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Année 2008 Équipe pédagogique du lycée Jean MOULIN (ANGERS)
POCHET 1
Dénombrement ou numération
automatisée des cellules sanguines
Principes
par impédancemétrie
par diffraction de la lumière
par analyse en flux
Résultats de l’hémogramme

Année 2008 2
Équipe pédagogique du lycée Jean MOULIN (ANGERS)
POCHET
Principe COULTER par impédancemétrie
-
Cuve contenant une solution saline
conductrice du courant électrique
aspirée par le micro orifice d’un tube
de verre
Générateur de courant
constant I
Voltmètre mesurant la tension U aux
bornes du circuit
Électrodes placées de chaque côté du
micro orifice entre lesquelles existe
une impédance Z
Z est constant
U = Z.I = constant
+
Le dispositif de mesure
Le flux passant par le micro orifice ne contient que la solution d’électrolytes

Année 2008 3
Équipe pédagogique du lycée Jean MOULIN (ANGERS)
POCHET
Principe COULTER par impédancemétrie
Les cellules sanguines sont mauvaises conductrices de l’électricité
- +
Chaque cellule, mauvaise conductrice du courant électrique, passant par le micro
orifice fait augmenter l’impédance entre les deux électrodes de mesure
L’aspiration entraîne les cellules à
passer les unes après les autres au
travers du micro orifice
Z 
donc U = Z.I 

Année 2008 4
Équipe pédagogique du lycée Jean MOULIN (ANGERS)
POCHET
Principe COULTER par impédancemétrie
Les cellules sont comptées et mesurées après amplification du signal.
Les impulsions peuvent être visualisés sur un oscilloscope :
U en fonction du temps
Il y a proportionnalité entre l’impulsion de tension et la taille de la cellule
Temps
U
Possibilité de choisir les populations
selon leur taille avec des seuils
au-delà
ou en deçà
desquels les cellules ne sont pas prises
en compte

Année 2008 5
Équipe pédagogique du lycée Jean MOULIN (ANGERS)
POCHET
Principe COULTER par impédancemétrie
Possibilité de classer les populations en fonction leur taille :
Histogrammes de distribution (%(relatif) en fonction du volume)
%Plaquettes Globules rouges
Double seuil Phénomène de coïncidence*
fL
* Passage du micro orifice par deux cellules à la fois, donnant une petite sous population de volume
double, n’existant que sur de grandes populations et corrigé de façon statistique au niveau de la
numération des globules rouges (mais visible sur l’histogramme de distribution)
Discrimination entre hématies et thrombocytes, dénombrés dans la même dilution,
basée sur leur volume respectif