Etude des mécanismes moléculaires contrôlant le recrutement des

 Inserm UMR 1043 – CNRS UMR 5282 Centre de Pathophysiologie de Toulouse Purpan (CPTP) Directeur : Roland Liblau Equipe : Sylvie Guerder Cellules présentatrices de l’antigène et réponses T CD4
Etude des mécanismes moléculaires contrôlant le recrutement des cellules dendritiques dans les tumeurs solides Equipe Cellules présentatrices de l’antigène et réponses T CD4
Responsable : S. Guerder
Contacte : [email protected] Tel : O562748376
Centre de Physiopathologie de Toulouse Purpan- U1043 Le concept d’immuno-­‐surveillance postule que des tumeurs naissantes sont éliminées grâce à l’action concertée des systèmes immunitaires inné et adaptatif. Les analyses histologiques de tumeurs humaines ont clairement objectivé le pronostic favorable des infiltrations leucocytaires dont les cellules natural killer (NK), les cellules T et les cellules dendritiques (DC). Néanmoins la plasticité génétique et l’environnement immunosuppressif des tumeurs met souvent en échec le système immunitaire en affectant principalement le recrutement et les fonctions des DC. Alors que ces mécanismes d’immunorégulation sont largement décrits, les événements permettant un recrutement et une maturation des DC dans la tumeur et la mise en place d’une réponse anti-­‐tumorale protectrice sont encore peu compris. Nous avons récemment montré que le site d’implantation tumorale, et notamment sa constitution en DC conditionne l’immunogénicité d’une tumeur. En continuation, notre équipe étudie les mécanismes de recrutement des DC vers l’espace tumoral, les mécanismes d’activation de ces DC et la fonction des lymphocytes T CD4 et CD8 spécifiques des antigènes tumoraux. Afin d’aborder ces questions, nous avons développé un modèle expérimental permettant d’analyser simultanément les DC ayant capturé des antigènes tumoraux modèles (TAA) et les réponses T CD4 et CD8 associées. Pour cela nous avons généré des lignées de tumeurs exprimant des TAA modèles, l’ovabulmine (OVA) et un peptide dérivé de la protéine IEa fusionnée à la protéine fluorescente dTomato. La présentation, au cours du développement tumoral, des TAA modèles dans la voie classe I et classe II peut être suivie en mesurant l’activation et la prolifération de cellules T CD4 (OTII) et CD8 (OTI) transgéniques pour un TCR spécifique de l’OVA et de cellules T CD4 TEa spécifiques du peptide IEa. Par ailleurs, les DC présentant l’antigène IEa peuvent être directement identifiées par marquage avec l’anticorps YAE qui reconnaît les complexes CMH/peptide IAb/IEa. En collaboration avec 2 ingénieurs, l’étudiant de Master étudiera les mécanismes moléculaires de guidage des DC vers et dans la tumeur et vers les organes lymphoïdes secondaires par analyse biphotonique dynamique d’explants tumoraux et études fonctionnelles in vivo. Suite à l’identification d’acteurs moléculaires permettant la Inserm UMR 1043 -­‐ CNRS UMR 5282 -­‐ CPTP CHU Purpan –BP 3028 -­‐ 31024 Toulouse Cedex 3 -­‐ France Phone. 33 (0)5 62 74 83 76 -­‐ Fax 33 (0)5 62 74 45 58 E-­‐mail : [email protected] mobilisation des DC vers les tumeurs, l’étudiant déterminera si ces molécules favorisent le développement de réponses protectrices contre la tumeur primaire et ses métastases. Les connaissances fondamentales sur la régulation de la mobilité des DC acquises par ce projet pourraient conduire à l’émergence de nouvelles stratégies d’immunothérapies en cancérologie. Références : 1) Joncker, N. T., S. Bettini, D. Boulet, M. Guiraud and S. Guerder (2016). "The site of tumor development determines immunogenicity via temporal mobilization of antigen-­‐laden dendritic cells in draining lymph nodes." Eur J Immunol 46(3): 609-­‐618. 2) Guerder, S., N. Joncker, K. Mahiddine and L. Serre (2013). "Dendritic cells in tolerance and autoimmune diabetes." Curr Opin Immunol 25(6): 670-­‐675. Techniques utilisées : Cytométrie en flux multiparamétrique, culture cellulaire, imagerie mono (confocal) et biphotonique dynamique, expérimentation animale (implantation de tumeurs, dissection, analyse fonctionnelle des cellules T in vivo)