PRODUITS SANGUINS LABILES

LES GROUPES SANGUINS
1
Immuno-Hématologie
Étude
des systèmes de groupes sanguins
et
des implications immunologiques qui
en résultent
2
GROUPE SANGUIN
Ensemble d’allo-antigènes :
 génétiquement déterminés
 présents à la surface des membranes des
cellules du sang
 pouvant
induire, lors de la perfusion
thérapeutique d’un composant cellulaire,
une allo-immunisation
 23 systèmes de groupes sanguins
3
Antigène/Immunogénicité
Antigène
Entité biologique capable d’être reconnue et identifiée
comme étrangère par le système immunitaire d’un
organisme, de manière spécifique, en vue de son
élimination ou de sa tolérance

Immunogénicité
Capacité d’un antigène à induire la fabrication d’anticorps
dirigés contre lui

 Plus un antigène est immunogène, plus il induit une
réponse anticorps forte.
4
Antigène

Xéno - Ag = Ag d’espèces différentes

Allo - Ag = Ag d’individus de la même
espèce

Auto – Ag = Ag de l’individu lui-même
5
Anticorps (ou immunoglobulines)




Molécules possédant une fonction immunologique
Produites par les lymphocytes B
Glycoprotéines présentes dans le sérum
Synthétisées en réponse à l'introduction d'antigènes dont l'organisme
est dépourvu et capable de se lier spécifiquement avec lui
5 types :
 immunoglobulines G (IgG) = 70%
 immunoglobulines A (IgA) = 15% (salives, muqueuses - génito-urinaires,
trachéobronchiques -, lait)
 immunoglobulines M (IgM) = 10%


immunoglobulines D (IgD) = 1% fonction ?
immunoglobulines E (IgE) = traces, immunité antiparasitaire et
hypersensibilité (asthme, rhinite allergique)
6
Anticorps - classification

Les anticorps sont dits :
 naturels : existant en l’absence de toute stimulation
antigénique étrangère, apparaissent de façon spontanée
(sans notion de grossesse ou de transfusion préalable)



immuns : induit par une stimulation d’un antigène étranger
Immunisations secondaires à une infection, vaccination,
transfusion (anticorps du système anti-Rhésus)
Allo anticorps produit en réponse à la stimulation d’un antigène
provenant
d’un sujet étranger de même espèce (ex.
transfusions sang)
Auto anticorps dérèglement du système immunitaire. Anticorps
fabriqués par un individu contre ses propres antigènes (LED,
anémies hémolytiques auto immunes)
7
Anticorps - classification

Les anticorps sont dits :
 réguliers lorsqu'ils sont toujours présents quand l'antigène
correspondant est absent (exemple : un sujet de groupe A a
toujours des anti-B dans son plasma)
 irréguliers dans le cas contraire

4 combinaisons théoriques
 "réguliers immuns" : jamais rencontré
 "irréguliers naturels" : exceptionnel

En pratique :
 les anticorps naturels sont réguliers, par exemple les anti-A et
anti-B de classe Ig M. Ils doivent toujours être pris en compte
sous peine d'engendrer un accident transfusionnel gravissime

les anticorps immuns sont irréguliers, par exemple l'anti-D du
système Rhésus.
8
Evolution de la réponse immunitaire
humorale dans le temps
9
Problèmes transfusionnels

Principe général : ne pas laisser se produire réaction antigène - anticorps.
En transfusion, deux situations :

En pratique,



l'introduction d'antigènes dans un organisme qui possède l'anticorps
correspondant crée un conflit ( transfusion de concentrés érythrocytaires ou
plaquettaires).
La transfusion de plasma incompatible n'entraîne pas les mêmes risques, à
condition de ne pas dépasser 3 UA de Plasma
10
Réaction Ag / Ac



Réaction Ag / Ac  agglutinations ou
hémolyse   Incident  Choc
Ac agglutinants ou hémolysants
Techniques d’agglutinations artificielles vont
permettre:


déterminer certains groupes sanguins et
phénotypes sanguin
rechercher la présence de certaines agglutinines
irrégulières
11
Conditions de l'immunisation

1.Introduction de globules rouges étrangers
12
Conditions de l'immunisation

2.Immunogénicité des antigènes

Certains antigènes sont plus fortement
immunogènes, d'autres moins
D > [C-c-E-e-K] > les autres

Ce n'est pas parce qu'un antigène est
faiblement immunogène qu'il n'est pas
dangereux
13
Conditions de l'immunisation
3.Terrain
 Certains sujets sont bons répondeurs, d'autres moins

Les femmes s'immunisent 2 fois plus souvent que
les hommes

En pathologie :


les cirrhoses hépatiques favorisent les immunisations
les déficits immunitaires les diminuent
14
Groupe sanguin ABO
Le groupe sanguin ABO est défini par la présence ou
l’absence
d’allo – antigènes génétiquement déterminés
à la surface des cellules dont les GR
ET
 d’anticorps régulièrement présents dans le
sérum, correspondant à l'antigène ou aux
antigènes absent(s) à la surface des GR


 Le plus important des systèmes à
respecter en transfusion sanguine de par
l’existence d’ anticorps naturels
15
GROUPE SANGUIN - ABO
ANTIGENE : Allo-Ag
o
molécule commune (antigène H) présente sur tous les GR quel que
soit le groupe A,B,O,
o
porté par la membrane du GR
o
antigène érythrocytaire ou agglutinogène
o
génétiquement induit
o
Confère une identité propre à l’hématie qui le porte
o
détermine des catégories différentes de sang = groupes sanguins
Propriétés:


Immunogénité
Réactivité antigénique: doit réagir avec les éléments du système
immunitaire qu’il a activé
découvert en 1901 par Karl Landsteiner
16
SYSTEME ABO – antigènes
antigène A
(A1 et A2)
antigène B
2
agglutinogènes
Antigène A
et
Antigène B
antigènes A et B
Aucun
antigène
L’antigène H commun à tous les Globules rouges (si absence d’Ag H alors le
groupe est dit BOMBAY – rare +++)
17
SYSTEME ABO – antigènes
gène localisé sur le chromosome 9, 2 loci
PHENOTYPES
GENOTYPES
père
mère
antigènes
A1
A1
A1
A2
A1
0
A2
A2
A2
O
B
B
B
0
A1
B
A1B
A2
B
A2B
O
O
O
A1
A2
B
18
SYSTEME ABO - anticorps

Présents régulièrement dans sérum en l’absence de
l’antigène correspondant (anticorps ou agglutinines)

Se combinent de façon spécifique aux antigènes qui
leur correspondent

Anticorps :


Naturels ou immuns
Réguliers ou irréguliers
19
Les anticorps naturels réguliers






Dans le sérum, sans stimulation extérieure
apparente  Naturels
Réguliers (toujours présents)
Apparition spontanée chez le nourrisson de 3 à 6
mois (n.né agglutinines de la mère)
Réagissent avec l’antigène présent sur les GR
(théorie de Landsteiner) dans le système ABO
Agglutination à T° ambiante
De Classe Ig.M
 Dépistés par l’épreuve de SIMONIN-MICHON
20
Les anticorps naturels réguliers
L’agglutinine bêta
=
l’anticorps anti-B
2 agglutinines (AG)
correspondant
chacune
à un des deux
agglutinogènes (AC)
L’agglutinine alpha
=
l’anticorps anti-A
21
Les anticorps naturels irréguliers



De classe Ig.M ou Ig.G
Fortement hémolysants
Dépistés par RAI
Ag
Ac
A2
Anti B (régulier)
Anti A1(irrégulier)
22
Les anticorps IMMUNS


De classe Ig.G
Acquis par stimulation immune,
 Allo immunisation,






(la
Hétéro immunisation,


Origine transfusionnelle accidentelle : sang A  patient O
Immunisation maternelle aux Ag. A ou B d’origine fœtale
mère est de groupe O et s’immunise le plus souvent contre Ag A )
Produits médicamenteux vaccins sérums  anatoxine
diphtérie, tétanos,
Dangereux en transfusion  accident d’hémolyse (les Ac du donneur
agressent les GR du receveur)
Irréguliers
Traversent le placenta
Dépistés et identifiés par RAI
23
Anticorps anti H

Très rares sujets dits « Bombay » qui ne
possèdent pas l’antigène H commun au GR
(et donc les antigènes A et B) présentent
dans le sérum un anticorps naturel anti-H

Ne doivent être transfusés qu’avec du sang
de donneur de même phénotype (Bombay)
24
Réaction d’agglutination

Lorsque l’agglutinine (Ac.) rencontre
l’agglutinogène (Ag.) qui lui correspond
 réaction d’agglutination, détruisant les GR

Chez un même sujet, il ne peut exister à la fois
l’agglutinine et l’agglutinogène correspondant :
cela implique qu’il existe 4 groupes
25
A (42%)
B (10%)
Globule rouge
Antigène A
Globule rouge
Antigène B
Sérum
Anticorps anti-B
Sérum
Anticorps anti-A
AB (3%)
Globule
rouge
Sérum
Antigènes
A et B
Aucun Anticorps
O (45%)
Globule rouge
Aucun Antigène
Sérum
Anticorps
anti-A et anti-B
26
INCOMPATIBILITE SANGUINE

Notion importante pour transfuser

Étant données les réactions que peuvent engendrer
la rencontre de l’antigène et de l’anticorps
correspondant, il peut exister des phénomènes
d’incompatibilité entre le sang des sujets
appartenant à des groupes sanguins différents :
 le sérum des uns agglutinant les globules
rouges des autres
27
Les anticorps naturels
anti-B du receveur
s’attaquent aux GR
« B » transfusés
Si un sujet de
groupe A
reçoit du sang de
groupe B
( très grave)
Les anticorps anti-A
transmis du donneur
s’attaquent aux GR du
receveur (moins grave car
les anticorps transfusés sont
dilués dans le plasma du
receveur, donc peu d’action)
28
C’est la raison pour laquelle il faut tester la compatibilité sanguine
avant de transfuser un patient en réalisant un groupage sanguin
Deux méthodes
épreuve de BETH-VINCENT
=
Présence ou absence de l’Ag A,B,AB à la surface du GR
en présence d’un sérum test connu (anti A1 – anti B – anti AB)
épreuve de SIMONIN-MICHON
=
Présence ou absence d’Ac naturels réguliers (ou irréguliers)
en présence d’hématies-tests A1 et B.
29
Technique de groupage


2 prélèvements différents (moments différents )
2 personnes différentes



prélèvement
épreuve
2 épreuves différentes


Beth-Vincent / Simonin-Michon
Nécessité absolue de concordance entre les 2
épreuves (et avec résultats antérieurs, si connus)
30
Anti-A
Anti-B
Anti-AB
A
B
O
A
B
AB
O
Test de Beth-Vincent
Epreuve de Simonin-Michon
identification des AG érythrocytaires
identification des AC sériques
31
32
GROUPE
ETUDIE
EPREUVE DE BETH-VINCENT
(sérums- test)
EPREUVE DE SIMONIN
(globules-test)
Anti-A
Anti-B
Anti-AB
GR A
GR B
A
Agg
-
Agg
-
Agg
B
-
Agg
Agg
Agg
-
AB
Agg
Agg
Agg
-
-
O
-
-
-
Agg
Agg
33
Règles de compatibilité en
transfusion de GR
A
AB
O
B
34
Règles de compatibilité en
transfusion de plasma
A
O
AB
B
35
SYSTEME RHESUS

Ag découvert dans le sérum d’un singe : Macacus rhésus (1940)
Comprend 5 antigènes principaux D, C, E, c, e
À la surface exclusive des GR
L’antigène D dominant est le plus immunogène (antiD, antiE,
antic, antiC, antie)
Le sujet qui possède l’antigène D (RH1) est dit rhésus positif
(Rh+ / 85%)
Et celui qui ne le possède pas est dit rhésus négatif (Rh- / 15%)
Existence de « D faible » ou « Du »  Rhésus +

Nécessite 2 déterminations / 2 prélèvements






36
SYSTEME RHESUS







Les anticorps anti-Rh ne sont normalement pas présents. Ils sont
formés par un sujet Rh- lors de leur contact avec des substances
Rh+
Immuns , Irréguliers :
 Grossesse
 TS
De classe IgG
Agglutinants à 37°
Identifiés par la RAI
Passent la barrière placentaire  responsables de la Maladie
Hémolytique du Nouveau-Né
Existent dans le cadre d’une auto immunisation  Anémie
Hémolytique Auto-Immune
37
A. Transfusions compatibles
RH1 (D-)
RH1 +
(D+)
38
B. ACCIDENTS
D’INCOMPATIBILITE
a)LA TRANSFUSION DE SANG Rh+
1
2
Accident d’incompatibilité
39
b) INCOMPATIBILITE FOETO-MATERNELLE
Accident d’incompatibilité / maladie hémolytique du nouveau né
40
Prévention
La mère RH1 NEG (D-)
L’enfant RH1 POS (D+)
hématies fœtales allant dans le sang de la mère
lors de l’accouchement, de trauma
ou d’examens invasifs
Injection de
Gamma globulines Anti D à la mère
Le plus tôt possible : limite des 72h naissance enfant
La réponse immunitaire
De la mère est bloquée
Il n’y pas formation d’anticorps anti D
Chélateur (détruit) des globules
Rouges de l’enfant présents
Dans le sang de la mère
41
c) ACCIDENTS LIES AUX AUTRES
ANTIGENES DU SYTEME RHESUS

La présence d’antigènes C (RH2) et E (RH3)
se retrouvent aussi bien chez les sujets RH1
et RH-1

Les incidents d’incompatibilités avec ces
antigènes ne sont pas exceptionnels
Absence de réaction  Immunisation
 Hémolyse dans un 2ème temps
42
3. LES AUTRES SYSTEMES

Le système KELL (KEL1, KEL2, …)

Le système DUFFY (FY1, FY2, … )

Le système KIDD (JK1, JK2, … )

Le système MNSs (MNS1, MNS2, … )
43
KELL

Antigène






strictement érythrocytaire : Kell (KEL)
9 % de la population est KEL1+ (K)
très immunogène
autre antigène : Cellano (KEL2) (k)
phénotype habituel KEL1-, KEL2+
Anticorps




Anti-KEL1
Allo immunisation : grossesse, TS
Ig.G
Identifiés par RAI
44
Duffy

Antigènes



FY1 (Fy a) et FY2 (Fy b)
Strictement érythrocytaire
Anticorps :




Allo-immunisation : grossesse ,TS
Anti-FY1 (Fy a) (Ig.G), le plus immunogène
Identifiés par RAI
Irréguliers chez polytransfusé (++)
45
KIDD

Antigènes



JK1 (Jka) et JK2 (Jkb)
Strictement érythrocytaire
Anticorps



Allo immunisation : grossesse , TS
Anti-JK1 dangereux en TS
Difficile à détecter chez le polytransfusé (perfide)
Accident hémolytique ou TS inefficace inexpliquée
 présence parfois difficile à mettre en évidence
(soupçonnée)

46
Système P
Antigène : P1, P2
Anticorps




Dangereux naturels anti-P
P, P1, Pk
Système Lewis


Antigènes : LE1 (Lea), LE2 (Leb) ne faisant pas
partie de la membrane du GR mais collés de façon
réversible à sa surface
Anticorps dangereux en TS si actifs à 37° C et
hémolysants in vitro
 Pas de MHNN car le système Lewis est élaboré
seulement après la naissance
Système I et i
47
SECURITE TRANSFUSIONNELLE

2 OBJECTIFS

Prévention des
immunologiques :
accidents
transfusionnels
de
type
en évitant le conflit entre les Ag. du receveur et les
Ac. du donneur, apportés par le PSL cellulaire
 groupage / RAI
 en évitant la production d’Ac. à l’origine d’un futur
conflit, suite à l’immunisation par les Ag du donneur
 produit phénotypé


Prévention des maladies infectieuses transmissibles par la
transfusion
48
SECURITE TRANSFUSIONNELLE

ACTIONS
Connaissances des comptabilités dans le groupe ABO
 Réalisation minutieuse du groupage ABO/Rhésus et
Phénotypage érythrocytaire RH-K :






RAI
Transfusion en produits déleucocytés, légalement obligatoirement
CPU




femme enceinte
polytransfusé avant TS
Au lit du patient
Contrôle des Antigènes du PSL
Dernier verrou avant la transfusion
Information des patients légalement obligatoires
49
GROUPAGE SANGUIN







Identification parfaite : vérifier identité (CNI)
Attention orthographe identité
Attention homonyme
Ne prélever qu’un seul malade à la fois (éviter
croisement de tube)
Étiqueter les tubes au lit du patient
(Répartition d’un même prélèvement dans 2 tubes
différents  interdit)
Contrôle particulièrement vigilant chez les sujets
comateux et nouveaux-nés
50
Recherche d’Anticorps irréguliers
anti érythrocytaires - RAI






Recherche dans sérum du malade de la
présence éventuelle d’Ac. irréguliers
Sur tube EDTA (Mauve)
Durée de validité en France : trois jours / 72 h
Indispensable pour transfuser
A répéter chez le polytransfusé
Obligatoire chez la femme enceinte pour
assurer le diagnostic et le suivi de la maladie
hémolytique du nouveau-né
51
REGLES TRANSFUSIONNELLES


Transfusion d’hématies apporte des antigènes
Transfusion de plasma transfère des anticorps

Ne jamais introduire un antigène chez un receveur
qui a l’anticorps correspondant dans son plasma

TS où le donneur et le receveur ont le même groupe
ABO sont toujours compatibles
Hématies du groupe O peut être transfusées à A, B,
AB, O
 donneur universel
Les receveurs de groupe AB peuvent recevoir des
GR O, A, B, AB
 receveur universel


52
PHENOTYPAGE ERYTHROCYTAIRE
Ag sur GR
ABO
ABO
DCEce
Kk
FyaFyb
Jk
Jkl
MNS
Lea
Leb
Rh
Phénotypé
Phénotypage élargi
53
PHENOTYPAGE ERYTHROCYTAIRE

Sang phénotypé a un double objectif :

Prévenir les accidents hémolytiques
transfusionnels chez les receveurs porteurs
d’anticorps érythrocytaires (sujets immunisés)

Prévenir de l’allo-immunisation contre les
antigènes pour des sujets à RAI négative
 Femme enceinte
 TS chronique de GR
 Nécessite un suivi avec recherche RAI
54
CMV négatif




CMV = Cytomégalovirus.
85% des donneurs ont des Ac. Anti-CMV
Sans gravité pour adulte
Intérêt



Immunodéprimé
Transplanté, Receveur de moelle osseuse
(Nouveaux-nés)
55
C. LE SYSTEME HLA

H (Human) L (Leucocyte) A (Antigen)

Les diverses cellules de l’organisme possèdent
également des antigènes spécifiques (rejet lors de
greffe). Ces phénomènes de rejet sont dus à
l’existence d’un système antigénique sur une majorité
de cellules dont les cellules sanguines, d’où le nom
du système HLA

Ce système particulièrement complexe s’exprime à la
surface des GB et de presque tous les tissus de
l’organisme
56

Ce système est important pour le sujet qui va recevoir
des transfusions ou subir un traitement avec des
produits sanguins contenant des GB

Son organisme se défendra contre les antigènes
étrangers HLA en pouvant produire des anticorps.
Il peut s’immuniser avec les PSL : plaquettes en
particulier
 C’est pourquoi les dérivés sanguins sont
systématiquement déleucocytés lors des traitements
transfusionnels
57