techniques de culture cellulaire

TECHNIQUES DE CULTURE
CELLULAIRE

Année 2006-2007 Équipe pédagogique du Lycée Jean MOULIN (ANGERS) POCHET 2
Techniques de culture cellulaire
Les cellules
Les milieux de culture
Les contenants
L’environnement
L’entretien

Année 2006-2007 Équipe pédagogique du Lycée Jean MOULIN (ANGERS) POCHET 3
Les cellules
Cellules normales
Ànombre de repiquages limité
Obtention
Àpartir d’un prélèvement tissulaire : avec ou sans dissociation
Dissociation des liaisons fortes entre cellules
Mécanique : broyage, vortexage …
Enzymatique essentiellement
Mise en culture : culture primaire
Repiquage ou «passage »: culture secondaire

Année 2006-2007 Équipe pédagogique du Lycée Jean MOULIN (ANGERS) POCHET 4
Les cellules
Cellules transformées (ou éventuellement embryonnaires)
Ànombre de passages illimité donnant une lignée continue
les plus utilisées en culture cellulaire et virologie médicale :
Cellules Vero, cellules rénales de singe vert africain ( Cercopithecus aethiops )
Aspect de fibroblaste : fusiforme
Adhérant rapidement au support de verre ou plastique grâce aux
ions Ca2+ ou Mg2+.
Autres cellules
Cellules tumorales :
HeLa (tumeur utérine) ;
KB (carcinome oral humain)
Cellules embryonnaires :
MRC-5 (poumon de foetus humain) ;
3T3 (embryon de souris)

Année 2006-2007 Équipe pédagogique du Lycée Jean MOULIN (ANGERS) POCHET 5
Les cellules
Cellules non transformées
Mort programmée = apoptose
Log n cellules
Temps
Culture
primaire Culture secondaire Cellules transformées
Lignée continue
Premier passage Deuxième passage