TROUSSE ELISA BVDV SEROLOGIQUE

www.biox.com
TROUSSE ELISA BVDV SEROLOGIQUE
Pour sérums (Bovins) - Blocage - Monocupule
BIO K 230/2 - BIO K 230/5
Le BVD (bovine virus diarrhoea) et la maladie des mu-
queuses (MD) sont deux entités cliniques diérentes
causées par un même virus. Le BVD est le résultat
d’une infection aiguë d’animaux susceptibles qui peut
survenir à n’importe quel âge de la vie post-natale. La
mortalité du BVD est faible, l’aection étant de courte
durée. A l’opposé, la maladie des muqueuses est une
aection de faible morbidité mais dont la mortalité est
très importante. Cette maladie des muqueuses se dé-
veloppe chez des animaux virémiques contaminés in
utéro. La caractéristique de cette infection in utéro est
l’existence d’une immunotolérance spécique qui em-
pêche les animaux de produire des anticorps contre
la souche infectante mais pas contre une autre sou-
che de BVD antigéniquement diérente. Ces animaux
infectés de façon persistante par le virus peuvent ne
pas développer de signes cliniques pendant une très
longue période et la seule manière de les déceler est
d’avoir recours à des tests de laboratoire. Bien que la
seule méthode valable de détection de ces animaux
infectés de façon persistante reste la mise en évidence
du virus BVD lui-même, il est possible d’avoir recours
à un test sérologique pour éviter de devoir soumettre
tous les animaux d’une exploitation à un test de mise
en évidence du virus BVD à partir de leucocytes. C’est
en eet parmi les animaux parfaitement séronégatifs
qu’il y a le plus de chance de trouver des animaux
infectés de façon persistante. Il ne faut toutefois pas
oublier qu’on peut également trouver dans ce groupe
des animaux qui n’ont jamais été en contact avec le
virus. Les tests sérologiques permettent également de
suivre l’évolution sérologique des animaux en cours
de vaccination et d’identier les animaux contami-
nés par le virus BVD en suivant leur séroconversion.
Protocole du test
1- L’anticorps monoclonal est xé sur la microplaque
et il capture la protéine virale NS3.
2- Ajouter les échantillons et les contrôles positif et
négatif.
Incuber 2 heures à 37°C+/-3°C.
Laver la plaque
3- Ajouter le conjugué.
Incuber 1/2 heure à 37°C+/-3°C.
Laver la plaque
4- Ajouter la solution de TMB monocomposant.
Attendre 10 minutes
Ajouter la solution d’arrêt. Lire à 450 nm
Utilisation de la trousse
La trousse est prévue pour
déterminer le statut sérolo-
gique des bovins vis-à-vis du
BVDV
Fiabilité des résultats
L’utilisation d’un anticorps
monoclonal comme conju-
gué assure une excellente
spécicité et des résultats
très ables. L’utilisation d’un
anticorps monoclonal pour
purier la protéine NS3 sur
la plaque permet également
d’obtenir une excellente spé-
cicité.
Facilité d’utilisation
Peu de manipulations sont
nécessaires.
Résultats disponibles en
maximum 170 minutes.
Bio-X Diagnostics - 38, Rue de la Calestienne (PAE) - 5580 Rochefort - Belgique
Tél : [phone] - Fax : [phone] - E-mail : [email protected]

Concordance entre les deux tests: Kappa = 0,98
La concordance entre les 2 tests est estimée excellente
Landis et Koch, The measurement of observer agreement for categorical data
Biometrics 1977, 33, 159-74
www.biox.com
Performances de la trousse
270 sérums sanguins ont fait l’objet d’une comparaison entre la trousse BIO K 230 (test de
blocage) et un test ELISA d’immunocapture(BIO K 004).
Les résultats gurent dans le graphique n° 1.
Sur l’abscisse, 1 indique la valeur obtenue avec le sérum positif de référence de la trousse
(E/P). Sur l’ordonnée, les valeurs sont données en pourcentage d’inhibition calculé en ap-
pliquant la formule suivante:
% inhibition = (DO négatif - DO échantillon)/DO négatif
DO négatif: densité optique obtenue sans sérum sanguin compétiteur
Graphique n° 1
BVBV Immunocapture - Blocage
- +
- 105 1 106
+ 2 162 164
107 163 270
BIO K 004
BIO K 230
BIO K 004 Test d’immunocapture
-20,00
0,00
20,00
40,00
60,00
80,00
100,00
00,2 0,4 0,6 0,8 11,2 1,4 1,6 1,8
Seuil
BVD sera
% inhibition
BIO K 230 (blocage)
E/P
Seuil
BIO K 230
Bio-X Diagnostics - 38, Rue de la Calestienne (PAE) - 5580 Rochefort - Belgique
Tél : [phone] - Fax : [phone] - E-mail : [email protected]

www.biox.com
- +
- 41 3 44
+ 0 37 37
41 40 81
BIO K 230
Trousse concurrente
Concordance entre les deux tests: Kappa = 0,93
La concordance entre les 2 tests est estimée excellente
Landis et Koch, The measurement of observer agreement for categorical data
Biometrics 1977, 33, 159-74
Comparaison entre la trousse compétition BIO K 230 et un test ELISA indirect d'un concurrent
-20
0
20
40
60
80
100
00,05 0,1 0,15 0,2 0,25 0,3 0,35 0,4 0,45 0,5 0,55 0,6 0,65 0,7 0,75 0,8 0,85 0,9 0,95 11,05 1,1 1,15 1,2 1,25 1,3 1,35 1,4
Test indirect (firme concurrente)
BIO K 230 (compétition)
% Inhibition
Densité optique
Performances de la trousse
81 sérums sanguins ont fait l’objet d’une comparaison entre une trousse ELISA indirecte
provenante d’une rme concurrente et le test ELISA de Blocage (BIO K 230).
Les résultats gurent dans le graphique n° 2.
Sur l’abscisse, les données représentent les densités optiques enregistrées tandis que sur
l’ordonnée, gurent les pourcentages d’inhibition calculé en appliquant la formule suivan-
te:
% inhibition = (DO négatif - DO échantillon)/DO négatif
DO négatif: densité optique obtenue sans sérum sanguin compétiteur
Test indirect (rme concurrente)
BIO K 230 (Blocage)
Comparaison entre la trousse BIO K 230 (blocage) et un test ELISA indirect d’un concurrent
% inhibition
Densité optique
Bio-X Diagnostics - 38, Rue de la Calestienne (PAE) - 5580 Rochefort - Belgique
Tél : [phone] - Fax : [phone] - E-mail : [email protected]

BIO K 230 : TROUSSE ELISA SEROLOGIQUE BVDV (BLOCAGE)
www.biox.com
Composition de la trousse
BIO K 230/2 BIO K 230/5
Microplaques 2 (192 tests) 5 (480 tests)
Solution de lavage 1 X 100 ml (20 X) 1 X 250 ml (20 X)
Solution de dilution 1 X 30 ml (5 X) 1 X 30 ml (5 X)
Conjugué 1 X 0.5 ml (50 X) 1 X 1.4 ml (50 X)
Sérum positif 1 X 0.5 ml (1 X) 2 X 0.5 ml (1 X)
Sérum négatif 1 X 0.5 ml (1 X) 2 X 0.5 ml (1 X)
TMB mono-composant 1 X 25 ml (1 X) 1 X 55 ml (1 X)
Solution d’arrêt 1 X 15 ml (1 X) 1 X 30 ml (1 X)
Stabilité: 1 an entre +2°C et + 8°C.
Bio-X Diagnostics - 38, Rue de la Calestienne (PAE) - 5580 Rochefort - Belgique
Tél : [phone] - Fax : [phone] - E-mail : [email protected]