diaporama - Spiral - Université Lyon 1
publicité
Infec&ons)des)muqueuses) à)papillomavirus) Pr.)Patrice)André) Laboratoire)Virologie)Nord,)Hôpital)de)la)Croix)Rousse) Hospices)Civils)de)Lyon) Inserm)U851,)IFR)128)BioSciences)LyonNGerland) Université)Lyon)1) Première)par&e:) HPV) Aspects)virologiques) • Structure)et)classifica&on) • Infec&on)produc&ve)«)normale)») • Evolu&on)vers)l’infec&on)abor&ve)et)le) cancer) )Structure)et)Classifica&on) Clin.)Sci.)(2006))110,)525N541)) ))))))))))))))))))))HPV) • Structure)et)classifica&on) • Infec&on)produc&ve)«)normale)») • Evolu&on)vers)l’infec&on)abor&ve)et)le) cancer) Cycle)viral)produc&f) • )entrée)et)cible)du)virus) • )«)episome)»)sous)la)dépendance)de) E1)et)E2)transmis)aux)cellules)filles)en) phase)S) • )régula&on)de)l’expression)de)E6/E7) par)E2) • )induc&on)de)la)proliféra&on)cellulaire) et)perte)de)la)différencia&on)normale) en)kéra&nocytes,)variable)selon)les) HPV)(exemple)HPV)6/16)) • )facteurs)cellulaires)entrainent)le) programme)tardif,))^)E1)E2)E4)E5)avec) induc&on)réplica&on)génomes)(E5)et) EGFr),)inhibi&on)E6)E7,)accumula&on) de)E4) • )Expression)de)LI)et)L2)) Clin.)Sci.)(2006))110,)525N541)) Caractérisa&on)d’une)infec&on) produc&ve)de)papillomavirus) E6)E7)expression)en)rouge) E4)en)vert) Réplica&on)génome)viral)en)rouge)(FISH)) E4)en)vert) Capside)virale)en)rouge) E4)en)vert) S&mula&on)du)cycle)cellulaire)par) HPV)) La)réponse)immunitaire)innée:) l’interféron) Mode d’inhibition des défenses antivirales cellulaires par les protéines virales E6 et E7 La)réponse)immunitaire) • )Infiltra&on)lymphocytaire)(T)CD8+)cytotoxiques)) avec)régression)des)lésions)en)8N12)semaines,) guérison)à)16)semaines) • )An&corps)an&NL1)protecteurs)(N>)vaccin)!!)) • )Mais)finalement)équilibre)entre)signaux)mitogènes) et)blocage)de)ces)signaux)et)équilibre)entre)blocage) de)la)réponse)immunitaire)et)son)efficacité.)) • )Du)résultat)de)ces)équilibres)dépend)l’élimina&on) du)virus)ou)sa)persistence.) ))))))))))))))))))))HPV) • Structure)et)classifica&on) • Infec&on)produc&ve)«)normale)») • Evolu&on)vers)l’infec&on)abor&ve)et)le) cancer) Evolu&on)vers)l’infec&on) abor&ve)et)le)cancer)) Facteurs)favorisant)) • ))Le)type)des)HPV,)à)haut)risque,)à)bas)risque.) • ))Intégra&on)du)génome,)dérégula&on)de)E2/E7) • )Le)site)de)l’infec&on))(exemple)du)coion)tail)rabbit)),) zone)de)jonc&on.) • ))CoNfacteurs,)imprégna&on)hormonale,)tabac.) • ))Le)temps…) Progression)liée)à)HPV)vers)le) cancer)) Global)Cancer)Sta&s&cs,)2002.)Cancer)J)Clin,)55:74) Expression)génique)lors)de) l’évolu&on)vers)le)cancer) HPV16))))))))26%))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))63%) Progression):)))))))))))20%)))))))))))))))))))))))))))))))))))))30%))))))))))))))))))))))))))))))))))40%) 80%)dispari&on)HPV)à)18)mois,)immunité)protectrice)?) 80%)d’exposi&on)cumulée,)0.03%)évolu&on)vers)le)cancer) Clin.)Sci.)2006.)110:525N541)))J)Natl)Cancer)Inst.)2003.)31:3))) Détec&on)des)protéines)virales)dans)les) CIN) A,)col)infecté)par)HPV16) B,)CIN)1)et)3)) Rouge)E7,)vert)E4)) Clin.)Sci.)(2006))110,)525N541)) Modèle de progression « multi-step » des cancers liés à une infection par un HPV à haut risque ))))))))))))))Conclusion) • Mode)original)de)proliféra&on)virale)par) induc&on)du)cycle)cellulaire.) • Dérégula&on)possible))et)oncogénèse)en) fonc&on)de)facteurs)de)terrain)et)de)facteurs) viraux.) • Stratégie)de)dépistage)et)de)diagnos&c)) Deuxième)par&e:) Aspects)cytologiques)et) histologiques)) des)lésions)du)col)utérin)associées) aux)papillomavirus) Aspects)techniques) • 2)types)de)techniques)de)froqs)cervical) Étalement)conven&onnel)) Étalement)«)monocouche)»)(cytologie)en) phase)liquide)) Aspects)techniques) Mise)en)suspension)des)cellules)dans)un) liquide)de)fixa&on)(Méthanol)) Étalement)effectué)par)le)processeur)ThinPrep) par)une)technique)d’aspira&on)et)filtra&on) Homogéinisa&on)(rota&on)du)filtre),)Aspira&on,)Filtra&on) Obten&on)d’un)étalement)uniforme)de)cellules)sans) superposi&on)cellulaire) Intérêt)du)froqs)en)phase) liquide) Au)moins)aussi)performant)que)le)froqs) conven&onnel) Standardisa&on)des)prélèvements)(intérêt) pour)mise)au)point)de)techniques)de)lectures) automa&ques)) Diminu&on)d’environ)30%)le)temps)de)lecture) Intérêt)du)froqs)en)phase) liquide) Diminuerait)le)taux)de)froqs)non)sa&sfaisant) Augmente)la)sensibilité)pour)les)lésions)de)bas) grade) Permet)la)réalisa&on)sur)le)même)prélèvement) de)techniques)complémentaires):)recherche) HPV)oncogènes…) Classifica(on+cytologique+ Classifica(on+histologique+ de+Bethesda++2001+ OMS+2003+ ASCNUS) ASCNH) LSIL) Condylome)sans)dysplasie) CIN1) HSIL) CIN2) CIN3/CIS) Carcinome)malpighien) Carcinome)malpighien) ASCNUS)(Atypical)Squamous)Cells)of) Undetermined)Significance)) • 3N5)%)des)froqs)de)dépistage) • 50%)HPV)oncogène)posi&f) • Corréla&ons)cytoNhisto) 44%))pas)de)CIN) 48%))CIN1) 9)%)))CIN2/3) ASCNUS)(Atypical)Squamous)Cells) of)Undetermined)Significance)) • noyaux)agrandis)(2N3x) par)rapport)aux) noyaux)de)cellules) intermédiaires)) • Parakératose)avec) anomalies)nucléaires) ASCNH)(Atypical)Squamous)Cells) Cannot)Exclude)HSIL)) • 0,3N0,6)%)des)froqs)de)dépistage) • 65)à)80%)HPV)oncogènes)posi&fs) – 85%)HPV)oncogène)posi&f)chez)les)femmes)de)–)35)ans) – 40%)chez)femmes)de)+)35ans) • Corréla&ons)cytoNhisto) 45)à)65%)CIN2/3) 30)à)50%)“normal”) ASCNH)(Atypical)Squamous)Cells) Cannot)Exclude)HSIL)) • cellules)de)pe&te)taille) • rapport)N/C)augmenté) • hyperchromasie,) chroma&ne)irrégulière) LSIL)(LowNgrade)Squamous) Intraepithelial)Lesion)) • 2%)des)froqs)de)dépistage) • 82%)HPV)oncogènes)posi&fs) • Corréla&on)cytoNhisto) 75%))CIN1) 15N20%)CIN)2)ou)3) 5N10)%)normal)(remaniement)métaplasique)mature)) LSIL) • Cellules)malpighiennes) superficielles) • )noyaux)agrandis)(>)3x) par)rapport)aux)noyaux) de)cellules) intermédiaires)) • Bi)ou)mul&nucléa&ons) • Koïlocytes) HSIL)(HighNgrade)Squamous) Intraepithelial)Lesion)) • 0,3)à)0,9)%)des)froqs)de)dépistage) • >)90)%)HPV)oncogène)posi&f) • Corréla&on)cytoNhisto) – 12%)CIN1) – 72%)CIN2/3) – 4%)carcinome)malpighien) – 10%)bénin)(atrophie,)métaplasie)immature) dystrophique…)) HSIL)(HighNgrade)Squamous) Intraepithelial)) • Cellules)plus)pe&tes)et)moins) matures)que)LSIL) • cellules)atypiques)isolées,)ou) en)placards) • rapport)N/C)augmenté) • noyaux)très)atypiques:) encochés,)plissés)(rarement) ronds),)à)contour)irrégulier) • hyperchromasie;)chroma&ne) granulaire) • absence)de)nucléole) HSIL)avec)images)faisant) suspecter)une)invasion) • Cellules)de)haut)grade)très) pléomorphes)avec)des) cytoplasmes)kéra&nisés) • Mais)sans)diathèse) tumorale) Carcinome)malpighien) • Cancer)le)plus)fréquent)au)niveau)du)col) • Incidence)40N45)ans)(10)ans)après)le)pic) d’incidence)des)lésions)intraNépithéliales)) • Associa&on)avec)l’HPV)+++)(99%)) • Rare)sur)froqs)de)dépistage) Troisième)par&e) Dépistage)et)typage)des) infec&ons)HPV) Fréquence)des)HPV)à)“haut) risque”)en)France) • • • • • • • HPV+16 HPV+18 HPV)31 HPV)33 HPV)68 HPV)45 HPV)52 + + ) ) ) ) ) +72.9%+ +18.8%+ )7%) )4.1%) )3.3%) )3.1%) )2.7%) Prétet)et)coll)Int.J.Cancer)2008)) Recommanda&ons)HAS) (2002N2004))) • FroGs+recommandé+chez+les+femmes+de+25+à+65+ans+tous+les+3+ ans+après+2+froGs+normaux+ – 5)Millions)de)froqs) – 150)000)à)200)000)(3)à)4)%))ASCNUS)froqs)avec)atypies)des)cellules) – 20)à)30)000)CIN)2/3+ • FroGs+en+milieu+liquide+:+ – qualité)des)prélèvements)et)possibilité)de)rechercher)les)HPV)sur)le)même) prélèvement.) • Recherche+et+typage+HVP+uniquement)sur)froqs)avec)atypies)des) cellules)malpighiennes)de)significa&on))indéterminée)(ASCUUS)+ • Incrit+à+la+NABM+depuis+2004) Méthodes)de)détec&on)et)de) typage) • Capture+d’hybrides+HC+II®+DIGENE+ – Seul)test)validé)aux)USA) • PCR+consensus+sur+le+gène+L1+ • Détec(on+des+l’ARNm+codant+E6+et+E7+ – Intérêt pour évaluer l’activité oncogène (en deuxième intention sur prélèvements positifs virus à haut risque) Quatrième)par&e) Traitement) • Exérèse)des)lésions)(conisa&on….)) • Vaccins)(voir)calendrier)vaccinal))
