role d`ul24 dans la formation de nouveaux genomes

Université du Québec
Institut National de la Recherche Scientifique
INRS-Institut Armand-Frappier
ROLE D’UL24 DANS LA FORMATION DE NOUVEAUX GENOMES
VIRAUX LORS DE LA REPLICATION DU VIRUS HERPES SIMPLEX 1.
Par
FAYE Boury
Mémoire présenté pour l‟obtention du grade de
Maître en sciences (M.Sc.)
en immunologie et virologie.
Jury d’évaluation
Président du jury et Jaramillo Maritza, PhD.
examinateur interne INRS-Institut Armand-Frappier
Examinateur externe Pelchat Martin, PhD.
Département de biochimie,
microbiologie et immunologie
Université d‟Ottawa
Directeur de recherche Angela Pearson, PhD.
INRS-Institut Armand-Frappier
© Droits réservés de FAYE Boury, 2015.

iii
REMERCIEMENTS
Je remercie ma superviseure Angela Pearson de m‟avoir accueillie au sein de son
laboratoire pour réaliser cette maîtrise.
Je remercie aussi tous les membres de mon équipe à partir desquels j‟ai beaucoup
appris.
Je tiens à remercier également, tous les membres de ma famille à commencer par ma
maman et mon papa qui ont fortement contribué en la personne motivée et déterminée
que je suis aujourd‟hui ainsi que mes frères, sœurs et neveux.
Je tiens enfin à réserver une mention spéciale à mon mari qui n‟a pas cessé de me
témoigner son soutien et de m‟encourager dans mes efforts tout au long de cette
formation.

v
RÉSUMÉ
Le virus herpès simplex 1 (VHS-1) est un agent pathogène qui infecte l‟Homme en
ciblant les cellules épithéliales des muqueuses menant à la formation de lésions
vésiculaires. Par la suite, il infecte les neurones sensitifs où il établit la latence. Le
génome du VHS-1 est constitué d‟une molécule d‟ADN double brin linéaire divisée en
deux segments : la région unique longue et la région unique courte. L‟existence de
séquences répétées inversées de part et d‟autre de ces segments, permet l‟inversion
de ces régions uniques par un mécanisme de recombinaison homologue. Ces
évènements d‟inversion conduisent à la formation de quatre isomères présents en
quantités équimolaires lors de la réplication du VHS-1. Au cours de cette étape, des
intermédiaires de réplication vont se former et auront la particularité de présenter des
structures très ramifiées. La résolution de ces ramifications est alors facilitée par
l‟action de protéines à fonction nucléase. En effet, cette réplication virale se déroule
selon un mode de cercles roulant qui vont produire de longs concatémères
correspondant à plusieurs unités génomiques liées les unes aux autres. Un clivage
spécifique de ces concatémères va permettre de libérer une unité génomique virale qui
pourra ensuite être encapsidée pour former un nouveau virion.
Le gène ul24 est très bien conservé à travers la famille des Herpesviridae et code pour
une protéine à cinétique tardive. D‟autre part, il a été identifié un motif putatif
d‟endonucléase de type PD-(D/E)XK spécifique des membres de la superfamille des
phosphodiestérases dans la partie N-terminale d‟UL24. Par ailleurs, la littérature
rapporte que cette superfamille renferme des recombinases (Kosinski et al., 2005).
Ainsi, il est proposé qu‟UL24 favoriserait la production de nouveaux génomes viraux par
un processus de recombinaison homologue lors de la réplication du VHS-1.
Afin de tester l‟hypothèse qu‟UL24 intervient dans la formation de monomères
génomiques, des cellules Vero ont été infectées par les souches virales KOS (souche
sauvage VHS-1), UL24X (déficiente en UL24) et UL24XRescue (virus reconstitué). Des
résultats préliminaires de notre laboratoire ont montré qu‟UL24 favorise la production de
monomères d‟ADN génomiques du VHS-1. Nous voulions déterminer si le motif
d‟endonucléase était important pour la production de monomères du génome viral en