Le support du programme génétique – Des manipulations pour

Le support du programme génétique – Des manipulations pour comprendre
Qu'est-ce que l'ADN ?
Objectifs :
- effectuer des gestes techniques en vue de réaliser une observation microscopique de cellules végétales montrant
des chromosomes, -
concevoir et réaliser un protocole expérimental d'extraction et de coloration de l'ADN de cellules végétales, -
mettre en relation les informations obtenues lors de ces manipulations pour répondre à la question : qu'est-ce que
l'ADN.
PARTIE 1 : COLORATION ET OBSERVATION DU NOYAU de cellules végétales
Matériel : un bulbe d'oignon, scalpel, pinces fines, deux verres de montre, du colorant : le vert de méthyle.
Protocole :
1. Découper un morceau de feuille composant le bulbe d'oignon.
2. Prélever avec les pinces fines un fragment d'épiderme d'oignon.
3. Déposer le fragment obtenu dans le verre de montre avec une goutte de vert de méthyle.
4. Monter l'échantillon dans une goutte d'eau entre lame et lamelle.*
5. Observer votre préparation au microscope.
6. Dans le cadre ci-dessous, réaliser un croquis (donc une représentation simplifiée) de cellules de l'épiderme
d'oignon en montrant où le colorant se fixe.
PARTIE 2 : CONCEVOIR UN PROTOCOLE EXPERIMENTAL D'EXTRACTION DE L'ADN végétal
- A partir des informations concernant le principe d'utilisation du matériel, rédiger les étapes d'un protocole à suivre
en vue d'une extraction d'ADN d'oignon. - Réaliser
ensuite l'expérience.
Etapes nécessaires à l'extraction de l'ADN
Séparer les cellules et casser les membranes pour libérer l'ADN.
Protéger l'ADN de la destruction. Séparer l'ADN des autres constituants de la cellule.
Faire précipiter l'ADN afin de pouvoir l'observer.
Confirmer la présence d'ADN par une coloration spécifique.
Quelques principes d'utilisation du matériel. Le
papier filtre retient les plus gros composants cellulaires et laise passer l'ADN. Le vert de
méthyle est un colorant spécifique de l'ADN. Le liquide
vaisselle et le sel permettent de casser les membranes. Le froid limite
les réactions détruisant l'ADN une fois sorti du noyau. L'alcool permet de
déshydrater les molécules d'ADN qui s'agglutinent et deviennent alors visibles. L'agglutination se produit à
l'interface entre les deux liquides (présents en quantité égale et non mélangés).
PARTIE 3 : MISE EN RELATION des informations fournies par les manipulations précédentes