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L'ATP-métrie
Dossier réalisé par Justine Oliger et
Julien Saez.
BTS bio analyses et contrôles
Ambérieu en Bugey
Introduction
L'ATP-métrie permet une approche plus pratique de cette molécule
essentielle dont les élèves entendent parler tout au long de leur cursus
sans jamais constater concrètement son existence. Nous vous
proposons donc une approche de ses différentes techniques de
dosages ainsi que leurs principes.
Qu'est-ce que l'ATP-métrie?
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Technique permettant d'effectuer une mesure simple
et rapide du taux d'ATP (Adénosine TriPhosphate)
cellulaire sur une surface qui sert a quantifier le
nombres de microorganismes.
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Utilisée également en industrie agro alimentaire pour
évaluer la contamination microbienne dans un
aliment.
La bioluminescence
Application de l'ATP métrie
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L'ATP metrie est un technique de dosage instantanée de l’ATP
(Adénine Triphosphate), molécule de stockage d'énergie présente
dans les organismes vivants. La technique basée sur le principe de
bioluminescence, est une réaction enzymatique traduisant une
quantité d'ATP en quantité de lumière. Appliqué aussi au nettoyage
désinfection elle permet la détection de résidus alimentaire et de
développement microbien.
La Bioluminescence: PRINCIPE
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Cette technique utilise une enzyme, la luciférase.
Elle a pour substrat la luciférine qui, avec de l'ATP,
produit de la lumière quantifiable grâce à un
bioluminomêtre. Une relation permet de connaître
la concentration en ATP en fonction de la lumière.
Mesure de l'ATP
Une relation permet d'établir un lien entre la luminescence émise et la
concentration en ATP. Nous pouvons constater que la limite de détection de
cette technique est très faible, de l'ordre de 10-14 moles d'ATP.
Présentation de l'enzyme : la
LUCIFÉRASE
Cette enzyme
est une
transférase
d'un
groupement
pyrophosphate.
DEMARCHE QUALITE
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Identifier rapidement les zones sensibles en matière de
nettoyage et désinfection.
Déterminer un seuil de tolérance en fonction des exigences du
site ou de l'entreprise.
Interpréter immédiatement les résultats et permettre la
validation du nettoyage et de la désinfection de l'atelier en une
heure.
Permettre des actions correctives immédiates en cas de
problème.
Sensibiliser et responsabiliser le personnel à l'hygiène par une
formation complémentaire.
CONFORMITE AU PRINCIPE HACCP
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La directive européenne recommande, aujourd'hui, le recours
au principe du HACCP pour la maîtrise de la qualité
microbiologique des aliments.
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L'ATP métrie entre dans le cadre de cette démarche, car elle
est un outil d'autocontrôle rapide du nettoyage désinfection,
permettant de réaliser une surveillance et de décider d'actions
correctives immédiates.
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On peut ainsi garantir au produit une sécurité optimale.
Conclusion:
Utilisation de l'ATP métrie
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Vérification de nettoyage désinfection des
surfaces en laboratoire.
Vérification de la flore microbiologique dans
les aliments.
Oenologie : Conformité du vin.(flore
microbienne)
Conclusion:
méthodes utilisées en laboratoire
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Bioluminescence .
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Dosage des nucléotides (colorimétrie)
contenant l'ATP.
Bibliographie
http://www.silliker.fr/home/microbiologie.htm#analyse
http://www.liste-hygiene.org/arckits.html
http://www.didier-pol.net/3ATP&BL.html
http://www.pasteur-lille.fr/fr/expertise/alimentaire/pdf/atpmétrie.pdf