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A 42°C, il y a 0 colonies, on a une lyse complète car CI est nécessaire au maintient de la lysogénie.
On ne voit pas de plages de lyse car tout est lysé.
Ligne 8 : il n’y a pas de dilution. On a 5 colonies issues d’apparition de mutants spontanés car on a pas induit de lyse dans ces
bactéries.
Ligne 9 : 150x10x10-7 = 1,5x1010 phages/ml
Au début, on avait 6x107 bactéries/ml, on devrait donc avoir 6x109 bactéries/ml. Il y a un facteur 2 entre 6x109 et
1,5x1010 donc les bactéries ont pu faire 1 division avant de faire un cycle de lyse.
Problème 6
1. Il n’y a pas de coopération entre OR1 et OR2 donc CI bloque OR2 et OR3
Prm est réprimé et Pr est non réprimé
il y
a donc synthèse de Cro donc la concentration de Cro augmente.
Après une coinfection, le Cro synthétisé par le phage I va se fixé sur OR3 du phage
WT.
Le phage I est donc dominant.
2. Il n’y a aucune action de Prm, donc il n’y a pas de CI. Le phage est dominant.
3. OR3 est important car si la protéine est produite par une seule bactérie (CI)
la
bactérie va mourir, il va y avoir lyse donc une plage claire, la bactérie va apparaître
comme un mutant de la lysogénie.
Si le génome qui s’intègre est celui du mutant, la bactérie meurt.
Si le génome qui s’intègre est celui du sauvage, on va avoir une plage trouble correspondant à la bactérie ne
contenant que des prophages WT. Donc le mutant est cis-dominant.
4. Le mutant PRE ne fabrique plus de Cro, c’est un mutant de la lysogénie.
On fait une co-infection :
Si le génome mutant s’intègre, il n’y a pas de problème car la 1ere molécule de CI est déjà synthétisé par WT,
on a plus besoin de PRE.
Si le génome sauvage s’intègre, il n’y a pas de problème non plus.
Le génome mutant a besoin du WT pour que ca marche donc le mutant est récessif.
5. CII ne peut pas activé Cint, donc il n’y a pas d’intégrase. Le génome ne peut pas s’intégré. C’est un mutant de la
lysogénie.
On fait une co-infection :L’intégrase est fabriqué par WT, donc le génome Wt ou du mutant va s’intégrer. Le génome est
donc récessif.
Problème 7
a. On a besoin de Pr pour faire Cro donc c’est un mutant de la lyse. On peut se dire que 100% de bactéries sont lysogène
mais on a besoin de Pr pour faire CII donc non. C’est un mutant impossible à isoler.
b. Il n’y a pas de 1ères molécules de CI synthétisées. Seul, il donne des plages claires donc c’est un mutant de la lysogénie. A
température restrictive, on fait une coinfection :
Si le mutant s’intègre, CI ne fonctionnera pas
Si le WT s’intègre, CI fonctionne
Le mutant est cis-dominant car les bactéries lysogènes ne contiennent que des prophages WT.
c. C’est un mutant de la lysogénie cis-dominant.
d. Il n’y a pas de N et CIII donc il n’y a plus de lyse ni de lysogénie car il n’y a pas de Q (anti-terminateur tardif). Le mutant
est impossible a isoler.
Problème 8
Pour tous les mutants on fait :
1. Une co-infection à haute MOI avec les mutants.
2. Centrifugation pour récupérer les bactéries infectées.
3. Attendre la lyse
4. Dilution + bactérie indicatrice puis étalement.
On utilise les mutants CI et CIII