analyse d'article G2

Rôle de
l’autophagie
dans la
Biologie des CS
But de la recherche :
Etude de l’autophagie dans les cellules souches
mesenchymateuses: SCF/c-kit par l’hypoxie via la
phosphorylation de mTor
Increased SCF/c-kit by Hypoxia Promotes Autophagy of
Human Placental Chorionic Plate-Derived Mesenchymal
Stem Cells Via Regulating the Phosphorylation of mTOR
Youjin Lee,1 Jieun Jung,1 Kyung Jin Cho,2 Seoung-Kwan Lee,2 Jong-Wan Park,3
IL-Hoan Oh,4 and Gi Jin Kim1*
1Department of Biomedical Science, CHA University, 606-16 Yeoksam1-dong, Kangnam-Gu, Seoul 135-097,
Republic of Korea
2Department of Biomedical Science, College of Health Science, Korea University, 1 JeongReung-Dong, SungBuk-Gu,
Seoul 136-703, Republic of Korea
3Department of Pharmacology, Ischemic/Hypoxic Disease Institute, Seoul National University College of Medicine,
28 Yongon-dong, Chongno-gu, Seoul 110-799, Republic of Korea
4Department of Medical Lifescience, Catholic High Performance Cell Therapy Center, The Catholic University of Korea,
505, Banpo-dong, Seocho-Ku, Seoul 137-701, Republic of Korea

Voies de signalisation de l’autophagie
CQ
Baf
wtm
3MA

PCR (Polymerase Chain Reaction)
Objectif: Amplification in vitro d'un fragment d'ADN (matrice).
Principe et étapes: Nécessite deux amorces (sens et antisens), des dNTP, une ADN
polymerase thermostable (Taq).
La PCR comporte 20 à 40 cycles successifs de 3 étapes : dénaturation, hybridation puis
élongation.
Résultat et interprétation: Les fragments d’ADN amplifiés sont séparés en fonction de leur
taille par électrophorèse sur gel d’agarose ou polyacrylamide, et visualisés avec un intercalant
(BET) fluorescent sous UV.

REVERSE TRANSCRIPTION
Par la suite, l’ADNc peut être utilisé pour réaliser une
PCR classique ou une PCR quantitative. (qRT-PCR).
Objectif:
Effectuer la reverse transcription des ARN
messagers en ADN complémentaires
(ADNc, plus stable et plus maniable que
l’ARN).
Principe:
Elongation (polymérisation) in vitro des ARNm par
une enzyme, la Reverse Transcriptase (RT) d’origine
rétrovirale.
-ARN extraits des cellules à étudier
- Enzyme : Reverse Transcriptase (RT) d’origine
rétrovirale, fait la synthèse d’ADN à partir
-Amorces hexamériques random
(oligonucléotides de 6pb de séquence aléatoire) ou
amorces oligo(dT) (complémentaires de la queue
PolyA)
cDNA
Reverse Transcriptase