Etude des mécanismes d`action de la protéine SET dans

Stage proposé par
Violaine Simon, Maître de Conférence Université Paris 7
David L’Hôte, Maître de Conférence Université Paris 7
Unité de Biologie Fonctionnelle et Adaptative, Université Paris7-CNRS UMR 8251, Equipe Physiologie
de l’Axe Gonadotrope – INSERM U 1133, Bâtiment Buffon – Paris 13ème
Téléphone : 01-57-27-84-02 ou 84-07
Mail : [email protected]
[email protected]
Site internet : http://www.bfa.univ-paris-diderot.fr/spip.php?rubrique34
Directeur du Laboratoire ou de l’Unité : Jean-Marie DUPRET
Intitulé de l’équipe d’accueil : Physiologie de l’Axe Gonadotrope
Prénom et NOM du Responsable de l’équipe : Joëlle COHEN-TANNOUDJI
Résumé du thème de recherche de l’équipe :
La recherche développée par l’équipe a pour ambition de mieux comprendre les mécanismes du
contrôle endocrine et neuroendocrine de la fonction de reproduction. Elle est donc centrée sur l’étude
de l’axe gonadotrope, qu’il s’agisse du complexe hypothalamo-hypophysaire ou de l’ovaire, au cours
du développement et chez l’adulte. Aux aspects physiologiques fondamentaux, elle associe l’étude de
l’influence de perturbateurs, internes (désordres nutritionnels) ou externes (contaminants,
perturbateurs endocriniens). Ces recherches sont développées autour des deux grands thèmes
suivants :
1- La différenciation et la régulation de la fonction gonadotrope hypophysaire
2- Le rôle de l’hormone anti-Mullérienne (AMH) et de l’oestradiol dans la fonction ovarienne
Le projet proposé s’intègre dans le thème 1
Etude des mécanismes d’action de la protéine SET dans la régulation de
l’expression des gènes des hormones gonadotropes hypophysaires, LH et FSH
Prénom, NOM, téléphone et adresse e-mail du Responsable du stage:
Violaine SIMON, 01-57-27-84-02, [email protected]
David L’HÔTE, 01-57-27-84-07, [email protected]
Projet de stage : (une vingtaine de lignes maximum)
Chez les mammifères, la fonction de reproduction est sous le contrôle de la neurohormone
hypothalamique GnRH qui active un récepteur à 7 domaines transmembranaires (R-GnRH) dans les
cellules gonadotropes de l’hypophyse. Cette activation conduit à l’expression des hormones
gonadotropes LH et FSH dont dépendent la stéroïdogenèse et la gamétogenèse.
Nous avons récemment découvert au laboratoire un nouvel acteur de la fonction gonadotrope, la
protéine SET. Nos travaux récents suggèrent qu’en plus du rôle membranaire de SET dans la
signalisation de la GnRH (Avet et al., 2013), SET participe aux effets nucléaires de la GnRH en
régulant la transcription de gènes clefs de la fonction gonadotrope. En effet, nous avons montré pour
la première fois un rôle inhibiteur de SET sur la transcription des gènes codant les sous unités β des
hormones gonadotropes. Les mécanismes moléculaires de cette inhibition et de sa levée par le GnRH
sont encore inconnus.
L’objectif de ce stage sera d’évaluer la nature des mécanismes impliqués dans la régulation de
l’expression des deux hormones gonadotropes par la protéine SET par des approches de biochimie et
de génomique fonctionnelle. Nous évaluerons d’une part l’impact de la GnRH sur l’activité cellulaire de
SET, et en particulier sur sa localisation subcellulaire. D’autre part, nous évaluerons la capacité de
SET à interagir avec les éléments régulateurs (promoteur/enhancer) situés en amont des gènes LHβ
et FSHβ et à réguler les marques épigénétiques des histones présentes dans les promoteurs de ces
gènes. Ces différents résultats permettront de mieux comprendre le rôle de SET dans la régulation par
la GnRH des gènes des hormones gonadotropes.
Techniques mises en œuvre par le stagiaire :
Culture cellulaire (lignée gonadotrope LβT2), transfection (plasmides et siRNAs), immunoprécipitation
de la chromatine (ChIP), activité de promoteurs, fractionnement subcellulaire, qPCR et techniques de
biologie moléculaire
Publications des Responsables de stage au cours des 5 dernières années :
1- Avet C, Denoyelle C, L’Hôte D, Cohen-Tannoudji J, Simon V. SETting the stage for GnRH
signalling: Evidence for a regulatory loop between GnRH receptor and its interacting protein SET
relying on SET down-regulation. Soumis à Mol. Cell. Endocr.
2: Garrel G, Racine C, L'Hôte D, Denoyelle C, Guigon CJ, di Clemente N, Cohen-Tannoudji J. AntiMüllerian hormone: a new actor of sexual dimorphism in pituitary gonadotrope activity before puberty.
Sci Rep. 2016 Mar 31;6:23790.
3: Palandri A, L'hôte D, Cohen-Tannoudji J, Tricoire H, Monnier V. Frataxin Inactivation leads to
steroid deficiency in flies and human ovarian cells. Hum Mol Genet. 2015 May 1;24(9):2615-26.
4: Lannes J, L'Hôte D, Garrel G, Laverrière JN, Cohen-Tannoudji J, Quérat B. Rapid communication:
A microRNA-132/212 pathway mediates GnRH activation of FSH expression. Mol Endocrinol. 2015
Mar;29(3):364-72.
5- Garrel G, Simon V, Denoyelle C, Ishaq M, Rouch C, Dairou J, Magnan C, Migrenne S, CrucianiGuglielmacci C, Cohen-Tannoudji J.Unsaturated fatty acids disrupt Smad signaling in gonadotrope
cells leading to inhibition of FSHβ gene expression. Endocrinology, (2014), 155(2):592-604
6: Georges A, L'Hôte D, Todeschini AL, Auguste A, Legois B, Zider A, Veitia RA. The transcription
factor FOXL2 mobilizes estrogen signaling to maintain the identity of ovarian granulosa cells. Elife.
2014 Nov 4;3. 04207
7- Avet C, Garrel G, Denoyelle C, Laverriere JN, Counis R, Cohen-Tannoudji J, Simon V. SET
interacts with intracellular domains of the gonadotropin-releasing hormone receptor and differentially
regulates receptor signaling to cAMP and calcium in gonadotrope cells. J Biol Chem, (2013), 288 (4) :
2641-54
8- Schang AL, Querat B, Simon V, Garrel G, Bleux C, Counis R, Cohen-Tannoudji J, Laverriere
JN.Mechanisms underlying the tissue-specific and regulated activity of the Gnrhr promoter in
mammals? Frontiers in endocrinology, (2012), vol 3, article 162.
9- Cohen-Tannoudji J, Avet C, Garrel G, Counis R, Simon V. Decoding high gonadotropin-releasing
hormone pulsatility: a role for GnRH receptor coupling to the cAMP pathway? Frontiers in
endocrinology, (2012), vol 3, article 107.
10- Simon V, Oner SS, Cohen-Tannoudji J, Tobin AB, Lanier SM. Influence of the accessory protein
SET on M3 muscarinic receptor phosphorylation and G protein coupling. Molecular Pharmacology
2012, 82(1):17-26
11: L'Hôte D, Georges A, Todeschini AL, Kim JH, Benayoun BA, Bae J, Veitia RA. Discovery of novel
protein partners of the transcription factor FOXL2 provides insights into its physiopathological roles.
Hum Mol Genet. 2012 Jul 15;21(14):3264-74
Autres informations:
Etudiants actuellement en thèse ou en M2 dans l’équipe d’accueil. Pour chaque étudiant indiquez
le nom du responsable de thèse, l’année du début de la thèse et l’Ecole Doctorale de rattachement
Jérôme LANNES, Dir. B. Quérat, Thèse, Oct. 2013, ED 562
Ambra FERNANDEZ-VEGA, Dir. B. Quérat, M2
Etudiants ayant préparé ou soutenu leur thèse ou leur M2 dans l’équipe d’accueil au cours des
six dernières années. Pour chaque étudiant indiquez le nom du responsable de l’étudiant, l’année
du début de la thèse et de fin de la thèse, l’Ecole Doctorale de rattachement et le devenir de l’étudiant.
Sandra DOS SANTOS, resp B. Quérat, 2006-2010, ED 227, en post-doctorat (Brésil)
Ishaq MUHAMMAD, Dir R. Counis. 2006-2010, ED 419
Anne-Laure SCHANG, Dir JN Laverrière. 2007-2011, ED 419, en post-doctorat (Paris, France).
Laure TABOUY, Dir JN Laverrière/Julien Dairou. 2009-2012, ED 419, en post-doctorat (Tel-Aviv,
Israël).
Charlotte AVET, Dir V. Simon/ J. Cohen-Tannoudji, 2010-2013, ED 419, en post-doctorat (Montréal,
Quebec).
Charlotte FRANCOIS, Dir C. Guigon/ J. Cohen-Tannoudji, 2012-2016, ED 562
Dalhia Tharwat, Dir. G. Garrel/ J. Cohen-Tannoudji, M2, 2013-2014
Thomas Hivet, Dir. Nathalie Di Clemente, M2, 2014-2015
Salma Touleïmat, Dir. M. Grynberg/ C. Racine, M2, 2015-2016
Cette proposition de stage s’adresse-t-elle spécifiquement à un étudiant scientifique, médecin
ou vétérinaire ou bien est-il ouvert à tous les profils ?
Ouvert à tous les profils
Ce sujet peut-il donner lieu à une thèse ?
OUI