5) réaliser l’extraction de votre ADN à partir cellules buccales et expliquer le rôle des
différents liquides utilisés.
Protocole n°1
La première étape consiste à préparer le tampon permettant de libérer l’ADN des cellules. Pour cela,
mélanger dans le bécher au moyen de l’agitateur les quantités suivantes :
Une quelques gouttes de shampooing
Une cuillère à café d'hydrogénocarbonate de sodium
Un quart de cuillère à café de sel
120 mL d’eau froide
Ces ingrédients seront mélangés en évitant de produire de la mousse. La solution obtenue est ensuite
refroidie. Il faut récupérer les cellules qui contiennent l’ADN à extraire. Vous allez utiliser des cellules de
la paroi intérieure des joues : pour cela, il faut les décrocher au moyen d’un léger massage des joues contre
le côté des dents pendant au moins deux minutes. Cracher ensuite la salive dans le tube, en notant le niveau
de salive au moyen d’un feutre (le niveau doit atteindre environ un centimètre).
Puis rajouter dans le tube, le tampon d’extraction, en en versant l’équivalent de deux fois le volume de
salive. Boucher le tube et agiter vigoureusement durant deux minutes. Noter le nouveau niveau atteint.
Ajouter ensuite le même volume d’éthanol refroidi que celui du mélange salive-tampon (niveau noté
précédemment), en prenant soin de ne plus agiter et de verser doucement, en inclinant le tube, de façon à ce
que les deux phases se mélangent le moins possible. Laisser reposer quelques instants : entre les deux phases
va apparaître un agrégat blanchâtre. Il s’agit d’une "méduse d’ADN".
Protocole2 :
Prendre un petit morceau d’oignon pour le broyer le plus possible à l’aide d’un pilon et d’un mortier.
Ajouter 2 grammes de sel pour pouvoir extraire et continuer à broyer manuellement jusqu’à l’obtention
d’une purée.
Ajouter de l'eau et du liquide vaisselle.
Une fois le tout mélangé, obtenir un liquide visqueux et récupérer que le liquide dans une éprouvette.
Ajouter 3 fois plus d'alcool (éthanol à 90%) froid que de volume de filtrat.