gradient de densité Electrophorèse sur gel f(PM) S = Svedberg (coefficient de sédimentation) tableau comparatif D ARNm, ARNt, ARNr, petits ARN nucléaires (snARN) aussi associés aux protéines C- La structure spatiale : f(Appariements par complémentarité et antiparallélisme des bases) et anti// constituant des zones rigides double brin et des boucles simple brin. Exemple d’ARNt (trèfle et L) DD Tr- Message héréditaire ADN (ou ARN support de l’info. génétique chez les virus) transcrit II- La synthèse des ARN (mener obligatoirement une approche comparative eu/pro) A- Mise en évidence (exp. Eucaryotes Puffs par exemple U* transcription / exp. hybridation ADN /ARN ovalbumine maturation) D B- La transcription de l’ADN en ARN chez les procaryotes et eucaryotes (préARN) Initiation D : facteurs sigma/TBP & TF, ARNpol /ARNpol I, II et III, promoteur (séquence consensus, Pribnow/TATAbox) sites de contrôles, reconnaissance brins sens (message héréditaire) et antisens (transcrit ou matrice), 1ère incorporations de ribonucléosides triphosphates élongation D : liaison Pester, incorporation par complémentarité et antiparallélisme, segment court ADN/ARN, ARNpol processive vitesse (100.s-1 /20.s-1) fréquence d’erreurs x100/ ADNpol, système de correction, arbre de Noël (c’est bientôt super !!! q;-)) terminaison D : séquence AT + tige boucle, facteur rho C- La maturation des préARN chez les eucaryotes : préARN ARNr ARNt Prémessager ARNm f(endonucléase + polyApolymérase) coupure f(AAUAAA) capping en 5’(coiffe Méthyl7guanosinePPP) queue polyA, Epissage (snurps) élimination des introns, spliceosome = RNPsn (ribozymes ?) ; alternatif D- Le cas particulier des virus : Info. ARN limité à quelques dizaines de milliers de paires de bases et quelques gènes (enzymes, protéines capsidiales, protéines modifiant la cellule hôte) expression via transcription ; Cas particulier des virus à ARN – (Hors programme) ou ARN + (mosaïque du XX XX X X X X X X X X XX X X X X X X X X X XX X X X X X X X X X X X X XX X XX X XX X X Tabac) L’ARN est traduit (réplicase, hélicase) et transcrit donnant une forme réplicative hybride ARN+/- f(réplicase virale) ARN subgénomiques Intégration in ADN transcriptase réverse intégrase (SIDA = rétrovirus) provirus, cycle lysogénique et lytique (expression transcription avec épissage alternatif possible donnant différentes ARN et le génome complet viral non épissé Tr- molécules actives in compartiment cytosolique via pores nucléaires du noyau des eucaryotes ou traduction commence alors que la transcription n’est pas terminée chez les procaryotes (arbre de Noël avec les boules (ribosomes !!!) D III- La coopération fonctionnelle des ARN lors de la traduction A- Mise en évidence des rôles des ARN (outils de la traduction) Porteur de l’information génétique (exp. Mosaïque du tabac) ARN monocaténaire + avec ou sans traduction directe (ex. rétrovirus SIDA) ou – (répliqué par une polymérase en + avant expression ARN m : messager intermédiaire entre ADN et protéines (exp. Jacob & Monod) message codon (code génétique non chevauchant, redondant, quasi universel) ARN ribosomiens associés aux protéines dans les ribosomes (postes d’assemblage à 3 sites E/P/A) 70S = 50S (ARN 23S+5S) + 30S(ARN 16S) fonction de ribozyme ARN transfert : adaptateurs des a.a. (3’CAA) aux ARNm (exp.), aminoacyl-ARNt synthétase ; boucles D, T et anti-codon, Reconnaissance codon /anticodon : appariements flottants, Inosine redondance Autres fonctions dans particules ribonucléoprotéiques (snurps déjà vues), particules PRS impliquées dans la translocation des polypeptides vers la cavité du RER…) B- Les ARN dans la synthèse des protéines et leur devenir (rédaction non récitée mais adaptée = f(sujet ARN) svp !) Initiation D complémentarité ARNm/ARNs16S séquence Dalgarno Formyl-MET / Méthylguanosine Les ARN antisens contrôlent la traduction (exemple : les ARN MIC, complémentaires de l'extrémité 5' d'un ARNm et inhibant sa fonction). Ils peuvent être également obtenus par génie génétique. ARN interférents interagissant avec un ARN messager spécifique conduisant à sa dégradation et à la diminution de sa traduction en protéine (Nobel 2006). Elongation D ribozymes peptidyl-transférase, facteurs sp. . Coût énergétique (GTP) différentes étapes décrites contrôle et processivité Terminaison D codon stop, RF GTP hydrolase et distribution dans compartiment (PRS Particule Reconnaissant Signal, ribosome) Tr- Autres ARN pouvant être évoqués : ARN des télomérases (réplication des eucaryotes Conclusion : rôle central dans l’expression génétique des ARN en interactions avec enzymes et aussi protéines de structure (ribosome), support d’info intermédiaire (ARNm) voire support permanent chez certains virus, coopération fonctionnelle (ARNm, ARNt, ARNr, ARNsn…, relations structures sp. /fonctions spécialisées Ouverture : Contrôle de la synthèse (adaptations du métabolisme des procaryotes ou expression séquentielle au cours du développement des eucaryotes, parasitisme des virus OU (et) premières molécules du vivant probables, arguments : ribosomes => désoxyribonucléotides, réplication des ARN possible, ARN enzymes = ribozymes X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X XX X X X XX X X X X X X X X