Université Montpellier 2 - Master Sciences pour l`Environnement

Université Montpellier 2 - Master Sciences pour l’Environnement
Mention : Biologie des Plantes, des Microorganismes, Bioingéniéries, Bioprocédés
Spécialité : IMHE (Interactions Microorganismes, Hôtes, Environnements)
Renvoyer la proposition de sujet de stage à
[email protected] , [email protected]
Responsable des stages d’Initiation à la Recherche de M1 et de M2 :
Tatiana Vallaeys : [email protected] Tél : 04 67 14 40 11
Administration :
Patricia Quéméner : [email protected]
Sujet de stage préciser le niveau souhaité M1 et/ou M2 (le cas échéant indiquez vos
préférences:
Stage de M1 : Analyse in vivo de la tissu-spécificité de la transcription de virus d’insectes par
HIS
Responsable (s) de stage :
Marc RAVALLEC, IE INRA ([email protected])
Anne-Nathalie VOLKOFF, DR2 INRA ([email protected], 04 67 14 41 18)
Anne-Sophie GOSSELIN, MCF UM2 ([email protected])
Laboratoire d’Accueil et nom du Directeur :
UMR 1333 INRA - Université Montpellier 2 "Diversité, Génomes et Interactions
Microorganismes-Insectes" (DGIMI)
Case Courrier 101
Bâtiment 24, 4ème étage
Place Eugène Bataillon
34 095 Montpellier Cedex 5
Directeur : Patrick TAILLIEZ
Equipe d’Accueil :
2 équipes : Biologie Intégrative des Interactions Hôte-Parasitoïdes et Dynamique des
Interactions Densovirus-Insectes
Voir site de l’unité pour la composition des équipes:
http://www6.montpellier.inra.fr/dgimi/Plateforme-experimentale-sur-insectes
Dans quel contexte s’insère le sujet de stage (démarrage d’un projet, travail partiel d’un sujet
de thèse …….) :
Question transversale qui intéresse 2 équipes dans le cadre de leurs projets de recherche
respectif.
Description du stage : donner un résumé (contexte, problématique, matériels et méthodes).
Objectif :
Le stage portera sur l’étude de 2 familles de virus d’insectes1, les polydnavirus et les
densovirus, qui infectent des larves de lépidoptère (chenilles) mais ayant des caractéristiques
génomiques, génétiques et biologiques très différentes.
Pour ces 2 familles de virus, nous souhaiterions répondre à la question de « quelles protéines
virales sont exprimées dans quels tissus de l’insecte infecté ». Lors de ce stage, il s’agira
d’analyser par hybridation in situ la transcription virale dans 2 tissus d’importance dans la
physiologie de l’insecte, les cellules sanguines (ou hémocytes, principaux effecteurs de la
réponse immunitaire cellulaire) et le corps gras (siège important du métabolisme de
l’organisme, analogue au foie des vertébrés).
1
Les polydnavirus sont des virus à génome multipartite d’ADN double brin de grande taille
(plus de 300 kb). Ils sont associés symbiotiquement à des micro-guêpes parasites. Ils se
répliquent dans les ovaires et sont injectés par la femelle lors de la ponte dans une larve de
lépidoptère. Ils ne se répliquent pas dans ce deuxième hôte insecte. Les cellules de l’insecte
sont cependant infectées et les protéines virales induisent de profondes modifications
physiologiques qui permettent le développement de la guêpe parasite. Quant aux densovirus,
ce sont de petits virus à ADN simple brin non-enveloppés (génome de 6 kb) qui sont de vrais
pathogènes d’insectes. Ils sont transmis par voie orale et après la traversée de l’épithélium
digestif, colonisent la cavité générale de l’insecte où ils se répliquent.
Techniques abordées :
Expérimentation sur insecte : infections et dissections d’insectes
Biologie moléculaire : préparation de sondes ARN ou ADN fluorescentes
Imagerie : préparation des échantillons (tissus/cellules prélevées sur insecte) et hybridation in
situ, observation avec microscope à fluorescence et/ou confocal