Justine Nabineau Paul tonneau BTSA ANABIOTEC Session examen 2014 Corentin Dupas Cathie Bellion EPREUVE E7-2 M58 Analyse organoleptique et chimique du miel en fonction de son vieillissement, de son origine et de sa conservation. Epreuve E7-2 du M58 – Analyse organoleptique et chimique du miel en fonction de son vieillissement, de son origine et de sa conservation. 1/11 Introduction En raison du coût du miel et de sa progressive raréfaction, il est légitime d'en effectuer des analyses afin de détecter d'éventuelles fraudes pouvant être commises (ajout d'eau, de sucre ou d'un quelconque additif, labellisation injustifiée, contrefaçon, etc). De plus, le public étant aujourd'hui de plus en plus demandeur de qualité, et soucieux de sa santé, les professionnels apicoles veulent s'attirer la confiance des consommateurs en prouvant que leur produit correspond aux critères d'exigence. Des producteurs ont fait appel à nos services afin de leur fournir des résultats traitant du lien entre chauffage et concentration en hydroxy-méthyl-fulfural (HMF) de leur miel, qui sera comparé à d'autres issus de la grande distribution, ceci étant couplé à une analyse organoleptique d'un miel ayant subi un chauffage. Ce projet a un intérêt particulier pour notre établissement, du à la mise en place d'un rucher école. Les analyses effectuées pourront nous renseigner sur le chauffage optimal à adopter qui jouera le moins sur la qualité du miel, lors de son conditionnement et de la mise en pots du miel, ainsi que sur la température de stockage. Nous allons donc effectuer, deux analyses : la détermination de la concentration d'HMF contenu dans les miels, par une méthode colorimétrique, puis une analyse sensorielle qui complétera l'étude, pour voir l'influence du chauffage sur l'appréciation du goût par le consommateur. Après avoir présenté les recherches bibliographiques, on sera en mesure de proposer une démarche de mise en œuvre du projet répondant à la problématique : Quel est le lien entre le chauffage et le taux d'HMF, et sa conséquence au niveau organoleptique ? Enfin on pourra délivrer des résultats et des réponses ainsi que des propositions d'amélioration. I - Généralités 1 - Les abeilles : Les abeilles sont des insectes producteurs de miel. Il en existe près de 950 espèces. La seule vivant en colonie étant l’Apis Melifera. Dans les ruche, on dénombre environ 50 000 abeilles dont une reine. Le rôle de la reine est de pondre des œufs du printemps à l'automne. Sa durée de vie est 4 à 5 ans. Les autres abeilles, appelées « les ouvrières » ont une durée de vie plus courte qui est de quelques semaines. Dès leurs naissances et tout au long de leur vie, les ouvrières effectuent diverses tâches en fonction de leur âge (nettoyeuses, nourrices, ventileuses, bâtisseuses). La colonie a une zone de butinage qui s'étend à 3 Km de la ruche, ce qui correspond à 2 826 Ha. Une colonie saine sera mieux protégée contre toutes les attaques d'animaux et de maladies. La santé de l'abeille est une chose très complexe. On parle souvent de l'action dévastatrice des pesticides, ce qui est vrai, mais la réduction de la biodiversité est un facteur tout aussi important. Ainsi les importations massives de races lointaines ont rendu nos abeilles très fragiles. Depuis une trentaine d’années, les populations d’abeilles diminuent en France. Ce déclin pourrait à terme engendrer de lourdes conséquences environnementales et économiques. 2 - Le miel : Le miel est une substance sirupeuse et sucrée, plus ou moins épaisse, allant du jaune au marron selon son origine. Il est le produit du nectar des fleurs et du miellat (sécrété par les pucerons), récolté par les abeilles et transformé par les enzymes de leur estomac en glucose et en fructose. Le miel est avant tout la nourriture destinée aux abeilles. La riche teneur du miel en glucose lui permet de passer très rapidement dans le système circulatoire. Les différents types de miels sont définis par leurs caractéristiques sensorielles : la couleur, l’arôme, la saveur, la viscosité et la tendance plus ou moins marquée à cristalliser au cours du processus de conditionnement et de l'entreposage. La cristallisation du miel est signe d'un produit de haute qualité. Les apiculteurs effectuent un chauffage du miel lors de la mise en pots pour faciliter le coulage. Epreuve E7-2 du M58 – Analyse organoleptique et chimique du miel en fonction de son vieillissement, de son origine et de sa conservation. 2/11 Comme tout produit de consommation, il représente aujourd'hui un marché mondial qui risque cependant de connaître une phase de régression. En effet, entre 2004 et 2010, la production nationale de miel a diminuée de 28 %. La France a importé sur la même période 25 500 t de miel (hausse de 49 %) et a exporté 4 000 t. 3 - Composition du miel : Tout comme sa fabrication, la composition du miel est assez complexe. Elle varie en fonction de son lieu de production, de son origine florale, et de son conditionnement. En général les principaux éléments de sa composition sont l'eau, les glucides 80 %, les protides moins de 1 %, des acides organiques en moyenne 0,3 % et des sels minéraux 0,2 %. Certains composants sont présents en infime quantitée comme les vitamines, les enzymes (l’invertase, l’amylase et la gluco-oxydase), des antibiotiques naturels ainsi que des substances aromatiques. L'appréciation de la qualité du miel par le consommateur se fait principalement par dégustation. Cependant pour appliquer une réglementation sur le produit, un moyen de contrôle quantitatif doit être utilisé. Le principal critère mesurable de la qualité du miel est la concentration en hydroxyméthylfurfural (HMF). Cet important facteur relatif à la qualité du miel est un indicateur pour la fraîcheur et le surchauffage. Le miel brut ne contient pratiquement pas d'HMF. Cependant sa teneur augmente au cours du stockage en fonction de la température. Il provient d'une dégradation lente du fructose, lequel en milieu acide se décompose et perd trois molécules d'eau, ce qui est probablement un processus auto catalytique. Le taux de HMF peut fournir toutes les informations nécessaires concernant l'exposition à la chaleur de n'importe quel miel. C'est un révélateur de dégradation du produit. Pour la santé, l'ingestion d'un miel à concentration élevée de HMF (40 ou 80 mg/kg) ne présente pas de risques. Par contre, un miel qui possède une concentration d'HMF aussi élevée est un miel dénaturé. A l'état frais, le miel contient plusieurs composés aromatiques qui lui donnent un goût typique, étant donné que ses composés sont très volatiles, un miel soumis à un mauvais traitement subira une altération du goût. Décret n°2003-587 du 30 juin 2003 pris pour l'application de l'article L. 214-1 du code de la consommation en ce qui concerne le miel. Epreuve E7-2 du M58 – Analyse organoleptique et chimique du miel en fonction de son vieillissement, de son origine et de sa conservation. 3/11 II - Présentation du contexte du projet : 1 - Contacts avec les partenaires : Partenaires/ contacts : Coordonnées : M. Gilles PIEDEBOUT Date entrevue : Objectifs : Conclusion : Gilles.piedebout@e 20 ducagri.fr novembre 2013 Informations sur le projet et miels Cibler le projet M. Max MORE 09140 Seix 05 61 66 95 05 Obtenir des miel et peut-être un rendezvous Accord pour 2 miels M. J.P MAHA & Mme R. RUCK 85420 Maillezais 0251872125 Obtenir des miels 2 miels analyse sensorielle (1 Kg) M. Jacques EYMERY jacques_eymery@y Décembre ahoo.fr 2013 Formateur apiculteur 02 51 51 73 85 Obtenir des infos sur les abeilles, conception du miel, demander une participation pour réaliser nos analyses Accord pour fournir 4 miels différents issu de l'apiculture BIO Janvier 2014 2 - Budget : Pour la mise en place de notre projet, nous avons établi un budget prenant en compte nos différents besoins et contraintes. Tableau récapitulatif du budget prévisionnel global : BUDGET Dépenses Recettes produits chimiques 58 € matériel usage unique 37 € consommables analyse Sensorielle 39 € 4 miels exploitant Total TTC des dépenses 20,00 € 155 € Financement lycée 135 € Participation exploitant 20,00 € 155 € Total TTC des recettes 3 - Choix de la méthode de quantification : Après de nombreuses recherches nous avons trouvé plusieurs analyses pour le contrôle qualité du miel comme l'humidité, la teneur en eau, la teneur en glycérol, le dosage de l'invertase, la recherche d'antibiotiques ou la teneur en HMF. Après discutions avec certains partenaires nous avons opté pour l'analyse du HMF. Cette analyse peut se faire par HPLC combinée à un détecteur UV qui est la méthode de référence. Mais pour des raisons économiques et pratiques, notre choix s'est porté sur la méthode d'analyse par spectrophotométrie d'absorption moléculaire qui suit une réaction à l'aide de réactif à la paratoluidine. L'HMF change la couleur du miel (bruni le miel) ainsi que son goût (il le rend acide). Par chauffage la texture du miel est aussi modifiée (elle passe de granuleuse à liquide), ce qui justifie les questions posées dans le questionnaire de l'analyse sensorielle. Epreuve E7-2 du M58 – Analyse organoleptique et chimique du miel en fonction de son vieillissement, de son origine et de sa conservation. 4/11 III - Hydroxy-méthyl-furfural ou HMF : Autre nom : 5-Hydroxy Méthyl-2-Furfural Formule : C6H603 Type de substance : dérivé du fructose et du glucose. Le HMF est un composé organique proche du furfural. Comme lui, c'est un produit secondaire de la dégradation des sucres. Il provient en particulier de la déshydratation du fructose. La molécule d'HMF est constituée d'un cycle de furane porteur d'une fonction aldéhyde et d'une fonction alcool. Comme de nombreux composés il est responsable de goûts et de couleurs dans l'alimentation. Il se retrouve notamment dans les confitures, le caramel et le miel chauffés, ayant subi un mauvais ou long stockage. Ce n'est pas un produit toxique, aux concentrations standardisées. Le HMF est notamment utilisé comme indicateur pour évaluer la qualité du miel. Un miel fraîchement extrait ne contient pas ou peu de HMF (max. 3 mg HMF/kg de miel). Un miel de l'année a généralement un taux de HMF qui ne dépasse pas 10 mg/kg. La majorité des miels rencontrés dans le commerce international ont un taux de HMF ne dépassant pas 30 mg/kg. Étant donné le climat tempéré en Europe, l'Union Européenne a fixé la limite à 40 mg/kg hormis pour les miels destinés à l'industrie. Si des taux supérieurs sont trouvés, on peut suspecter que le miel a été surchauffé à un moment donné au cours du conditionnement. Les principaux facteurs qui induisent la formation de HMF : • la température est le principal facteur. Un miel chauffé ou stocké à trop haute température conduit à la formation rapide et importante de HMF. • l'acidité du miel : le HMF se forme plus vite dans un miel acide (miel de fleurs) que dans un miel plus basique (miel de miellat, miel de châtaignier...). • la teneur en eau : beaucoup d'eau dans le miel accélère la formation de HMF. Dans le tableau suivant, vous trouverez le temps nécessaire pour obtenir 40 mg HMF/kg de miel selon la température du miel [selon White et al. (1964), Hadorn et al. (1962), Sancho et al. (1992)], ce qui correspond à la limite proposée par l'Union Européenne. Un miel conservé à température ambiante atteint la limite européenne après 2 à 4 ans. Si lors d'une étape du conditionnement, l'apiculteur est amené à chauffer le miel (notamment parce qu'il a cristallisé) et qu'il emploie pour ce faire un matériel non adapté, le miel peut facilement chauffer jusqu'à 60 à 70 °C. Il suffit alors de quelques heures pour que le miel atteigne la limite recommandée. 1 - Objectif : L'évaluation de la quantité d'hydroxy-methyl-furfural (H.M.F.) dans le miel. 2 - Principe : Mesure à une longueur d'onde déterminée de la coloration rouge due à l'action de H.M.F. Sur l'acide barbiturique et la paratoluidine. Protocole du dosage des HMF dans le miel : température temps 3h 100°C 2minutes quantité mode de chauffage 2g normal 100g étuve 100g BM 100g Micro-onde Epreuve E7-2 du M58 – Analyse organoleptique et chimique du miel en fonction de son vieillissement, de son origine et de sa conservation. 5/11 Réactif à la paratoluidine : dans une fiole jaugée de 100 mL, dissoudre 10 gramme de paratoluidine Dans 50 mL d'isopropanol Ajouter après refroidissement 10 mL d'acide acétique cristallisable Compléter jusqu'au trait de jauge avec l'isopropanol. Conserver le réactif en flacon brun et au réfrigérateur. Métrologie des balances Matrice : - Miel normal - Miel chauffé au micro-ondes - Miel chauffé au bain marie - Miel chauffé à l'étuve Solution d'acide barbiturique : dans une fiole de 100 mL Dissoudre 500 mg d'acide barbiturique dans 70 mL d'eau distillée au bain d'eau. Refroidir, et compléter avec de l'eau jusqu'au trait de jauge. Peser 2 grammes de miel Dissoudre dans 4 à 5 mL d'eau Transvaser dans une fiole de 10 mL Compléter avec de l'eau au trait de jauge TEMOIN Dans un tube a essai Mettre 2 mL de solution de miel 5 mL de réaction à la paratoluidine 1 mL d'eau distillée Intra analytique Pré analytique ESSAI Dans un tube à essai Mettre 2 mL de solution de miel 5 mL de réaction à la paratoluidine 1 mL de solution d'acide barbiturique Agiter plusieurs fois Faire le zéro avec le témoin À 550 nm Analytique Post analytique Expression des résultats : 192 x extinction (D°) épaisseur de la cuve (en cm) Epreuve E7-2 du M58 – Analyse organoleptique et chimique du miel en fonction de son vieillissement, de son origine et de sa conservation. 6/11 IV - Analyse sensorielle : C'est une analyse qui permet d'étudier les caractéristiques sensorielles des produits en faisant intervenir l'homme comme seul instrument de mesure à partir de ses cinq sens (la vue, l'odorat, le goût, le toucher et l’ouïe) ou encore appeler les descripteurs du produit. Ce type d'analyses permet d'étudier différents problèmes ou de répondre à diverses questions posées par le fabricant. L'observation d'un aliment nous renseigne sur sa forme, sa couleur, son état, et sa consistance. L'odorat nous apporte de nombreux renseignements sur l'état du produit et sur sa comestibilité. C'est aussi un élément qui permet d'anticiper le goût. L'analyse du goût se fait principalement sur la langue dès le contact physique. Les principaux goûts sont le sucré, le salé, l'acide, l'amer et l'umami. 1 - Jury d'analyses sensorielle : Le jury d'analyse sensorielle constitue un réel « appareil de mesure » et, par suite, de ses membres dépendront les résultats des analyses sensorielles réalisées. Le recrutement des personnes acceptant de participer à un jury doit donc être réalisé avec soin et considéré comme un réel investissement aussi bien entemps qu'en matière de financement. Les évaluations sensorielles peuvent être réalisées par trois différents types de personnes : - les sujets naïfs ; - les sujets qualifiés ; - les experts. Lors de cette analyse on cherche à mesurer des préférences de plaisir. On fait donc un test hédonique en présence d'un jury naïf. C'est un test consommateur qui nécessite donc l'interrogation d'un grand nombre de personnes. 2 - Principe de l'analyse sensorielle : Deux types de tests sont possibles : – De distinction des saveurs : Présentation à chaque sujet, dans un ordre connu, de substances témoins correspondant aux saveurs, présentées sous formes de solutions aqueuses de concentration donnée. Après chaque dégustation, identification de la saveur par le sujet et enregistrement de son avis sur la saveur en question. – De différenciation des types de seuil : Pour une saveur donnée, présentation à chaque sujet de la substance témoin approprié, sous forme d'une série de dilutions, dont la concentration va dans l'ordre croissant. Après chaque dégustation, enregistrement des résultats du sujet. 3 - Protocole de l'analyse sensorielle Préparation du jury : - Explication du projet - Explication d'une analyse sensorielle - Explication du questionnaire Matrice : - Miel normal - Miel chauffé au bain-marie Préparation des échantillons : - 2 cuillères contenant les 2 échantillons - Un verre d'eau - Une serviette Déroulement de l'analyse sensorielle : Pré analytique Analytique Post analytique - Observation, dégustation - Remplissage du questionnaire Résultat / Interprétation : - Dépouillement des questionnaires Epreuve E7-2 du M58 – Analyse organoleptique et chimique du miel en fonction de son vieillissement, de son origine et de sa conservation. 7/11 4 – Analyse sensorielle du miel Numéro : Aspect visuel (regarder le produit) : La couleur donne-t-elle envie ?......................................................... □ OUI □ NON Pour vous de quelle couleur est le miel ? □ Jaune □ Beige □ Orange □ Marron Donner une note de satisfaction sur la couleur :................................ /5 A quelle texture vous attendez-vous ? □ Molle □ Dure □ Collante □ Gélatineuse □ Liquide □ autre ..................……………………………....... Donner une note de satisfaction sur la texture :................................... /5 Noter l'homogénéité de la texture : □ Très homogène □ Homogène □ Peu homogène □ Hétérogène □ Très hétérogène Aspect à l'odeur (sentir le produit) : Sentez-vous une odeur particulière ?.................................... □ OUI □ NON L'odeur des arômes est-elle : □ Très forte □ Forte □ Douce □ Très douce □ Aucune odeur Aspect en bouche (goûter le produit) : Donner une note de satisfaction sur la texture en bouche :............... /5 Noter la texture en bouche : □ Très collant □ Collante □ Très granuleux □ Peu collante □ Granuleux □ Peu granuleux □ Lisse □ Très lisse Noter le goût (Entourer votre réponse) : 0 – Très peu 1 – Peu 2 – Moyennement 3 – Fortement Acide : | | | | | 0 1 2 3 4 Amer : | | | | | 0 1 2 3 4 Salé : | | | | | 0 1 2 3 4 Sucré : | | | | | 0 1 2 3 4 4 – Très fortement Noter le goût général : 0 – Très mauvais 1 – Mauvais 2 – Appréciable 3 – Bon 4 – Très bon Goût général : | | | | | 0 1 2 3 4 Donner une note de satisfaction général sur le produit :..................... /5 Avez-vous perçu des différences entre les deux miels :.............................. □ OUI □ NON Lesquels ? …......................................................................................……………..........................…………………. Quel miel avez-vous préféré ? Pourquoi ? ….....................................................…………….........………………….. Epreuve E7-2 du M58 – Analyse organoleptique et chimique du miel en fonction de son vieillissement, de son origine et de sa conservation. 8/11 V - Résultats et interprétation (HMF et analyses sensorielle) : 1 - Analyse chimique Ce graphique met en évidence les différentes concentrations de HMF en fonction du type de chauffage. Graphique Chauffage/ [HMF] 40 35 Concentration HMF 30 Pas de chauffage (mg/kg) Chauffage étuve 100°C 3h (mg/kg) Chauffage bain-marie 100°C 3h (mg/kg) Chauffage micro-ondes 300W 2min (mg/kg) 25 20 15 10 5 0 Miel 1 Miel 2 Miel 3 Miel 4 Miel 5 Miel 6 Miel 7 Miels En observant le graphique ci-dessus, on peut tout d'abord remarquer que les concentrations en HMF pour chaque miel mais pour un même chauffage sont presque identique. Les plus fortes concentrations en HMF sont retrouvés majoritairement dans le chauffage au bain marie, puis dans le chauffage à l'étuve, ensuite dans les miels non chauffés et pour finir dans les miels chauffés au microondes. Nous pouvons dans un premier temps, constater que le miel non chauffé a une concentration en HMF supérieure a celle des miels chauffés au micro-ondes, sauf pour le miel 7. Ensuite, nous pouvons remarquer que la concentration en HMF pour le chauffage au bain marie est très élevé (allant de 13 à 38 mg/kg) et pour le miel 3, elle atteint presque la limite d'acceptabilité. Le chauffage à l'étuve est plutôt régulier de 10 à 18 mg/kg de HMF, et les miels non chauffés ont une concentration un peu élevé pour des miels qui n'ont subi aucun traitement. On devrait avoir une valeur au alentour de 3 mg/kg or pour le miel 3 on est a 1mg/kg. Concernant le chauffage au micro-ondes, pour lequel nous obtenons des concentrations en HMF inférieures aux miels non chauffés, nous avons supposé que lors du chauffage aux micro-ondes les molécules d'HMF ont été dégradés par l'agitation des liaisons et molécules d'hydrogène. On peut supposer que le chauffage au bain marie a engendré une haute concentration en HMF car les pots étant fermés, le taux d'humidité a été maintenu, ce qui a facilité l'oxydation des sucres (à l'origine du HMF). Pour le conditionnement du miel (industrie Agro-alimentaire), on peut donc préconiser un chauffage flash au micro onde. Traitement supposé utilisé dans les miels liquides du marché que l'on a testé, et qui se sont révélés faiblement concentré en HMF par rapport au miel issu d'une récolte artisanale. Epreuve E7-2 du M58 – Analyse organoleptique et chimique du miel en fonction de son vieillissement, de son origine et de sa conservation. 9/11 2 - Analyse sensorielle : Le miel d'été chauffé, a une texture et une couleur plus appréciée que le miel d'été non chauffé. Beaucoup de personnes ont trouvé le miel non chauffé granuleux, ce qui leur a déplu. Le miel chauffé quant à lui avait un aspect liquide (lisse) plus agréable. La majorité des candidats ont trouvés que le miel chauffé a un goût plus fort mais peu persistant contrairement au miel non chauffé qui lui a un goût plus diversifié, moins fort mais plus persistant. jaune 51 Tres granuleux 41 jaune 5 Tres granuleux 0 Miel non chauffé Couleur beige orange 46 3 Texture granuleux peu granuleux 46 5 marron 0 Très lisse 3 lisse 3 Miel chauffé au bain-marie Couleur beige orange marron 5 62 32 Texture granuleux peu granuleux Très lisse lisse 3 0 57 38 VI - Discussion et perspective : Durant la semaine de réalisation du projet, nous n'avons pas rencontré de très grandes difficultés. On peut noter un problème rencontré lors du chauffage des miels au micro-onde. En effet, le réglage du chauffage s'effectue via la puissance, et non la température. Après des essais réalisés à pleine puissance (850 W), nous obtenions des miels caramélisés qui se solidifiaient en refroidissant et donc les résultats obtenus étaient inexploitables. Nous avons donc choisi d'abaisser la puissance et d'en adapter la durée de chauffage : 2 minutes à 300 W. Un autre petit problème pratique est survenu lors de la dilution des miels dans les béchers : le miel étant un produit collant, on avait des difficultés à le diluer. Nous avons donc utilisé de l'eau tiède pour une meilleure dissolution. VII - Hygiène et sécurité : Pour préparer l'analyse sensorielle nous avons utilisé différents chauffages à 100°C. Il a donc fallu faire attention à ne pas se brûler. En chimie on utilise aussi un bain-marie pour mieux dissoudre l'acide barbiturique. On utilise de la ptoluidine concentrée (99 %) qui est dangereuse pour l’environnement et toxique. Il faut donc manipuler Epreuve E7-2 du M58 – Analyse organoleptique et chimique du miel en fonction de son vieillissement, de son origine et de sa conservation. 10/11 sous hotte avec une blouse, les gants, les lunettes de protection tout en respectant les précautions habituelles de laboratoire. VIII - Gestion des déchets : En analyse sensorielle tous les déchets sont jetés aux ordures ménagères. En chimie, on jette les déchets contenant les réactifs de P-toluidine dans le bidon « métaux ». Les solutions de miel peuvent être jetées dans l'évier. Conclusion : Après des analyses chimiques, nous pouvons tirer plusieurs renseignements sur l'influence du chauffage sur l'HMF. Nous pouvons confirmer qu'un fort chauffage entraîne une production d'HMF assez importante et qu'il varie selon le chauffage apporté car un chauffage au bain-marie produit en peu de temps un taux d'HMF élevé. Après une analyse organoleptique, nous pouvons dire que l'HMF joue un certain rôle dans l'appréciation du produit, car il y a une petite préférence pour le miel chauffé au bain-marie. Ce projet aura une suite au sein de notre lycée car des ruches vont y être installées et donc les prochains élèves pourrons poursuivre nos études sur le miel, et faire de nouvelles analyses. Sources bibliographiques : AFNOR. Contrôle de la qualité des produits alimentaires méthodes d'analyse officielles. Évaluation de la teneur en hydroxyméthylfurfural » Saint-Jean-de-Braye : édition Afnor. 1989. p. 269. ROBERT, Paul. « Le nouveau Petit Robert ». Le Petit Robert, 2007. Miel, p. 1595. SCHWEITZER, Paul. "L'HMF et les miels". « Apiculture-l'HMF et les miels » [En ligne] Consulté le : 09/12/2013. Disponible sur : http://www.beekeeping.com/abeille-de-france/articles/hmf.htm. http://agriculture.gouv.fr/Les-chiffres-cles-de-l-apiculture http://laruchekenyane.over-blog.com/2013/11/alertons-les-populations-avant-qu-il-ne-soit-trop-tard.html http://gdsa85.jimdo.com/ http://www.cari.be/article/le-berger-des-abeilles-et-latelier-royal/ http://www.abeillesentinelle.net/abeille/les-abeilles-en-danger.html Epreuve E7-2 du M58 – Analyse organoleptique et chimique du miel en fonction de son vieillissement, de son origine et de sa conservation. 11/11
