BIOLOGISTE Sérologie Maladie de Lyme DEFINITION La maladie de Lyme est une anthropozoonose, transmise par piqûre de tiques femelles du genre Ixodes, due à un spirochète, Borrelia burgdorferi. BIOPATHOLOGIE Clinique Les trois stades de l’infection (selon la 16e Conférence de consensus sur la maladie de Lyme, décembre 2006) sont : Stade primaire (early localisated Lyme borreliosis) : infection focale cutanée, avec un stade primo-secondaire de diffusion systémique de Borrelia ; Stade secondaire (early disseminated Lyme borreliosis) : infection tissulaire focalisée, unique ou multiple (articulaire, neurologique, cardiaque…) ; Stade tertiaire (late Lyme borreliosis) : manifestation(s) tardive(s) focalisée(s) ; rôle de la bactérie et de phénomènes inflammatoires ± dysimmunitaires. Au stade primaire, le signe cardinal est l’érythème migrant : il apparaît en quelques jours (jamais avant 48 h) à quelques semaines (s’il n’est pas apparu à 4 semaines, le patient peut être rassuré) et se présente sous la forme d’une macule toujours à croissance centrifuge. Il peut être associé à des arthralgies, des myalgies, un fébricule. La présence d’un érythème migrant permet d’affirmer le diagnostic. Le stade secondaire n’apparaît qu’en l’absence de traitement de l’érythème migrant, mais ne survient que dans un nombre limité de cas. Les neuroborrélioses sont les manifestations les plus fréquentes en Europe (méningoradiculite, atteinte des nerfs crâniens, méningite, méningomyélite, méningo-encéphalite). Surviennent également des arthrites (mono ou oligoarthrites, touchant presque toujours le genou), parfois des érythèmes migrants multiples, plus rarement un lymphocytome cutané borrélien, des troubles de la conduction cardiaque, une atteinte oculaire. Le stade tertiaire est associé aux neuroborrélioses tardives (encéphalomyélite chronique, polyneuropathie sensitive axonale), arthrites récidivantes ou chroniques, ou acrodermatite chronique atrophiante. Le syndrome « post-Lyme » est une entité controversée. Il serait défini par une asthénie, des algies diffuses, des plaintes cognitives survenant après une antibiothérapie correcte d’une maladie de Lyme avérée. Une nouvelle antibiothérapie n’en modifie pas l’évolution. MÉMENTO DU BIOLOGISTE DU MÉMENTO INDICATIONS Recommandations pour le diagnostic biologique en fonction des formes cliniques D’après la 16e Conférence de consensus en Thérapeutique anti-infectieuse (décembre 2006) Examens optionnels Formes cliniques Indications et résultats des examens essentiels au diagnostic (2 intention si contexte clinique évocateur et examens de 1ère intention négatifs) Erythème migrant AUCUN examen AUCUN Neuroborréliose précoce - Réaction cellulaire lymphocytaire dans le LCR et/ou hyperprotéinorachie. - Sérologie + dans le LCR, parfois retardée dans le sang. e - Culture et PCR du LCR - Séroconversion ou ascension du titre sérique des IgG - Synthèse intrathécale d’IgG spécifiques. Lymphocytome borrélien - Aspect histologique du lymphocytome - Sérologie positive (sang) - Culture et PCR du prélèvement cutané Atteinte cardiaque - Sérologie positive (sang) - Sur avis spécialisé - Sérologie positive (sang) : titre IgG habituellement élevé - Liquide articulaire inflammatoire - Culture et PCR sur liquide et/ou tissu synovial - Synthèse intrathécale d’IgG spécifiques - Culture et PCR du LCR - Aspect histologique évocateur -Sérologie positive à titre élevé (IgG) - Culture et PCR du prélèvement cutané (pour étude épidémiologique) - Sérologie positive -Confirmation par avis spécialisé - Sur avis spécialisé Arthrite Neuroborréliose chronique Acrodermatite chronique atrophiante Formes oculaires La sérologie n’a pas d’indication dans les situations suivantes : sujets asymptomatiques, dépistage systématique des sujets exposés, piqûre de tique sans manifestation clinique, érythème migrant typique, contrôle sérologique systématique des patients traités. TECHNIQUES DE DOSAGE La détection d’anticorps s’effectue dans le sang ou le LCR, par technique ELISA ou apparentée (immunochimiluminescence,...) avec confirmation par Western blot (WB) en cas de dépistage positif (pas d’indication du WB si la technique de détection est négative). Paris : dépistage sur automate Liaison® Diasorin : chimiluminescence. Lyon : dépistage par ELISA microplaques Siemens. Dans le LCR : dosage des IgG et des IgM, Index de synthèse intrathécale des IgG (si demande spécifique) : compare le taux d’IgG spécifiques dans le LCR / IgG spécifiques dans le sérum en rapport avec les taux d’IgG totales, et le taux d’albumine dans chaque compartiment. - Fréquence - Borréliose - sérologie dépistage IgG/IgM - sérum : 5 jours / 7 - Borréliose - sérologie dépistage - LCR ou liquide de ponction : 5 jours / 7 - Index de synthèse intrathécale : 5 jours / 7 - Borréliose - sérologie confirmation IgM - sérum : 4 jours / 7 - Borréliose - sérologie confirmation IgG - sérum : 4 jours / 7 - Délai de technique = 1 jour PRELEVEMENT - Sérum. Le prélèvement n’est pas obligatoirement réalisé à jeun. Quantité du prélèvement : 1 ml. Conservation et transport : à +4 °C. - LCR ou liquide de ponction : Quantité du prélèvement : 600 μl minimum. Conservation et transport : à +4 °C. - Index de synthèse intrathécale : LCR et sérum appariés ; prélèvements distants de moins de 24h. EXPERTISE BIOMNIS - Volumétrie quotidienne : environ 170 / jour (Paris et Lyon). - Technique ELISA : celle utilisée par le CNR Borréliose. - Paramètre non accrédité à Ivry, ACCREDITE COFRAC à Lyon. - Conclusion interprétative sur le compte-rendu. EXEMPLES DE COMPTE-RENDUS BIOMNIS Voir feuillets pages suivantes. COMPTE-RENDU COMPTE-RENDU COMPTE-RENDU COMPTE-RENDU COMPTE-RENDU COMPTE-RENDU COMPTE-RENDU