Les lymphocytes T : Immunité non spécifique : macrophages , polynucléaire Immunité spécifique : cellule présentatrice d’AG = dendritique - Macrophage - Cellule dentritique - Lymphocyte B - LT Si pas de reconnaissance, pas de reconnaissance immunitaire Plus mise en réserve, de cette immunité spécifique : Lb mémoire Origine des LT : MO que cela se passe = cellule souche hématopoïétique, marqueur CD34, reconstitution du tissus sanguins, réserve++ , auto-renouvellement sans permettre son pouvoir de donner une cellule non différencié. Cellule capable de donner une cellule différencié = cellules progénitrices. Pour donner des cellules matures. Schéma de l’hématopoïèse : Toujours MO > 2 grandes voies de différenciation : CLP : lymphoïde & myéloïde ( plaquettes, macrophages, cellules dendritiques, PNN, PE … ) Différence entre B & T : T part dans le thymus pour maturer. Génération des lymphocytes dans le thymus : besoin de cytokines pour cette différenciation , protéines capables de traduire un langage entre les cellules, IL3 & SCF Au niveau du thymus : IL7 , FT= thymuline, thymosine, thymopoeine. Génération des lymphocytes dans le thymus : Thymus importance ++ Souris Nude : absence de thymus , mutation : pas de poils Souris SCID : absence de T/B , progéniteurs : syndrome immunité défiante sévère, mutation VDJ Expérience : greffe de MO a partir des cellules NUDE : cellules souches => thymus Avant greffe : pas de système immunitaire Développement de l’immunité . Besoin CST & thymus ++ - Syndrome de Di Georges : Délétion chromosome 22 , un enfant sur 4000 : 10 000 en France Carence immunitaire Absence congénitale de thymus Absence de glandes PTH Touche des tissus de face/cou Anomalies cœur & aorte Thymus : - Organe aplati, partie antéro-supérieur du médiastin & la partie basse du cou 2 lobes & lobules Lobules entourés par une capsule de TC lâche d’où partent de courts septa contenant les VX sanguins Le parenchyme thymique divisé en 2 zones distinctes : Couche externe dense : cortex : différenciation LT Couche interne : médullaire La médullaire : moins peuplé en LT Le cortex : irrigation ++ Cortex externe : lymphocytes plus grands que ceux du cortex profond = lymphoblastes qui produisent des clones de cellules T de plus petite taille. Immature CH3- 4- & 86 double négative thymocytes > immature CD3+ double positive > mature CD4+ CH8- thymocytes Rôle du thymus : Production& éducation des LT : 1) Sélectionner des cellules capables de réagir à des AG étrangers présentés par le CMH LT effecteurs & mémoires ( sélection + : procédure d’apprentissage qui permet au thymocytes de reconnaitre les molécules de classe 1 ou 2 ) 2) Ne pas engendrer de réaction auto-immune éliminer les clones auto-réactifs ( sélection négative ) Ressemblance AG exogène d’un endogène : emballement => maladies ,on va éviter les clones qui ont une forte affinité pour les AG du soi ; 2 sélections : 1) Sélection positive : cellules capables de reconnaitre les molécules de CMH Mol2cules HLA des cellules épithéliales thymiques Apprentissage à reconnaitre un Ag présenté par CMH 2) Sélection négative : cellules ne réagissent pas aux AG du NON soi, élimination des cellules T auto réactive, si réaction au soi : apoptose 90% Rôle des macrophages / CD thymiques : présentatrice d’AG Apprentissage de ne pas réagir au AG du soi Thymus : Organe lymphoïde primaire ou les précurseurs T, d’origine médullaire, se différencient en LT matures naïfs & acquièrent un répertoire tolèrent. - Cellule T naïve : avant rencontre AG - Cellule T effectrice « armée » après la rencontre AG - Principale mission après mise en place RI adaptative => mémoire 2 populations : CD4++ : chef d’orchestre CD8+ : participent à l’immunité cellulaire - Maturation thymique des LT : - Permanente au cours de la vie Remplacement des LT qui meurent en périphérie « turn-over » : dégénérescence avec l’âge : baisse de la taille de l’activité du thymus : plus un organe actif. Car plus on réagit contre un pathogène, plus on a de mémoires. Plus besoin du thymus. Un seul TCR par LT Importance du réarrangement des gènes codant le TCR - - TCR : le récepteur à l’AG des LT : 2 chaines GP membranaires : alpha/béta pont S-S Structure : comparable à Fab des IG Site de reconnaissance à l’épitope & de liaison à l’AG Monovalent Région variable STRUCTURE : 3 régions hypervariables : CDR1 CDR2 CDR3 3 CDR alpha 3 CDR Beta Une région constante 1 charnière ( H ) : S-S - 1 région TM : AA +++ 1 extrémité cytoplasmique 90% des LT expriment TCR alpha/ beta - 10% : TCR gamma / delta TCR : reconnaissance de l’AG - - Indirecte : nécessite la présentation de l’Ag par une molécule du CMH Reconnaissance restreinte par le CMH CMH II pour les LTCD4+ CMH I LTCD8+ Ag protéiques : Courts peptiques après apprêtement, linéaire 8-10 pour le CMH II >13 AA pour le CMH I Génération des lymphocytes dans le thymus : TCR : organisation des gènes et diversité : - 2 types de TCR : un clone de LT n’exprime qu’un seul type de TCR de façon irréversible. TCR : organisation des gènes & diversité : - Locus de la chaine alpha : chromosome 14 V alpha ( 70-80 segments ) , J alpha ( 61 segments ) , Calpha ( 1 segment ) Locus de la chaine beta : chromosome 7 : Vbeta ( 52 segments ) Dbeta ( 2 segments ) , j beta ( 13 segments ) Cbeta ( 2 segments ) Diversité ++ : TCR : réarrangement des gènes : voir cours sur les IG Molécules accessoires : - CD4 ( Th) , CD8 ( CTL ) : Superfamille des Ig - CD4 : 4 domaines Igs like Liaison CMH CL II - CD8 : Chaine alpha, beta 2 domaines Igs like Liaison CMH CL I Complexe CD3 : - δ, ξ, ς - Motif ITAM : motif d’activation riche en tyrosine, transduction signal intracellulaire. Activation des lymphocytes T : L’engagement du complexe peptide-CMH initie les processus qui conduisent à l’assemblage du complexe de signalisation ZAP-70 phosphoryle les molécules adaptatrices qui recrutent les composants des différentes voies de signalisation Activation du LT Prolifération, production de cytokines Capable de s’auto- phosphoryler par IL Autres marqueurs : CD2 CD5 CD7 : marqueurs de lignée T CD3 transduction du signal CD28 surface du lymphocyte & reconnu CD80/86 CD40L : co-activation / CD40 CD25 ( IL2R ) récepteur à l’IL2 : 2 cofacteur : différencie Lnaif ( RA ) & Lmémoire ( RO) LFA1 ICAM-1 molécules d’adhésion Activation des lymphocytes T : Si reconnaissance d’un AG : l’activation des cellules T naïves requiert 2 signaux indépendants 1) CMH ( peptide ) – TCR + CD4 => 1er signal 2) 2ème signal déclenché par les molécules de co-activation Thymocyte une fois dans la circulation, on va garder un élément de contrôle sur les clones auto-réactif = tolérance périphérique. Synapse immunologique : CD4 (Th) : stabilise l’interaction pour propagation du signal, ICAM => LFA-1 ; CD28 => B7 ; CD3 => molécule de classe II du CMH CTLA4 exprime après stimulation, bloque sortie des lymphocytes. On développe des molécules qui bloquent le CTLA4 , on garde une activité cytotoxique vis-à-vis de la cellule ( tumeurs, cancers ) Après l’activation des LT => LT effecteurs : - TH1 TH2 TH17 T régulateurs Polarisation dépend : 1) Environnement cytokines : - IL12 TH1 : activation des gènes liées facteur de transcription : gènes cibles de l’interféron gamma - IL4 TH2 - TGF beta ; Treg - TGF beta / IL6 : TH17 2) Facteurs de transcription - Stat4 , T-bet : TH1 - STAT6, GATA3 : TH2 - FOXOP3 : Treg RI doit durer le temps d’éliminer le pathogène mais pas continu sinon se transforme en maladie auto-immune, permet d’arrêter la RI - STAT3 , ROR : TH17 CD8 ( Tc) Lymphocyte T : exploration : Méthode de routine : cytométrie de flux : méthode qui permet d’identifier les cellules du sang, de par leur taille & leur structure = granulosités. On utilise ensuite les marqueurs étudiés précédemment par fluorescence. Numération des LT CD4+/CD8+ : immunofluorescence à l’aide d’Acm anti CD4 ou CD8 Même cellule 11 marqueurs à la fois, à la surface d’une cellule.