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Caractérisation d’un mutant
Non pathogène de Botrytis cinerea
UMR 217, Laboratoire de Pathologie Végétale
INA / PG - INRA - Paris VI
Projet B. cinerea
Martine Boccara (Prof Paris VI)
Marie-Christine Soulié (MC Paris VI)
Caroline Kunz (MC Paris VI)
Collaborations :
A. PUGIN, INRA Dijon
C. LEVIS, INRA Versailles

Obtention de mutants altérés
dans leur pouvoir pathogène
Méthode :
Mutagénèse insertionnelle aléatoire
(plasmide pAN7-1)
Résultats :
Collection de 1577 transformants
19 transformants altérés dans
leur agressivité (913 testés)
Un seul transformant
non-pathogène A336

Caractérisation du mutant A336
1. Phénotype in planta
Non pathogène
Provoque des mini-nécroses
2. Croissance in vitro
Idem Bd90 (souche sauvage) sur
différents milieux à pH 5
Réduite à pH > 6
Pas de conidie ni de sclérote

3. Analyse moléculaire et génétique
La mutation est monogénique
La mutation n’est pas étiquetée
Caractérisation du mutant A336 (suite)
4. Analyse biochimique
A336 produit peu ou pas d’acide oxalique
Co-ségrégation entre le caractère NP et
l’incapacité à acidifier le milieu
5. Analyse d ’expression de gènes
Comparaison des EST entre A336 et Bd90
Collaboration avec C. LEVIS,
INRA Versailles

Analyse moléculaire et génétique
de la mutation de A336
2. Analyse génétique de la mutation :
croisement A336 X SAS405 et
analyse de cinq asques
Ségrégation 1:1 du PP
Ségrégation 1:1 de l ’insertion de
pAN7-1
1. Southern blot :
Mise en évidence d’une seule insertion
du plasmide pAN7-1