Nouveaux facteurs pronostics dans le cancer du sein

Apport des Biomarqueurs
tissulaires dans le cancer du sein
Que croire?
Dr Anne-Sophie Gauchez
Pôle de biologie
CHU Grenoble
Données cliniques
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Les indications de traitement adjuvant par hormonothérapie et/ou chimiothérapie dans la
prise en charge des cancers du sein invasifs sont fondées sur données cliniques et
anatomopathologiques:
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L’âge
Le statut ménopausique
La taille tumorale,
Le grade
L’envahissement ganglionnaire
Les angio-invasions
Le statut des récepteurs hormonaux
La surexpression de HER-2
Index de prolifération (Mib1, Ki67...)
• …
•
Ceci entraîne des indications du traitement adjuvant systémique par hormonothérapie (HT)
et/ou chimiothérapie (CT) pour 85 à 95% des patientes avec un cancer du sein sans atteinte
ganglionnaire (N0)
•
Dans ce groupe, ces indications de traitement adjuvant, en particulier la chimiothérapie ont
été probablement portées en excès si l’on se réfère à l’évolution clinique des patientes N0
dans les méta-analyses et les données d’analyses historiques de l’évolution naturelle des
cancers.
Développement de nouveaux biomarqueurs
Évaluation des biomarqueurs
Grilles de Hayes(1996) et de Simon (2009)
3 biomarqueurs tissulaires
expertise INCA 2009, réactualisée en 2012
E Luporsi, JP Bellocq, J Barriere, J Bonastre, J Chetritt, AG Le Corroler, P De Crémoux, F Fina, AS Gauchez, PJ Lamy, PM Martin, C Mazouni, JP Peyrat, G Romieu, L Verdoni,
V Mazeau-Woynar, D Kassab-Chahmi (2014): uPA/PAI-1, Oncotype DXTM, MammaPrintR Valeurs pronostique et prédictive pour une utilité clinique dans la prise en
charge du cancer du sein. Oncologie 2014; 16: 196-206 - Ann Pathol. 2014; on line 22 August 2014 – Bull cancer 2014, in press
LOE
IA
IB
Type d’étude
Validation
Prospectives
Non nécessaires
Prospectives - Rétrospectives utilisant des
échantillons archivés prospectivement dans le
1 étude ou plus avec des résultats concordants
cadre d’un essai clinique.
IIB
Prospectives - Rétrospectives utilisant des
échantillons archivés prospectivement dans le
Échantillons provenant d’essais cliniques différents
Aucune étude ou plusieurs études avec des résultats
non concordants
cadre d’un essai clinique
IIC
IIIC
Prospectives - observationnelles (registre)
2 études ou plus avec des résultats concordants
Aucune étude ou 1 étude avec des résultats
Prospectives - observationnelles (registre)
concordants ou non concordants
IV-VD
Rétrospectives - observationnelles
Non applicable
•
Les biomarqueurs tumoraux pronostiques sont utilisés pour:
–
Prédire l’évolution clinique d’un processus tumoral spécifique en l’absence de traitement ou dans le cadre
d’un traitement standard.
–
Leur intérêt réside dans la distinction entre les patients à faible risque de récidive de ceux à risque plus
élevé.
–
Permettent de
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sélectionner les patients à très faible risque pouvant éviter certains traitements,
d’identifier les tumeurs particulièrement agressives
de distinguer des patients nécessitant une surveillance accrue.
Ils n’identifient pas les patients qui pourraient bénéficier d’un traitement spécifique
Les biomarqueurs tumoraux prédictifs sont utilisés pour:
–
Prédire la réponse ou non à une thérapie donnée.
–
Ce sont donc des outils précieux pour aboutir à un traitement personnalisé.
–
Ils requièrent pour leur évaluation
•
•
•
deux groupes de patients, de préférence randomisés,
l’un soumis à un protocole thérapeutique spécifique, l’autre sans traitement ou soumis à un protocole standard.
La valeur prédictive témoigne du degré d’efficacité dudit traitement par rapport au statut du biomarqueur.
3 biomarqueurs tissulaires
expertise INCA 2009, réactualisée en 2012
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uPA/PAI1: marqueurs de l’interaction tumeur et microenvironnement
–
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–
–
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Oncotype DxTM: signature moléculaire 21 gènes
–
–
–
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Préparation cytosolique de tissu tumoral cryopréservé (ct anapath)
Test ELISA (marquage CE, ct de qualité international)
Essai NNBC3
Détermination de valeurs seuils: uPA < 3ng/mg Pr et PAI1 < 14 ng/mg Pr
Analyse simultanée par PCR de l’ARNm correspondant à l’expression de 21 gènes à partir
de tissu inclus en paraffine (1 seule plateforme aux EU)
Essai TAILORx
Stratification N0, RE+, tamoxifène en risque faible, intermédiaire et élevé
MammaprintR: signature moléculaire 70 gènes.
–
–
–
Microbiopsie de tissu cryopréservé ou dans une solution de stabilisation de l’ARN (1 seule
plateforme à Amsterdam)
Essai MINDACT
Classification en haut risque et bas risque, N0, < 5cm (stades I ou II), <61 ans
P.M. Martin. Oncologie 2010
Conclusions du rapport INCA/SFSPM de 2012
Valeur pronostique
Valeur prédictive
Technique
uPA/PAI-1
Enzymes protéolytiques impliquée dans la
dégradation de la matrice extra-cellulaire, la
régulation des protéines d’adhésion, et la
migration cellulaire
Essai NNBC3
Valeurs seuils : uPA < 3 ng/mg Pr et PAI-1
< 14 ng/mg Pr
- pN0 SSR 10 ans (LOE IA)
- pN0 CT CMF (LOE IA)
- N+ ou RH+ PAI-1 (LOE IV – VD)
- CT anthracyclines (LOE IIIC)
Technique ELISA, 50 mg tissu congelé,
marquage CE, approuvé FDA
NABM B300 (81 euros)
7 centres réalisent ce dosage CHU:
Grenoble, Marseille, Strasbourg; CLCC:
Montpellier, Nantes, Rouen, Nice
Oncotype DXTM
21 gènes: prolifération, Her2, RH
Essai TAILORx
Valeur de « recurrence score » (RS) =
risque de rechute (bas, intermédiaire, haut)
- pNo, RO+ sous tamoxifène, risque de
métastases à distance à 10 ans (LOE IIB)
- pNo ou N+ anastrozole ou tamoxifène,
RH+ et Her2- (LOE IIB)
-pN0 tamoxifène CT CMF (LOE II): Ht risque
de récidive ou risque intermédiaire, CMF
(LOE IIB)
- N+, RO+, tamoxifène réponse CT
anthracyclines RS élevé (LOE IIB)
Blocs fixés et inclus en paraffine, pas de ct
qualité pré-analytique, pas d’approbation
FDA
HN: 3820 dollars au 09/04/2009
Plateforme unique aux EU
MammaprintR
70 gènes
Essai MINDACT
Classification en haut risque et bas risque
- pN0 < 61 ans (stade I ou II) risque de
métastases à distance à 5 ans (LOE IIIC)
- Ht risque de récidive : CT adjuvante et
néo-adj (LOE IIIC)
Tissu congelé, pré-analytique validé
À ce jour pas d’étude prospective valeur
ajoutée uPA/PAI-1 et RH et Her2
HN: 4200 dollars au 20/04/2009
Plateforme unique à Amsterdan
Conditions de prélèvement et de prescription
uPA/PAI-1 (référentiel de cancérologie)
•
Echantillon tumoral (biopsie ou pièce
d’exèrèse): 50 - 100 mg (soit 45 à 90 mm3)
•
Prélèvement à réaliser 3 semaines après
biopsie ou cytoponction:
–
interférence sur le dosage de PAI-1 (élévation non
spécifique) avec le processus cicatriciel
•
Vérification anapath image en miroir de la
tumeur (confirmation nature tissu)
•
A congeler rapidement (< 1 heure)
–
–
–
•
Azote liquide
-80°C
Carboglace
Fiche de prescription
–
–
–
Démographie patient, date prélèvement…
Nature prélèvement (exérèse, biopsie…)
Renseignements cliniques +++
•
Préparation d’extrait tissulaire Triton
–
–
–
–
Pulvérisation des tissus congelés (poudre)
Extraction tissulaire (poudre + tampon + triton) agitation à froid 16h
Ultracentrifugation (éliminer débris cellulaires) 1h à froid
Récupération extrait cellulaire entre la couche lipidique et le culot de débris cellulaires
•
•
Dosage de protéines
Dosages uPa et PAI-1
•
Dosage de protéines (méthode BCA de Pierce, non affectée par présence de Triton) permet la standardisation des valeurs
par rapport à la quantité initiale de prélèvement
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Dosage sur 2 à 3 jours
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Contrôle de qualité « interne », et externe
•
Cut-off:
uPA = 3 ng/mg Pr
PAI-1 = 14 ng/mg Pr
uPA-PAI1: 2 ans de pratique (Grenoble 2010- 2012)
277 patientes :
- 31 (17,7%): modification de prise en charge
17 ( 6%): chimiothérapies évitées (alors qu’indiquées par référentiels)
14 (5%): chimiothérapies indiquées
L Venat-Bouvet, V Fermeaux, S Leobon, N Saidi,
J Monteil, J Mollard, Y Aubard, I Jammet, N Tubiana-Mathieu:
Adjuvant chemothery in node-negative breast cancer: uPA/PAI-1
for 163 cases. Anticancer Res 2014; 34: 1213-8
• Investissement important de l’INCA
• Etudes médico-économiques +++
• Sensibilisation des acteurs pour répondre aux
référentiels
• Groupe de travail national mis en place sur
« uPA/PAI1 »
– Travail et exploitation multicentriques
– Lots de réactifs identiques, contrôles de qualité+++
– Structure unique pour les «autorités»