FT-ICR - Spectrométrie de masse

FT-ICR
1. Introduction
La spectrométrie de masse à transformée de Fourier (FT-ICR/MS) est un instrument de
très grande performance offrant une très haute précision de mesure de masse et un très haut
pouvoir résolutif.
1
,
2
,
3
D’un point de vue analytique, cet instrument est un outil puissant pour des
études très variées, il joue un rôle déterminant non seulement dans la Chimie et ses produits
naturels, mais aussi dans les Sciences de la vie ainsi que la pharmacie.
Le principe de la résonance cyclotronique a été développé par Lawrence et al. en 1930.
4
Lawrence a construit le premier accélérateur cyclotronique pour étudier les propriétés
fondamentales des atomes en recherche nucléaire. Dans cet instrument, la fréquence angulaire du
mouvement de rotation des particules chargées dans un champ magnétique est indépendante du
rayon et inversement proportionnelle au rapport masse sur charge (m/z) multiplié par la valeur du
champ magnétique. Quelques années plus tard, Penning a conçu le premier piège pour les
particules chargées en employant une combinaison d’un champ électrique statique et d’un champ
magnétique pour confiner des électrons.
5
En 1949, le principe de la résonance cyclotronique des
ions est incorporé, pour la première fois, dans un spectromètre de masse par Hipple et al..
6
,
7
Avec ce premier instrument ICR/MS, nommé Omegatron, les ions sont accélérés radialement à
leur fréquence cyclotronique et la détection d’ions se réalisait sur un collecteur fixe. A cause des
restrictions instrumentales dans les années 1950, cet appareil est très limité au niveau de la
résolution et la gamme de masse, ainsi que de son utilité analytique. Plus tard, Wobschall a
1
Marshall A.G., Hendrickson C.L., Jackson G.S.. Fourier transform ion cyclotron resonance mass spectrometry: a primer. Mass
Spectrom. Rev. 1998, 17, 1.
2
Amster I.J.. Fourier transform mass spectrometry. J. Mass Spectrom. 1996, 31, 1325.
3
Vartanian V.H., Anderson J.S., Laude D.A.. Advances in trapped ion cells for fourier transform ion cyclotron resonance mass
spectrometry. Mass Spectrom. Rev. 1995, 14, 1.
4
Lawrence E.O. and Edlefsen N.E.. On the production of high speed proton. Science. 1930, 72, 376.
5
Penning F.M.. Glow discharge at low pressure between coaxial cylinders in an axial magnetic field. Physica. 1936, 3, 873.
6
Hipple J.A., Sommer H., Thomas H.A.. A precise method of determining the faraday by magnetic resonance. Phys. Rev. 1949,
76, 1877
7
Sommer H., Thomas H.A., Hipple J.A.. The measurement of e/M by cyclotron resonance. Phys. Rev. 1951, 82, 697

collaboré avec la société Varian pour l’amélioration de l’ICR/MS.
8
Les développements,
apportés au nouvel instrument Syrotron, consistent en une cellule “drift”, qui a été divisée en
source d’ions, analyseur et régions de collection et une détection par oscillateur marginal. La
version commercialisée de cet instrument a été beaucoup utilisée pour l’étude des réactions ion-
molécule en phase gazeuse. La grande difficulté à cette époque résidait dans la mesure de tous
les rapports m/z des ions présents dans la cellule ICR.
L’introduction du piège ionique ICR
9
a ouvert un nouveau chapitre de l’évolution de
l’instrumentation ICR/MS. Les ions sont piégés par des électrodes de piégeage où des faibles
tensions sont appliquées. Le temps de piégeage étant 100 fois plus long que pour la cellule
“drift” (1-2 ms pour le piège ionique), la sensibilité, la gamme dynamique et la résolution ont été
largement améliorées. Sur cette base, en 1974, la spectrométrie de masse FT-ICR (résonance
cyclotronique des ions à transformée de Fourier) a été inventée par Comisarow et Marshall
10
grâce au progrès de l’informatique et en particulier des convertisseurs analogique/numérique
(ADC) permettant la digitalisation en temps réel du signal électrique induits par les ions en
mouvement dans la cellule ICR. Depuis, la spectrométrie de masse FT-ICR n’a cessé de se
développer
- en 1989, McLafferty et al.
11
ont couplé une source ESI au FT-ICR au travers d’une
injection d’ions quadripolaire et des domaines de pompages différentiels. Ce couplage
est très utile pour des systèmes non-volatiles, notamment les macromolécules. A partir
de cette combinaison, les modes d’ionisation externe11,
12
,
13
,
14
(ESI, MALDI, LD, auto-
ionisation, EI, CI, APCI, APPI etc.) ont remplacé les sources internes (EI, CI, PI, LD
etc.).1,
15
8
Wobschall D. Ion cyclotron resonance spectrometer. Rev. Sci. Instrum. 1965, 36, 466.
9
McIver R.T. Jr.. Trapped ion analyzer cell for ion cyclotron resonance spectroscopy. Rev. Sci. Instrum. 1970, 41, 555.
10
Comisarow M.B., Marshall A.G. Fourier transform ion cyclotron resonance spectroscopy. Chem. Phys. Lett. 1974, 25, 282.
11
Henry K.D., Williams E.R., Wang B.H., McLafferty F.W., Shabanowitz J., Hunt D.F. Fourier-transform mass spectrometry of
large molecules by electrospray ionization. Proc. Natl. Acad . Sci. USA. 1989, 86, 9075.
12
Castro J.A., Koster C., Wilkins C.. Matrix-assisted laser desorption/ionization of high-mass molecules by Fourier-transform
mass spectrometry. Rapid comm. mass spectrom. 1992, 6, 239.
13
Riegner D.E., Laude D.A., Jr.. Collision-mediated axial ejection of radially excited ions as a mass-dependent ion loss
mechanism in Fourier transform ion cyclotron resonance mass spectrometry. Int. J. Mass Spectrom. Ion Proc. 1992, 120, 103.
14
Brown S.C., Kruppa G., Dasseux J.L.. Metabolomics applications of FT-ICR mass spectrometry. Mass Spectrom. Rev. 2005,
24, 223.
15
Ghaderi S., Kulkarni P.S., Ledford E. B., Jr., Wilkins C.L., Gross M.L.. Chemical ionization in Fourier transform mass
spectrometry. Anal. Chem. 1981, 53, 428.

- l’évolution de l’électronique et de l’informatique a donné l’accès à différentes
méthodes de l’excitation1,2 (“Chirp”, “SWIFT ”, etc.), de la détection1,2 (“broad-band”,
“narrow-band”), et du traitement du signal Transformée de Fourier (“Zero-filling”,
16
“Apodisation”
17
).
- des nombreuses modifications de géométrie du piège ionique
18
ont été mises en œuvre
pour réduire au maximum l’influence des potentiels de piégeage des ions afin que les
fréquences mesurées soient les plus proche possible des fréquences cyclotronique
théoriques.
Les grands développements du FT-ICR ont commencé dans les années 1990 avec
l’introduction de champs magnétiques plus élevés,
19
de l’accumulation d’ions externe,
20
et d’un
quadripôle externe pour la sélection d’ions,
21
En même temps, les techniques de dissociation
comme la dissociation induite par collisions (CID,
22
SORI-CID
23
), par multiphoton infrarouge
(IRMPD),
24
,
25
par la capture d’électron (ECD)
26
et par détachement d’électron (EDD),
27
ont été
développées et appliquées à la caractérisation de substances macromoléculaires.
16
Comisarow M.B., Melka J.D. Error estimates for finite zero-filling in Fourier transform spectrometry. Anal. Chem. 1979, 51,
2198.
17
Aarstol M., Comisarow M.B.. Apodization of FT-ICR spectra. Int. J. Mass Spectrom. Ion Proc. 1987, 76, 287.
18
Guan S., Marshall A.G.. Ion traps for Fourier transform ion cyclotron resonance mass spectrometry: principles and design of
geometric and electric configurations. Int. J. Mass Spectrom. Ion Proc. 1995, 146/147, 261.
19
Marshall A.G., Guan S.H.. Advantages of high magnetic field for fourier transform ion cyclotron resonance mass spectrometry.
Rapid Commun. Mass Spectrom. 1996, 10, 1819.
20
Senko M.W., Hendrickson C.L., Emmett M.R., Shi S.D.H., Marshall A.G.. External accumulation of ions for enhanced
electrospray ionization fourier transform ion cyclotron resonance mass spectrometry. J. Am. Soc. Mass Spectrom. 1997, 8, 970.
21
Belov M.E., Nikolaev E.N., Anderson G.A., Auberry K.J., Harkewicz R., Smith R.D.. Electrospray ionization-Fourier
transform ion cyclotron mass spectrometry using ion preselection and external accumulation for ultrahigh sensitivity. J. Am. Soc.
Mass Spectrom. 2001, 12, 38.
22
Senko M.W., Speir J.P., Mclafferty F.W.. Collisional activation of large multiply-charged ions using Fourier-transform mass-
spectrometry. Anal. Chem. 1994, 66, 2801.
23
Kellersberger K.A., Yu E., Kruppa G.H., Young M.M., Fabris D.. Top-Down characterization of nucleic acids modified by
structural probes using high-resolution tandem mass spectrometry and automated data interpretation. Anal. Chem. 2004, 76,
2438.
24
Little D.P., Speir J.P., Senko M.W., O’Connor P.B., McLafferty F.W.. Infrared multiphoton dissociation of large multiply
charged ions for biomolecules sequencing. Anal. Chem. 1994, 66, 2809.
25
Little D.P., Aaserud D.J., Valaskovic G.A., McLafferty F.W.. Sequence information from 42–108-mer DNAs (complete for a
50 mer) by tandem mass spectrometry. J. Am. Chem. Soc. 1996, 118, 9352.
26
Cooper H.J., Hakansson K., Marshall A.G.. The role of electron capture dissociation in biomolecular analysis. Mass Spectrom.
Rev. 2005, 24, 201.
27
Yang J., Hakansson K.. Fragmentation of oligoribonucleotides from gas-phase ion-electron reactions. J. Am. Soc. Mass
Spectrom. 2006, 17, 1369.

Aujourd’hui, la spectrométrie de masse FT-ICR est devenu un instrument mûrement
développé, et largement utilisé dans les différents domaines de recherche grâce à ses nombreux
avantages :
- haut pouvoir résolutif (105 à 106 FWHM).
- haute précision de mesure de masse (de l’ordre du sub-ppm).
- grande sensibilité et haute gamme dynamique.
- une flexibilité suffisante permettant la combinaison avec différentes sources d’ions
externes11,12,13,14 (auto-ionisation, EI, CI, LD, MALDI, ESI, APCI, APPI etc.).
- l’accès aux différents modes d’activation avec les plus récents, dont certains sont des
techniques propres aux technique de piégeage tout comme le SORI-CID,23
l’IRMPD,24 l’ECD26 et l’EDD.27
2. Principe de base
2.1 Mouvement cyclotronique des ions dans la cellule ICR
Le principe de la cellule ICR est basé sur le piégeage des ions par un champ magnétique.
Un ion de vitesse dans un champ magnétique uniforme
B
subit une force de Lorentz
F
(Équation 1) qui induit un mouvement circulaire de l’ion, perpendiculaire à la direction du
champ magnétique (Figure 77).
Figure 7. Mouvement cyclotronique des ions positifs et
négatifs dans un champ magnétique (modifié à partir de
+-
B
zev x B
vv
zev x B
x
y
z
r
+-
B
zev x Bzev x B
vv
zev x Bzev x B
x
y
z
x
y
z
r

schéma publié par Marshall28).
BzeF
Équation 1
z : nombre de charge
e = 1,6.10-19 C
Lors qu’un ion exécute un mouvement uniforme avec un rayon r de la trajectoire
circulaire, la force de Lorentz (Flor) est en équilibre avec la force centripète (Fcen),
avec
BzeFlor
,
r
m
Fcen
2
→
Bze
r
m
2
or
c
r 2
et
c
r
2
: vitesse des ions (m),
r
: rayon du mouvement cyclotronique (m)
: vitesse angulaire (rad/s);
c
: fréquence cyclotronique (Hz)
donc
Ce mouvement de rotation est appelé mouvement cyclotronique
c
et sa fréquence ne dépend
que du champ magnétique et du rapport masse sur charge, mais est indépendante de la vitesse
initiale. A partir de cette équation (Équation 2), la mesure de la fréquence cyclotronique permet
une détermination du rapport m/z d’ions dans la cellule ICR. Il faut noter que cette fréquence est
inversement proportionnelle au rapport m/z ; un ion de haut rapport m/z aura donc une fréquence
cyclotronique
c
faible.
28
Marshall A.G., Grosshans P.B.. Fourier transform ion cyclotron resonance mass spectrometry: The teenage years. Anal. Chem.
1991, 63, 215A.
zm B m
zeB
c/10535611.1
22
7
Équation 2