ADN - Free

Pr. Jacques PAOLETTI
SC-L3BH-01
Enzymes recopiant les acides nucléiques
Enzymes recopiant l’ADN ou l’ARN
DNA polymérase DNA dépendante
DNA polymérase RNA dépendante
RNA polymérase DNA dépendante
RNA polymérase RNA dépendante
Ces enzymes synthétisent le nouveau brin dans le sens 5’ -> 3’
La synthèse se fait de manière complémentaire et antiparallèle.
L’enzyme fonctionne en présence de nucléosides triphosphates
(XTP) ou de désoxynucléosides (dXTP)

Pr. Jacques PAOLETTI
SC-L3BH-01
LES ADN POLYMÉRASES
- Un brin d'ADN matrice
- Une amorce oligonucléotidique
- Une synthèse du brin nouveau 5'3'
3'(OH) 5'
5' 3'

Pr. Jacques PAOLETTI
SC-L3BH-01
DNA polymérase DNA dépendante
Ces enzymes recopient l’ADN en ADN.
Elles nécessitent une amorce d’acide nucléique.
La réaction catalysée est:
(dXMP)n + dXTP (dNMP)n+1 + PPi
Amorce avec une extrémité 3’-OH libre
La nouvelle chaîne est synthétisée dans
le sens 5’ 3’
Règle de complémentarité et de polarité inverse

Pr. Jacques PAOLETTI
SC-L3BH-01
La DNA polymérase 1

Pr. Jacques PAOLETTI
SC-L3BH-01
Fragment de KLENOW
Le fragment de Klenow est préparé à partir de la DNA polymérse 1 d’E.coli.
Ce fragment ne possède plus d’activité exonucléasique 5’3’ mais garde
l’activité polymérasique et l’activité exonucléasique 3’ 5’.
Cette enzyme est utilisée au laboratoire car elle permet de contrôler si la base
qui vient d’être ajoutée obéit à la règle e complémentarité.
(fonction d’édition)