PRODUCTION ANTICORPS MONOCLONAUX
Step 1: - Immunisation des souris
Hybridomes
ANTIGEN ( cellule
membarne/ micro-
organismes ) +
ADJUVANT
Ac dans sérum
Prélèvement de la rate
(source de cellules)
PRODUCTION ANTICORPS MONOCLONAUX
Step 2: - Dépistage Anticorps produit
HYBRIDOMES
Après qq
semaines
Détermination du titre de l’ac
(Technique: - ELISA / cytométrie)
Titre faible
BOOST
(Antigene)
Titre élevé
BOOST
(Antigène)
2 semaines
PRODUCTION ANTICORPS MONOCLONAUX
Step 3: - Preparation cellules Myelome
HYBRIDOMES
cellules immortelles
+8 - Azaguanine
Cellules de myélome
Croissance rapide
HGPRT-
Cellules de myélome
PRODUCTION ANTICORPS MONOCLONAUX
Step 4: - Fusion Myélome avec cellules de rate et Selection des
hybridomes
HYBRIDOMES
FUSION
PEG
Cellules myélome
rate
hybridomes
Facteurs
croissance
HAT Medium
1. Culture des
cellules en plaques
2. Détection des
hybridomes
viables
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