2016-PRO51-NOR-ME 2/12
Les lots 45 et 60 semblent poser des problèmes. Selon la procédure interne, une recherche de
Staphylococcus aureus est immédiatement réalisée, selon la norme NF EN ISO 22718 (2009-09).
2 - Proposer les origines possibles de la contamination au cours des différentes étapes de fabrication.
3 - Préciser le danger dû à la présence de Staphylococcus aureus lors de l’utilisation de la crème de jour.
Les documents 2 et 3 présentent la démarche d’analyses de la méthode de référence NF EN ISO 22718
(2009-09) et la composition des milieux de culture utilisés.
4 - En s’aidant de ces documents, indiquer pourquoi cette méthode nécessite un enrichissement en
bouillon.
5 - Décrire le principe du milieu de Baird- Parker.
Sur les boites de Petri provenant des lots 45 et 60, une colonie suspecte sur chacun des lots est détectée.
Une étape d’identification est donc réalisée.
6 - Pour l’identification, la norme recommande d’utiliser le test de la coagulase. Expliquer les résultats
obtenus dans les tubes des échantillons n°45 et n°60, présentés dans le document 4 et conclure.
Des laboratoires de cosmétologie utilisent une technique alternative pour la recherche de Staphylococcus
aureus : La cytométrie de flux présentée dans le document 5.
La cytométrie de flux (CMF) est une technique permettant de faire défiler des particules, molécules ou
cellules (ex Staphylococcus aureus) à grande vitesse dans le faisceau d'un laser, en les comptant et en les
caractérisant. C'est la lumière réémise (par diffusion ou fluorescence) qui permet de classer la population
suivant plusieurs critères. Les staphylocoques sont marqués par un fluorochrome.
7 - Définir un fluorochrome.
8 - A l’aide des documents 2 et 5, construire le tableau de comparaison des 2 méthodes (au moins 3
critères attendus).
9 - L’entreprise décide d’investir dans un cytométre de flux, justifier ce choix.
III - DOSAGE DES PARABÈNES PAR CHROMATOGRAPHIE (7 points)
Dans la crème de jour, des parabènes sont ajoutés en tant que conservateurs, après l’étape de
refroidissement.
1 - Rappeler le rôle des conservateurs dans les produits cosmétiques.
2 - Expliquer pourquoi il est nécessaire de contrôler la teneur en parabène du lot n°60 au regard de la
contamination mise en évidence précédemment.
Le laboratoire réalise l’analyse des parabènes par HPLC. Le protocole est résumé dans le document 6.
3 - Citer 3 étapes techniques de séparation employées dans la préparation de l’échantillon de la crème de
jour.
4 - Décrire le principe de la chromatographie utilisée ici pour la recherche des parabènes.
5 - Légender l’annexe B (à rendre avec la copie).