Microsoft PowerPoint - Cours Bact\351rio G\351n\351rale 7

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Chap VII
La capsule, le glycocalix
Introduction
la capsule est un composant superficiel important de la virulence des bactéries
(G+ et G-) qui intervient dans la préparation de vaccins (Ag K).
Définitions
Le glycocalix (capsule au sens large) correspond à toute substance qui entoure la
paroi de certaines bactéries et qui n’est jamais délimitée par une membrane.
On distingue:
-un glycocalix sans signification anatomique qui correspond à un
composant extracellulaire (visqueux et plus ou moins diffusible) et éliminable par
simple lavage: slime layer ou couche mucoïde
-un glycocalix ayant une signification anatomique (couche cohérente
visible au microscope) qui correspond à une :
*couche muqueuse, qui peut être éliminée par des procédés doux
*capsule proprement dite, difficile à éliminer; elle correspond souvent à
un gel très hydraté de polysaccharides (liaisons covalentes)
*microcapsule muqueuse
*microcapsule

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Mise en évidence
1- Examen à l’état frais
L’examen direct montre un halo réfringent entourant le corps bactérien
2-Examen direct en présence de protéines non spécifiques
L’utilisation de sérum à un pH convenablement choisi (acide) augmente l’indice de
réfraction
3-Examen direct en présence d’anticorps spécifiques
On observe un phénomène de gonflement de la capsule (augmentation de l’indice de
réfraction)
4- Examen après coloration
Coloration négative (MO) méthode de Burri à l’encre de chine
Coloration positive (MO) colorants fluorescents
Ultrastructure (ME) couche mal définie, coloration négative et ombrage métallique
Disposition, structure et ultrastructure
épaisseur: de 0,2 µm (microcapsule) à >1µm (capsule)
aspect: plusieurs germes enclos dans une même capsule (Klebsiella, Pneumococcus) ;
consistance glaireuse= zooglée Leuconostoc mesenteroïdes) ; gaine rigide; capsule très fine
visible en fluorescence (certains Bacillus)
organisation: souvent absente, parfois présence de fibrilles perpendiculaires à la paroi (E. coli)
ou hétérogénéité biochimique (capsule polypeptidique et polysaccharidique chez B.
megaterium) ; variations d’épaisseur

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Composition chimique
1-Capsule polysaccharidique
Correspond à la structure la plus fréquente et la plus variable
Homopolysaccharide
Correspond à la polymérisation d’un seul type d’ose (plusieurs millions de daltons)
glucose (dextranes ou glucanes): Leuconostoc mesenteroïdes (source industrielle de
dextranes)
fructose (levanes ou fructosanes): Streptococcus salivarius
galactose (galactanes): Mycoplasma mycoïdes (sans paroi) mais aussi fucose , rhamnose…
Hétéropolysaccharide:
Ces capsules hétéroploysaccharidiques résultent de la polymérisation d’un motif de base (ose
+ acide uronique) et forment un gel fortement hydraté; elles sont fréquentes en pathologie
humaine:
polyosides pneumococciques: motif d’acide D-glucuronique et de D-glucose(b 1-4), grande
variété antigénique (80 types)
polyosides streptococciques(groupes A et C) : motif d’acide D-glucuronique et de D-
Nacétylglucosamine; la capsule est présente au début de la phase exponentielle de croissance,
puis elle est hydrolysée par la streptohyaluronidase
polyosides K des entérobactéries, motif variés, très acides (80 types chez E. coli)

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2- Capsule peptidique
surtout chez les bactéries G+
Bacillus anthracis, polypeptide d’acide D-glutamique
Capsulogénèse
Expression phénotypique du caractère capsule
Importance du milieu de culture
Streptococcus salivarius (levanes) et Leuconostoc mesenteroïdes (dextranes): saccharose;
les halophiles: NaCl;
les pneumocoques: source de carbone
Importance de la pression de sélection
capsule in vivo, perte de la capsule in vitro
Importance des conditions physiologiques optimales
exemple des Streptocoques (phase exponentielle de croissance)
Facteurs génétiques
Perte par mutation, récupération par transformation (Streptococcus pneumoniae)
Expérience de Griffith et col.
Transformation ( Avery, Mc Leod et Mc Carthy)

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Streptococcus pneumoniae
C+ = germe capsulé
C-= mutant non capsulé
Expérience Griffith (1928)
Transformation des bactéries (Streptococcus pneumoniae)