Vers l`utilisation des Immunoglobulines A humaines ou de leurs

Vers l’utilisation des Immunoglobulines A
humaines ou de leurs variants à des fins
thérapeutiques
UNIVERSITE DE LIMOGES
École Doctorale Thématique 524 : Biologie, Santé, "Bio-santé"
Faculté des Sciences et Techniques
Laboratoire
CNRS UMR 6101
« Physiologie moléculaire de la réponse immune et des lymphoproliférations »
Thèse N°
THESE
pour obtenir le grade de
DOCTEUR DE L’UNIVERSITE DE LIMOGES
Discipline : Sciences de la Vie et de la Santé
Spécialité : Immunologie
présentée et soutenue publiquement par
Virginie Pascal
le 03 Décembre 2009
Thèse dirigée par Pr. Michel Cogné et Dr. Arnaud Debin
JURY
Président : Jean Feuillard, Professeur-Praticien Hospitalier (CNRS UMR6101, Limoges)
Rapporteurs : Renato Monteiro, Directeur de Recherche (INSERM U699, Paris)
Pierre Aucouturier, Professeur-Praticien Hospitalier (INSERM UMRS712, Paris)
Examinateur : Hervé Watier, Professeur-Praticien Hospitalier (CNRS UMR6239, Tours)
Invité : Gérard Tiraby, Docteur - PDG fondateur de Cayla-Invivogen (Toulouse)

Résumé
Parmi le nouvel ordre de médicaments représenté par les anticorps monoclonaux, la classe des
immunoglobulines G occupe une place écrasante mais commence à révéler quelques
limitations. Afin d’essayer de dépasser d’une façon originale ces limites, il nous est apparu
judicieux de nous consacrer à une classe d’anticorps jusqu’ici peu étudiée sous l’angle
d’applications thérapeutiques éventuelles : les IgA. Cette classe présente en effet des
caractéristiques différentes et ainsi potentiellement complémentaires de celles des IgG. L’IgA
est l’immunoglobuline la plus abondamment synthétisée dans l’organisme. Elle présente de
plus un tropisme préférentiel pour les muqueuses, qui en fait un « candidat médicament »
particulièrement intéressant pour cibler les nombreuses tumeurs à localisation muqueuse. Un
autre argument plaidant pour le développement d’anticorps IgA thérapeutiques réside dans la
récente mise en évidence du potentiel anti-tumoral des neutrophiles via une cytotoxicité
médiée par le récepteur des IgA (FcαRI / CD89). Le travail présenté dans ce manuscrit
concerne principalement l’évaluation in vitro et en « phase 0 » (à l’aide de modèles animaux)
d’anticorps monoclonaux de classe IgA spécifiques de l’antigène CD20 (exprimé par la
majorité des lymphomes B humains). Dans ce cadre, nous avons aussi étudié la fonction de
divers glycanes portés par la chaîne lourde de l’IgA afin d’évaluer la possibilité de leur
élimination au sein d’IgA variantes, dont la production et la caractérisation pourrait être
facilitées. Ce travail identifie ainsi des modifications de la glycosylation potentiellement
responsables de la formation de dépôts rénaux en cas d’administration in vivo. Il identifie
aussi des variants hypoglycosylés des IgA gardant une innocuité apparente in vivo et dont les
propriétés fonctionnelles sont intactes.

Abréviations
[-/-] : Homozygote négatif
[-/+] : Hétérozygote
[+/+] : Homozygote positif
Ac : Anticorps
Ac-bs : Anticorps bi-spécifique
AcM : Anticorps monoclonal
ACE : Antigène carcino-embryonanire
ADN : Acide désoxyribonucléique
ADCC: Cytotoxicité cellulaire dépendante de l’Ac (Antibody dependant cellular cytotoxicity)
Ag : Antigène
AHAC : Anticorps humains anti-chimériques (anti-human-chimeric antibodies)
APRIL : A proliferation-inducing ligand
ARN : Acide ribonucléique
ARNm : Acide ribonucléique messager
BAFF : B-cell activating factor
BCR : Récepteur des cellules B
C : Région constante
CDC : Cytotoxicité dépendante du complément (Complement dependant cytotoxicity)
CDR : Régions déterminant la complémentarité de l’Ig (Complementary determining region)
CH : Région constante de chaîne lourde
ch.H : chaîne lourde
ch.L : chaîne légère
CL : Région constante de chaîne légère
CMH : Complexe majeur d’histocompatibilité
CRP: Protéines régulatrices du complément (complement-regulatory protein)
CSR : Commutation isotypique (class switch recombination)
D : Région de diversité
Da : Dalton
EBV : Virus d’Epstein-Barr (Epstein-Barr Virus)
G-CSF : granulocyte colony-stimulating factor
GM-CSF : Granulocyte Macrophage Colony Stimulating Factor
Fab : Domaine de liaison à l’antigène de l’Ig = VL/CL+VH/CH1 (fragment antigen binding)
Fc : Domaine effecteur d’une immunoglobuline
FcγR : Récepteur de fragment constant de l’IgG
FcRn : Récepteur néonatal de la partie Fc de l’IgG (neonatal Fc receptor)
Fv : fragments variable d’anticorps = VL+VH
FDA : Food and drug administration
H : Région constante de chaîne lourde
Hama : Anticorps humains anti-anticorps de souris (human antimouse antibody)
Ig : Immunoglobulines
IgAd : IgA dimérique
IgAm : IgA monomérique
IgAp : IgA polymérique
IgAs : IgA sécrétoire
IgH : Locus de chaîne lourde d’immunoglobulines
IL : Interleukine

J : Région de jonction
L : Région constante de chaîne légère
NK : natural killer
NHL : Lymphomes non-hodgkinien (non-Hodgkin's lymphoma)
pIgR : récepteurs d’immunoglobulines polymériques (polymeric Ig receptor)
sdAb : Anticorps à domaine unique (single domain antibody)
scFv : Fv simple chaîne (single chain Fv)
SDR : Résidus déterminants spécifiques de l’Ig (specificity determining residues)
SHM : Hypermutation somatique (somatic hypermutation)
TAA : Antigènes associés aux tumeurs (tumor-associated antigen)
TNF : Tumor necrosis factor
TLR : Récepteur de type Toll (Toll-like receptors)
V : Région variable
VH : Région variable de chaîne lourde
VIH : virus de l'immunodéficience humaine
VL : Région variable de chaîne légère