Bull. Inst. Natn. Scien. Tech. Mer de Salammbô, Vol. 33, 2006 ETUDE DE LA RESISTANCE AUX ANTIBIOTIQUES DES BACTERIES ISOLEES DE MYTILUS GALLOPROVINCIALIS. Kaouthar BOUAMAMA*, M. EL BOUR, R. MRAOUNA et A. EL ABED. *Institut National des Sciences et Technologies de la Mer 28, Rue 2 Mars 1934, 2025 Salammbô- Tunisie E-mail : [email protected] Mytilus galloprovincialis ( ) 70 12 Aeromonas hydrophila Propioni acnes 25 Mytilus galloprovincialis RESUME L’étude des résistances vis-à-vis de différentes substances antibiotiques pour des espèces bactériennes (aérobies et anaérobies) isolées chez Mytilus galloprovincialis a été réalisée par la méthode standard de l’antibiogramme. Ainsi, 50 souches bactériennes aérobies et 20 souches anaérobies appartenant à plus de 25 espèces différentes ont été isolées et testées. Les résultats obtenus montrent des profils à plusieurs résistances vis-à-vis des différentes familles d’antibiotiques testés. Les résultats obtenus révèlent des profils à 12 résistances différentes notamment chez l’espèce anaérobie (Propioni acnes). Aussi, chez l’espèce aérobie pré dominante ( Aeromonas hydrophila) nous avons mis en évidence au moins 6 antibiotypes différents. Ces résultats montrent la prépondérance de bactéries multirésistantes aux antibiotiques hébergeant dans la moule Mytilus galloprovincialis prélevée d’un milieu naturel (la lagune de Bizerte). Mots clés : Mytilus galloprovincialis, bactéries, profil de résistance aux antibiotiques, lagune de Bizerte. ABSTRACT Study of the antibiotic resistance of bacteria isolated from Mytilus galloprovincialis : The sensitivity of various aerobic and anaerobic bacterial species isolated from Mytilus galloprovincialis to different types of antibiotics. Thus, sensitivity of 50 aerobic and 20 anaerobic species was tested to 15 antibiotics including (betalactams, aminosids, cephalo porins, phenicols, cyclins, macrolids, nitrofurans, sulfamids, rifamycins). According to results obtained, all strains tested demonstrate resistances profiles to 3 to 12 antibiotics tested. Multi resistant profiles to 12 different antibiotics were detected for the anaerobic species (Propioni acnes). For the main aerobic species isolated, Aeromonas hydrophila we described more than 6 different antibiotypes. According to these results, it seems that the multi resistant antibiotic bacteria were well spread in Mytilus galloprovincialis brought from natural Tunisian lagoon ecosystems (Lagoon of Bizerta).. Key words: Mytilus galloprovincialis, resistance profile, Bizerta Lagoon. antibiotiques dans l’environnement aquatique et côtier (Aviles et al., 1988). Les bivalves filtreurs peuvent être indirectement infestés par ces germes multi résistants notamment du groupe des Entérobactéries qui constituent la part anthropique prépondérante des rejets pour les espèces (Enterobacter, Aeromonas, Vibrio, Salmonella). L’utilisation accrue des antibiotiques en aquaculture côtière ainsi que les rejets en mer d’eaux INTRODUCTION L'utilisation fréquente des produits antibiotiques en aquaculture ainsi que le rejet en eau de mer des populations bactériennes diverses sont considérées comme facteurs principaux de l’augmentation de la fréquence de micro-organismes résistants aux 75 Bull. Inst. Natn. Scien. Tech. Mer de Salammbô, Vol. 33, 2006 usées épurées n’est pas sans incidence sur l’arrivée en ces zones de différentes populations de bactéries multi résistantes (El Bour et al, 2004). En dépit d’une anthropisation accrue sur ses berges, la lagune de Bizerte héberge la totalité des stations mytilicoles tunisiennes (Dellali et al, 2000). En vue d’évaluer la fréquence de multi résistance chez les populations bactériennes associées à M.galloprovincialis de la lagune de Bizerte, nous avons entrepris d’identifier ces différentes espèces bactériennes aérobies et anaérobies et de déterminer leurs profils de résistance vis-à-vis des différentes familles d’antibiotiques Dans le cas de cette étude, nous décrivons les différents profils de résistance aux antibiotiques des bactéries isolées de la moule méditerranéenne Mytilus galloprovincialis prélevée dans un écosystème tunisien côtier : la lagune de Bizerte. METHODES MATERIEL Identification des différentes espèces bactériennes : Les différentes espèces de bactéries aérobies et anaérobies mésophylles (poussant à des température entre 24 et 32C°) a été réalisé au moyen de tests morphologiques (types de colonies, coloration de Gram) ainsi que les tests biochimiques : détermination d’enzymes respiratoires (catalase et oxydase) ainsi ainsi que l’utilisation des systèmes : Api 20E, 20NE, Rapid 32A (Hariharan et al., 1995).. Préparation des échantillons et isolement bactérien : Les différents prélèvements de moules sont maintenus au frais jusqu'à leur arrivée au laboratoire dans 2 h à 4h qui suivent l’échantillonnage. Au laboratoire, les analyses sont effectuées le jour même. Ainsi, les échantillons sont rincés, essuyés avec de l’alcool et stérilisés à la flamme au préalable d’être ouverts. La masse molle (un prélèvement de 5 individus) est broyée et les différents types de populations bactériennes sont isolées par technique de cultures sélectives et d’épuisement utilisant des milieux standards sélectifs: MaConkey, Tryptocase Caseine Soja, Thiosulfate Bile Sucrose, Gélose au Sang et Gélose Chocolat (Hariharan et al., 1995). Prélèvement des moules : Mytilus galloprovincialis provient de 3 stations mytilicoles de la lagune de Bizerte: Echaara (CH), Ferme Mytilicole de Bizerte (FMB), Menzel Jemil (MJ). Les prélèvements mensuels (5 individus/site) ont été effectués pendant 6 mois (de Mars à Septembre) de l’année 2001 (Figure 1). Figure1 : présentation de la lagune de Bizerte avec les sites de prélèvements : CH, MJ et FMB. 76 Bull. Inst. Natn. Scien. Tech. Mer de Salammbô, Vol. 33, 2006 Détermination du profil de résistance aux antibiotiques Effectuée selon la technique de l’antibiogramme (Chabbert, 1982). Pour chaque type de bactérie isolée, une préculture (24 h en bouillon TSB) est diluée au ½ en eau physiologique. La préparation est utilisée pour inonder des boites gélosées Mueller Hinton. Le surplus est aspiré et Les boites ainsi préparées sont séchées pendant 20mn avant de déposer les disques d’antibiotiques à la surface gélosée. Après incubation de 18 à 24h à 37°C, la lecture est faite en mesurant les diamètres d’inhibition en mm. Pour chaque antibiotique, le diamètre lu est comparé aux diamètres critiques D (diamètre maximal) et d (diamètre minimale) pour déterminer si la bactérie est sensible ou résistante à l’antibiotique. Les antibiotiques utilisés appartiennent à 9 familles différentes et sont les plus utilisés dans l’étude de la résistance des bactéries. Pénicillines : Pénicilline (P)(6g), Amoxicilline (AMX)(25g), Oxacilline (OX)(5g), Céphalosporines : Céfoxitines (FOX)(30g), Céftriaxone (CRO)(30g), Aminosides : Streptomycine (S)(10UI), Tobramycine (NN)(10g), Néomycine (N)(30UI), Phénicols : Chloramphénicol (C)(30g), Tétracyclines : Tétracycline (TE)(30UI), Nitrofuranes : Furanes (FM)(300g), Sulfamides : Triméthoprime-sulfamide (SXT)(1,25 +23,75g), Rifamycines : Rifampicine (RA)(3030g), acide oxolinique (AR)(10g), Macrolides: Oléandomycine (OL)(15UI). 2- Caractérisation antibiotypique des espèces bactériennes identifiées chez Mytilus galloprovincialis Les résultats obtenus concernant les différentes fréquences de résistance antibactérienne ainsi que les différents antibiotypes pour les différentes populations aérobies et anaérobies sont représentés dans la Figure N°2 et le Tableau N°IV. Les résultats obtenus montrent que les antibiotypes des bactéries aérobies identifiées comptent des multi résistance allant de 3 à 11 antibiotiques différents. Parmi ces profils, c’est l’antibiotype à 8 résistances qui est le plus commun. Ce sont des résistances aux bétalactamines, aminosides et macrolides en plus des cyclines. Pour les bactéries anaérobies, les antibiotypes révélés comptent des multi résistances allant de 6 à 12 antibiotiques différents. Ce sont les profils à 7 et 9 antibiotiques qui sont les plus communs. Pour toutes les espèces identifiées, il semblerait que ce sont les sulfamides, les furanes et le phénicols qui demeurent les plus efficaces. DISCUSSION La moule Mytilus galloprovincialis est un bivalve à large répartition méditerranéenne. En Tunisie, la production mytilicole est assez importante surtout au niveau de la lagune de Bizerte et représente 94% de l’ensemble des bivalves. Les travaux intéressant l’étude des populations bactériennes associées aux moules sont restreintes à l’étude de Chakroun (1964) et en Tunisie Dellali et al. (2000-2001a-b) et Dellali (2001). Les résultats obtenus par Dellali (2001) sur les bactéries associées à Mytilus galloprovincialis au niveau de la lagune de Bizerte décrivent une prédominance d’Aeromonas hydrophila (82.24%) comme le démontre notre étude suivi d’autres espèces : Vibrio parahaemolyticus (10.68%), Aeromonas sobria (4.5%) et Vibrio vulnificus (2.2%).Beaucoup de travaux cependant, ont souligné la dominance des Vibrionacaes (Toti et al.,1996), (Bouchriti et El Marrakchi, 1995), (Harriharan et al., 1995), (Kiiyukia et al., 1989), (El Sahn et al., 1982), (Alonzo et al., 1981). Les études antérieures des populations bactériennes anaérobies sont restreintes à celles de Dellali et al. (2001), qui a détecté la présence de Clostridium perfringens chez les moules de la lagune de Bizerte, et Harriharan et al. (1995) qui a décrit chez Mytilus edulis les espèces suivantes : Clostridium difficile (15%), Clostridium sporogenes (13%), Bacteroides buccae et Fusobacterium………………………………. RESULTATS 1- Les différentes espèces bactériennes présentes chez Mytilus galloprovincialis Par méthodes d’épuisement sélective, nous avons pu identifier 50 souches de bactéries aérobies qui appartiennent à 20 espèces différentes. Les espèces les plus fréquentes sont : Aeromonas hydrophila (31%), Enterobacter sakazakii (15%) et Pseudomonas cepacia (13%) (Tableau N°I et II). L’ensemble de ces espèces appartient essentiellement au groupe des Entérobactéries (48 souches). Les espèces non entérobactéries sont restreintes à deux souches : 1 souche de V.alginolyticus et une souche de V. paraheamolyticus. Par ailleurs, 20 souches anaérobies ont été isolées. Ces bactéries appartiennent à 6 espèces différentes dont l’espèce dominante est Proprionibacterium acnes (65%) et Clostridium perfringens (15%). Les espèces : Clostridium bifermentans, Actinomyces meyeri, Capnocytophaga spp, et fusobacterium necrophrum sont représentées chacune par une seule souche. (Tableau N°III). 77 Bull. Inst. Natn. Scien. Tech. Mer de Salammbô, Vol. 33, 2006 Tableau I: Caractéristiques biochimiques des espèces aérobies identifiées par système Api 20E Souches OX CAT ONPG Aeromonas hydrophila + Enterobacter sakazakii + Pseudomonas cepacia + Aeromonas salmonicida + Bordetella alcalignes spp + Enterobacter cloacae + Pseudomonas aeruginosa + Pseudomonas fluorescens + Aeromonas sobria + Enterobacter amnigenus + Klebsiella ornithinolytica + Klebsiella oxytoca + Listonella damsela + Klebsiella pneumoniae + Pasteurella spp + Salmonella arizonae + Serratia liquefaciens + Sphingomonas multivorum + Tot. Souches + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + v + + + + + + + + + + ADH LDC ODC CIT H2S URE TDA IND VP GEL GLU MAN INO SOR RHA SAC MEL AMY ARA F % + + + + + + + + + + + - v + + + + + - + v + v + + + + + + - v + + + + + + + + + - v + + + + - + v + + + + - + + + + + + + v + + + + + + + + v v v + + + - v + v + + + + v + + + + + + + + + + + v + v v + + + + + - + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + - + + + + + - + + + + + + + + + - + + v + + + + + + - v + + + + + + + + - v + + + + + + + + + + - + + + + + v v + + + + + + v + + + + + + + - Légende : (+) : réponse positive au test; (-) réponse négative au test ; (v) : réponse variable au test. OX: oxydase; CAT: catalase; ONPG: ortho-nitro-B-D-galactopyranoside; ADH: arginine; LDC:lysine; ODC: ornithine; CIT: citrate de sodium; H2S:thiosulfate de sodium; URE: urée; TDA: tryptophane; IND: tryptophane; VP: créatine pyruvate de sodium; GEL: gélatine de Kohn, GLU: glucose; MAN: mannitol; INO: inositol; SOR: sorbitol; RHA: rhamnose; SAC: saccharose; MEL: melibiose; AMY: amygdaline; ARA: arabinose. Tableau II: Caractéristiques biochimiques des espèces aérobies identifiées par systèmes Api 20NE Souches Vibrio alginolyticus Vibrio parahaemolyticus OX CAT NO3 TRP GLU ADH URE ESC GEL PNG GLU ARA MNE MAN NAG MAL GNT CAP ADHMLT CIT PAC + + + + + + + + + + + + + + + + + + + - + + + + + + + + + + - - + + Légende: (+) : réponse positive au test; (-) réponse négative au test ; (v) : réponse variable au test. OX: oxydase; CAT: catalase; NO3: nitrate de potassium; TRP: tryptophane; GLU: glucose; ADH: arginine; URE: urée; ESC: esculine; GEL: gélatine; PNPG; p-nitrophényl-B-D-galactopyranoside; GLU: glucose; ARA: arabinose; MNE: mannose; NAG: N-acetyl-glucosamine; MAL: maltose; GNT: gluconate; CAP: caprate; ADI: adipate; MLT: malate; CIT: citrate; PAC: phényl-acétate. 78 + + - 31 15 13 4 4 4 4 4 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 48 Bull. Inst. Natn. Scien. Tech. Mer de Salammbô, Vol. 33, 2006 Tableau III : Caractéristiques biochimiques des bactéries anaérobies identifiées par système Api ID 32A Souches Proprioni acnes C. perfringens C.bifermentans Actinomyces meyeri F. necrophorum Capnocytophaga spp suite des tests : Proprioni acnes C. perfringens C.bifermentans Actinomyces meyeri F. necrophorum Capnocytophaga spp Total des souches OX CAT URE ADH + + + + + + + + + + + + + + + + + αGal βGal + + + + + βGP + α Glu βGlu + + + + + + + αAra βGur βNAG MNE RAF GDC α Fuc NIT + - IND PAL ArgA ProA LGA PheA LeuA PyrA TyrA AlaA + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + - GlyA + + + + + + + + + + v + + + + - + - + + + + HisA GGA SerA F % - + + + 65 15 5 5 5 5 20 Légende: (+) : réponse positive au test; (-) réponse négative au test ; (v) : réponse variable au test. OX: oxydase; CAT: catalase; URE: urease; ADH: arginine dihydrolase; αGAL: alpha GALactosidase; βGAL: beta GALactosidase; βGP: beta GALactosidase 6 phosphate; α GLU: alpha GLUcosidase; βGLU: beta glucosidase; α ARA: alpha arabinosidase; βGUR: beta GlucURonidase; βNAG: beta-N-Acetyl-Glucosaminidase; MNE: MaNnosE; RAF: RAFinose; GDC: ac. Glutamique DeCarboxylase; α FUC: alpha FUCosidase; NIT: nitrate; IND: indole; PAL: Phosphate Alcaline; ArgA: arginine Arylamidase; ProA: Proline Arylamidase; LGA: Leucyl Glycine Arylamidase; PheA: Phenylalanine arylamydase; LeuA: Leucine Arylamidase; PyrA: Ac.Pyroglutamique Arylamidase; TyrA: Tyrosine Arylamidase; AlaA: Alanine ; Arylamidase; GlyA: Glycine Arylamidase; HisA: Histidine Arylamidase; GGA: Glutamyl ac. Glutamique Arylamidase; SerA: Serine Arylamidase. 79 Bull. Inst. Natn. Scien. Tech. Mer de Salammbô, Vol. 33, 2006 Tableau N°IV : Les profils antibiotypiques associés aux populations aérobies et anaérobies Résistance aux antibiotiques Profils des bactéries aérobies Proprionibacterium acnes : P-Amx-Ox-Fox-Cro-S-Nn-N-C-Te-Ar-Ol P- Amx-Ox-Fox-Cro-S- Nn- N-C-Fm-Ar -Ol (4) 12 ATB 11ATB 10ATB 9ATB Profils des bactéries anaérobies Aeromonas hydrophila : P-Amx-Ox- Fox-Cro-S-Nn-N-Te-RaOl Pseudomonas cepacia : P-Amx-Ox-Fox-Cro-S-N-C-Te-Fm-Ol. Pseudomonas fluorescens : P-Amx-Ox- Fox- S-Nn-N-Te-Fm- RaOl Aeromonas hydrophila et Aeromonas sobria : P-Amx-Ox-Fox-S- Nn- N-Te-- Fm- ArOl Bordetella alcalignes : P- Amx- Ox-Fox- Nn-N-C-Te- Fm- Ar -Ol Aeromonas salmonicida : P- Amx-Ox- Fox-Cro-Nn-N- Te-Ra -Ol Aeromonas hydrophila et Pseudomonas fluorescens : P-AmxOx- Fox- S-Nn-N- Te-Fm-Ol Aeromonas hydrophila (2) et Aeromonas sobria : P-Amx-Ox-Fox-S-Nn-N- Te- Ra-Ol Klebsiella oxytoca : P- Amx- Ox- Fox- S-N- C- Te- Fm-Ol Aeromonas sobria : P-Amx-Ox-S-Nn-N-Te-Fm- Ra-Ol Listonella damsela : Amx-Ox-Fox-S-Nn-N-C-Fm-Ar-Ol Aeromonas hydrophila P-Amx-Ox-Fox-S-Nn-N-Fm-Ol (2) Vibrio alginolyticus: P-Amx-Ox- Fox- S-Nn-Te-Ar-Ol Aeromonas sobria: P-Amx-Ox-Fox -S-Nn-Fm- Ar-Ol P-Amx-Ox-Fox-Nn- N- C-Te-Ol Bordetella alcalignes : Amx-Ox- Fox-Cro- S- Nn-N- Te-Ol Bordetella alcalignes : P-Amx-Fox-Cro- N-Ra- Ol 80 Proprionibacterium acnes : P-Amx-Ox-Fox-Cro- S-Nn- N-Te- Fm-Ol Capnocytophaga spp.: P-Amx-Ox-Fox-Cro- S- N-C-Fm-Ol Proprionibacterium acnes : P-Amx- Ox-Fox- S-Nn-N-Te-Ol P-Amx- Ox-Fox-S-Nn-Te- Ra-Ol P-Amx-Ox- Fox- S-N- C-Te-Ol P-Amx-Ox-Fox-Nn- N-C- Fm-Ol (2) Clostridium bifermentans: P-Amx-Ox-Fox-S-Nn-Fm-Sxt-Ol Bull. Inst. Natn. Scien. Tech. Mer de Salammbô, Vol. 33, 2006 8ATB 7ATB 6ATB 5ATB 4ATB 3ATB Klebsiella ornithinolytica : P-Amx- Ox-Fox-S-Nn-C-Ol Enterobacter sakazakii P-Amx-Ox-Fox-S-Nn- N-Ol Ox-Fox-S-Nn-Te -Fm-Ar -Ol Pseudomonas aeruginosa: P-Amx-Ox-Fox- S-Nn-Te-Ol Enterobacter cloacae: P-Amx-Ox-Fox- S-Te-Ra-Ol Pseudomonas cepacia: P-Amx-Ox-Fox-Te-Fm -Ra-Ol Aeromonas salmonicida: Amx-Ox-Fox-Nn-N- C- Ar -Ol Proprionibacterium acnes: P-Amx-Ox-Fox-S-Nn- N-Ol Clostridium perfringens: Amx-Ox- Fox-S-Nn-Te - Ar-Ol Enterobacter sakazakii: P-Amx-Ox-Fox-S-N-Ol (2) Aeromonas sobria : P-Amx-Ox-Fox-Nn-Te-Ol Aeromonas hydrophila P-Amx-Ox-S-Nn-N-Ol P-Ox-S-Te-Fm-Ra-Ol Clostridium perfringens : P-Amx-Ox- Fox- S-Nn-Ol Amx-Ox-Cro-S-Nn-Ar -Ol Enterobacter cloacae: P-Ox-Fox- S-Te-Ra-Ol Pasteurella spp. : Amx-Ox-Fox-Nn- N-Fm -Ol Klebsiella ornithinolytica et Pseudomonas cepacia: Amx-Ox- Fox-Nn- C-Te-Ol Sphingomonas multivarum: Amx- Ox-Nn- N-Te -Fm -Ol Proprionibacterium acnes: P-Amx-Ox-S-Nn-Fm-Ol P-Ox-Fox- S-Te-Ra-Ol Vibrio parahaemolyticus : Amx-Ox-Fox-Cro-Te-Ol Pseudomonas aeruginosa et Serratia liquefaciens : Amx-Ox-Fox-Nn-N-Te Enterobacter sakazakii: P-Amx- Ox-Nn-Ol Aeromonas hydrophila Ox-Fox-N- Ar -Ol Klebsiella pneumonia: Amx- Ox-N-Ol Salmonella arizonae et Enterobater amnigenus : Ox-Te- Ol 81 Actinomyces meyeri: Amx-Ox-N-C-Te- Ar –Ol Fusobacterium necrophorum: Amx-Ox-Fox-Cro-Te-Ol Bull. Inst. Natn. Scien. Tech. Mer de Salammbô, Vol. 33, 2006 120% Frequence 100% 80% 60% 40% 20% 0% 12 11ATB 10ATB 9ATB 8ATB 7ATB 6ATB 5ATB 4ATB 3ATB ATB Bactéries aérobies Antibiotypes Bactéries anaérobies Figure N°2: Fréquence de résistance des populations bactériennes aérobies et anaérobies aux antibiotiques mortiferum (8.7%), Clostridium bifermentens (6.5%) ainsi que d’autres espèces représentant les 5 % restant. Grâce à son pouvoir de filtration, Mytilus galloprovincialis, peut concentrer différents types de polluants et de microorganismes ce qui peut lui conférer l’acquisition de résistances. L’étude antibiotypique menée pour étudier la sensibilité des germes aérobies et anaérobies isolées chez la moule Mytilus galloprovincialis a été effectuée vis à vis de 15 antibiotiques appartenant à 9 familles différentes. Dans la présente étude nous avons constaté que tous les germes isolés sont résistants à un ou plusieurs antibiotiques. L’antibiotype le plus dominant est à 7 antibiotiques et se trouve à une fréquence de 22%. Ces profils présentent une résistance aux pénicillines, aux aminosides et aux oléandomycines. Plusieurs travaux antérieurs faits en Tunisie ont noté qu’Aeromonas hydrophila : espèce ubiquiste, est parmi les genres non entérobactéries les plus fréquents aussi bien en eaux marines qu’en eaux douces. Aeromonas hydrophila espèce aérobie prédominante dans notre étude montre pour la plupart des isolats 6 antibiotypes différents. Ce germe a une résistance aux aminosides, aux céphalosporines, néomycines, oléandomycines. 90% des souches sont résistantes aux céfoxitine. Nos résultats sont confirmés par les travaux de Lakhal (2003) et Dellali (2001) qui montrent que les souches d’Aeromonas isolées des : eaux, sédiments et bivalves, sont résistantes aux: aminosides, aux céphalosporines de deuxième génération et aux cyclines, 80% des souches sont résistantes au céfoxitine. Pour ces germes Aeromonas, la résistance aux béta-lactamines est caractérisée par une grande hétérogénéité inter et intra spécifique (Freney et al., 2000), (Burgos et al., 1990) et ( Koehler et al., 1993). Pseudomonas aeruginosa, une des bactéries opportunistes des plus résistantes aux antibiotiques a été décrite dans notre étude. Ce germe présente deux profils de résistances à 8 et 6 antibiotiques et présente une résistance aux : aminosides et tétracyclines. D’après Berche et Al. (1996), Cette espèce est naturellement résistante aux antibiotiques suivants : aminosides, colistine, pénicillines du groupe A (ampicilline et dérivés), céphalosporines de 1ère et 2ème génération, chloramphénicol et tétracycline. Pour les espèces Vibrios, Vibrio alginolyticus présente une résistance à 8 antibiotiques différents alors que Vibrio parahaemolyticus est résistant à 7 antibiotiques. Selon Freney et Al. (2000), ce germe est très résistant à l’ampicilline, carbénicilline et trimethoprime. D’après l’étude de Berche et al. (1996), les résultats obtenus sur le genre Enterobacter ont montrés que ce sont les entérobactéries les plus résistantes aux antibiotiques. Dans notre étude, ce genre se trouve résistant aux : pénicillines, céphalosporines et aux oléandomycines. Pour la résistance des espèces anaérobies aux antibiotiques, Proprionibacterium acnes qui est le germe prédominant, présente 5 profils antibiotypiques et une haute fréquence de résistance à 9 antibiotiques. Nos résultats concordent avec celles observés par Dublanchet (1993), cette espèce a une résistance naturelle aux: aminosides, les béta-lactamines qui sont les antibiotiques les plus actifs ainsi que les tétracyclines, macrolides, chloramphénicol, oléandomycines qui sont considérés comme des antibiotiques de relais. Dans notre étude, Fusobacterium necrophorum montre une résistance pour 6 antibiotiques et ne présente qu’un seul profil de résistance. Ces bactéries Gram négatifs, anaérobies strictes sont sensibles aux 82 Bull. Inst. Natn. Scien. Tech. Mer de Salammbô, Vol. 33, 2006 clindamycines, chloramphénicols et pénicillines(Berche et al., 1996). from the marine environment. Rapp. Comm. Int Médit. 31 : 2. 173p. Berche P., Gaillaird J.L. et Simonet M., (1996) : Bactériologie : Les bactéries des infections humaines. Medecine Sciences. Edit : Flammarion. Bouchriti B. et Marrakchi A.EL., (1995) : Occurrence of marine Vibrios in Moroccan coastal waters and shellfish. Microbiology Aliments Nutrition, Vol.13, 381-387. Burgos A, Qindos G., Martinez R, Rojo P. et Cisterna R. (1990) : In vitro susceptibility of Aeromonas caviae, A. hydrophila, A. sobria to fifteen antibacterial agents. Eur. J .Clin. Microbiol. Infect. Dist. 9 : 413-418. Chabbert, Y.A., (1982) : L’antibiogramme .In: Bactériologie médicale L. Le Minor, M. Véron, (ed) : Flammarion. Médecine Science. Paris : 205-212. 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Néanmoins, rares sont les études tunisiennes qui se sont intéressé d’évaluer l’effet des facteurs d’eutrophisation. La lagune de Bizerte est considérée comme un grand réceptacle où se déversent les rejets urbains, industriels et agricoles. Ces bivalves filtreurs concentrent les polluants bactériens et même chimiques donnant une indication sur les risques potentiels de contamination. L’acquisition de la résistance aux antibiotiques chez les bactéries associées aux moules est liée aux eaux usées, des rivières polluées et des égouts déversées dans le milieu ou elles vivent. Des résultats obtenus, nous avons constaté : La prédominance des germes aérobies (71.5%) par rapport aux germes anaérobies dans tous les prélèvements. Les populations des germes aérobies ont ségrégé en 20 espèces différentes. L’espèce aérobie dominante est Aeromonas hydrophila (31%). Les populations anaérobies associées aux populations aérobies ont été identifié à 6 espèces différentes. L’espèce prédominante est Proprionibacterium acnes (65%). L’étude des profils antibiotypiques nous a permis de constater que toutes les souches isolées sont résistantes à deux ou plusieurs antibiotiques. L’antibiotype le plus fréquent chez toutes les espèces identifiées est à 7 résistances différentes avec une fréquence de 22%. Ce profil présente des résistances aux : amoxicilline, oxacilline, oléandomycine, streptomycine, tobramycine, tétracycline et néomycine. Par ailleurs, ces résultats dénotent la présence de plusieurs profils antibiotypiques différents chez une même espèce identifiée (6 profils antibiotypiques différents chez Aeromonas hydrophila,) et (5 profils antibiotypiques différents chez Proprionibacterium acnes). BIBLIOGRAPHIE Alonzo V., Bruni V., Lo curto R.B., Maugeri T.L., Russo D.I. et Scoglio M.E., (1981) : Occurrence of helophilic vibrios in mussels cultivated in a Brackish lake. Rev. Int. Océanogr. Med. N:6364. Pp 3-9. 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