Abstract

LE TLR2 EST IMPLIQUE DANS L’ACTIVATION DES FIBROBLASTES PAR
LES ANTICORPS ANTIPHOSPHOLIPIDES
Nathalie Satta, Sylvie Dunoyer-Geindre, Guido Reber, Richard Fish, Françoise Boehlen,
Egbert Kruithof, Philippe de Moerloose. Division d’Angiologie et d’Hémostase,
Hôpitaux Universitaires de Genève, Suisse
Les mécanismes par lesquels les anticorps antiphospholipides (aPL) induisent des
complications thrombotiques et/ou des pertes foetales sont mal connus. Il a été démontré
que les aPL sont capables d’activer différents types de cellules (cellules endothéliales,
monocytes et plaquettes) et qu’ils induisent une translocation nucléaire de NF-B ainsi
qu’une activation de MAP-kinase p38. Les médiateurs de signalisation MyD88 et
TRAF6 sont nécessaires à cette activation. Or MyD88 et TRAF6 sont aussi les
médiateurs impliqués dans la signalisation intracellulaire des récepteurs Toll-like (TLR).
Le but de notre travail a été d’investiguer si un ou plusieurs membres de la famille des
TLRs interviennent dans la réponse inflammatoire induite par les aPL.
Comme modèle cellulaire dépourvu d’un TLR donné, nous avons utilisé des fibroblastes
embryonnaires (FE) de souris déficientes en TLR1, TLR2, TLR4 ou TLR6. L’activation
des FE a été évaluée par la mesure des variations d’expression de trois protéines
représentant différents aspects de la réponse inflammatoire, MCP-1, ICAM-1 et IL-6.
Des IgG ont été isolées du plasma de 5 patients avec syndrome antiphospholipide (IgG
aPL). De plus des IgG anti-ß2-glycoprotéine 1 ont été immunopurifiées à partir du
plasma d’un sixième patient. Les IgG contrôles proviennent d’un pool de plasmas de
donneurs sains, négatifs en aPL ainsi que de 4 patients avec maladies auto-immunes,
mais sans aPL. Les FE contrôles et les FE déficients en TLR1, TLR2, TLR4 ou TLR6
sont incubés avec les IgG aPL, les IgG anti-ß2-glycoprotéine 1 ou les IgG contrôles
pendant 8h.
Les IgG aPL et anti-ß2-glycoprotéine 1 (mais pas les IgG contrôles) induisent une
augmentation significative des taux de mRNA de MCP-1, ICAM-1 et IL-6, ainsi qu’une
augmentation de la sécrétion d’IL-6 par les fibroblastes contrôles. Les FE déficients en
TLR1 et TLR6 présentent une réponse diminuée par rapport aux FE contrôles alors que
les FE TLR4-déficients répondent de façon comparable aux FE contrôles. Aucune
augmentation des mRNA des marqueurs protéiques ou de sécrétion d’IL-6 n’est
observée après stimulation des FE TLR2-déficients par les IgG aPL et anti-ß2-
glycoprotéine 1. Afin de vérifier le rôle du TLR2 dans l’activation des cellules par les
aPL, nous avons surexprimé le TLR2 humain dans les FE TLR2-déficients à l’aide d’un
vecteur lentiviral. La surexpression du TLR2 humain dans les FE TLR2-déficients
restitue la réponse aux IgG de patients.
Nos résultats montrent que le TLR2 joue un rôle primordial dans l’activation des
fibroblastes murins par les aPL.