Cycle FIV Introduction Etape 1

11/26/12 Le cycle FIV, DGO, Maternité, CHUV, Lausanne, gynécologie, obstétrique
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Stimulation ovarienne avec
ou sans insémination intra
utérine (IIU) par le sperme
du conjoint (IAC)
Insémination artificielle avec
sperme de donneur (IAD)
Fécondation in vitro et
transfert d'embryons
(FIVETE)
Intra-cytoplasmic sperm
injection (ICSI)
Eclosion assistée
(Hatching)
Culture prolongée
Cycle FIV
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Cycle FIV
Introduction
1. Stimulation ovarienne
2. Déclenchement de l'ovulation
3. Prélèvement des ovocytes (OPU)
4. Recueil et la préparation du sperme
5. Mise en fécondation in vitro
6. Identification des zygotes, la mise en culture des embryons et la congélation des zygotes surnuméraires
7. Transfert d'embryons
Introduction
Le rendement thérapeutique de la FIVETE est étroitement lié au nombre de pré-embryons obtenus qui, lui-même, dépend du
nombre d’ovocytes récoltés. Par conséquent, une stimulation ovarienne est indispensable pour augmenter le nombre d'ovocytes
récoltés (qui est de 1 dans le cycle menstruel naturel). Divers protocoles et principes actifs ont été utilisés jusqu’à ce jour
(citrate de clomifène, HMG, FSH purifiée, FSH recombinante, agonistes ou antagonistes de la GnRH): ils tendent tous à obtenir
un nombre optimal d’ovocytes. Les autres possibilités sont des protocoles de «minimal / mild stimulation» ou même la ponction
d'ovocyte(s) dans un cycle spontané naturel. L'avantage de ces types de protocole est qu’ils sont beaucoup plus «naturels»
mais également moins chers, car la quantité de médicaments prescrite est nettement moindre voire nulle. Le désavantage est
qu’il y a généralement moins de chances de grossesse. Votre médecin choisira le protocole qui vous convient le mieux.
Dans la grande majorité des cas, un protocole "long" est choisi. Celui-ci comprend un blocage hypophysaire par un analogue
de la GnRH, puis stimulation par des gonadotrophines FSH. D'autres protocoles sont réservés à des cas particuliers, tels que
les patientes hyper- ou hypo-répondeuses. Les spécificités du traitement choisi sont présentées par le médecin avant toute
stimulation. En général, il est fait un court usage de la pilule contraceptive. Cette approche permet de synchroniser tous les
petits follicules présents dans les ovaires. Il en résulte une stimulation plus harmonieuse et probablement, des meilleurs
résultats. Actuellement, cette approche permet un meilleur contrôle du moment précis (numéro de la semaine) où a lieu la
ponction ovocytaire. Cette approche utilisant brièvement la pilule (7 – 30 j) ("double suppression"), est utilisée par la majorité
des programmes FIV aux USA. Vous trouverez ci-dessous un bref descriptif d'un cycle FIVETE.
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Etape 1: Stimulation ovarienne
Pour stimuler les ovaires et la production de plusieurs ovocytes, deux médicaments sont utilisés.
1. Un analogue de la GnRH bloque la synthèse des hormones hypophysaires gonadotropes (FSH, LH) et induit un blocage
du cycle naturel. L'administration journalière par voie sous-cutanée débute généralement 4 jours avant d'arrêter la prise
de pilule et il se poursuit jusqu'au déclenchement de l'ovulation (env. 20-25 jours au total).
2. Une hormone folliculo-stimulante (FSH ou HMG), est administrée quotidiennement sous forme d'injection sous-cutanée,
elle induit la croissance des follicules ovariens (stimulation des ovaires). La croissance de ces follicules est suivie par
des échographies (voir photo) et par des dosages hormonaux dans le sang.
Echographie d'un ovaire montrant la présence de plusieurs follicules (les zones noires arrondies). Les plus gros d'entre eux ont
2 cm environ.
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Etape 2: Déclenchement de l'ovulation
L’ovocyte n'est fécondable par le spermatozoïde que s'il a préalablement repris sa division méiotique et expulsé le premier
globule polaire. On considère alors qu'il est mature.

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Exemple d'ovocyte mature. On discerne le globule polaire à 15 heures indiquant la reprise de la méiose
Dans un cycle naturel, la maturation de l'ovocyte et l'ovulation sont induites par le pic de LH, l'hormone lutéinisante. En cycle
stimulé, l'administration de hCG (hormone de la grossesse) permet de mimer l'action de la LH. On parle alors de
déclenchement de l'ovulation. Différentes hormones naturelles ou de synthèse, telles que la hCG urinaire ou la hCG
recombinante, peuvent être utilisées à cette fin.
Le déclenchement de l'ovulation est généralement programmé 35 heures avant l'heure prévue de la ponction folliculaire.
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Etape 3: Prélèvement des ovocytes (OPU)
La plupart des prélèvements d’ovocytes sont réalisés sous une légère anesthésie générale en salle d'opération.
Exceptionnellement, une anesthésie locale ou loco-régionale peut être proposée. Ce fait est discuté avec le médecin et avec
l'anesthésiste avant l’intervention.
Les follicules sont ponctionnés à l'aide d'une aiguille introduite dans le follicule à l'aide d'une sonde échographique via le vagin.
Les liquides ponctionnés sont recueillis dans des tubes étiquetés au nom de la patiente, puis acheminés au laboratoire. Les
complexes cumulus-ovocytes (COC) sont recherchés (voir photo) à l'aide d'une loupe binoculaire, puis sont mis en culture dans
un incubateur.
Trois complexes cumulus-ovocytes. Chaque COC a 2-3 mm de diamètre. Boîte de culture à 4 cupules.
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Etape 4: Recueil et la préparation du sperme
Le recueil du sperme est réalisé à proximité immédiate du laboratoire environ 1.5 heures après la ponction. Une abstinence de
2-4 jours est recommandée, car cette durée permet d'obtenir un maximum de spermatozoïdes mobiles. Dans les cas où une
éjaculation par masturbation est impossible, la récolte du sperme au cours d'un coït est possible, mais elle doit se faire dans
un préservatif spécial mis à disposition par le laboratoire. Cette possibilité doit être discutée préalablement avec le médecin et
le laboratoire.
Dans de très rares cas, si le premier échantillon ne contient pas ou trop peu de spermatozoïdes, le recueil d'un deuxième
prélèvement peut être nécessaire.
Spermatozoïdes après lavage et spermatozoïdes colorés au Papanicolaou. La longueur de la tête est de 4-5 µm, sa largeur de
1.50-1.75 µm, la longueur du flagelle est de 45 µm (variable d'un individu à l'autre).
Congélation préalable du sperme
Lorsque des difficultés ont été rencontrées lors du don de sperme pour les investigations, nous recommandons au conjoint
d'envisager la congélation d'un échantillon de sperme "de réserve" qui pourrait être utilisé le jour de la récolte d’ovocytes et de la
fécondation. Il appartient au conjoint de décider si cette précaution lui semble nécessaire. Pour la congélation d'un échantillon
de sperme, le conjoint doit contacter le laboratoire avant le début du traitement et prendre rendez-vous. La même précaution
d'abstinence de 2 à 4 jours s'applique.
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Etapes 5: Mise en fécondation in vitro
En FIV classique, quelques heures après l'OPU, 50'000 spermatozoïdes sont mis en présence de chaque complexe cumulus-
ovocyte. Cette mise en fécondation est réalisée dans une boîte de culture à 4 cupules (voir photo). Chaque boîte est identifiée
avec le nom des patients et mise à incuber à 37°C en présence de 6% CO2, 5% O2 et 90% N2 dans un incubateur (voir photo).
Lorsque le faible nombre de spermatozoïdes rend impossible la mise en fécondation classique, on a recours à l'ICSI

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Incubateur avec contrôle du CO2 et de l'O2
Complexes cumulus-ovocytes (2 mm de large). L'ovocyte est contenu dans l'amas de cellules au centre (0.2-0.3 mm de
diamètre). Boîte de culture dans laquelle la mise en fécondation est réalisée.
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Etape 6: Identification des ovocytes imprégnés, la mise en culture des embryons et la congélation des
ovocytes imprégnés surnuméraires
Une fois qu'un spermatozoïde a pénétré dans l'ovocyte, les matériels génétiques d'origine paternelle et maternelle apparaissent
sous forme de structures appelées pronucléi. Ainsi, 16-20 heures après la mise en fécondation, les ovocytes imprégnés
(ovocytes fécondés) sont identifiés par la présence des deux pronucléi (noyaux maternel et paternel) et de deux globules
polaires.
Ovocyte imprégné au stade de deux pronucléi, visibles côte à côte au centre de l'ovocyte. Les 2 globules polaires sont visibles
à 12h.
Généralement, 2 ovocytes imprégnés (3 au maximum dans des cas exceptionnels) sont mis en culture pour le transfert
d'embryons frais.
Tous les ovocytes imprégnés surnuméraires sont immédiatement congelés conformément à la LPMA c’est-à-dire avant la
20ème heure correspondant au moment où les pronuclei disparaissent et fusionnent leur contenu (après la fusion des noyaux,
l'ovocyte imprégné est défini comme zygote (embryon à une cellule).
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Etapes 7: Transfert d'embryons
Le transfert d'embryons est réalisé 48-72 heures après le prélèvement des ovocytes. Le transfert s'effectue par voie vaginale, au
moyen d'un fin cathéter et est indolore. Le transfert se fait sous ultrason avec vessie à demi pleine.
Cathéter utilisé pour le transfert d'embryons
Dans de très rares cas, il est nécessaire de saisir le col de l’utérus avec une pince afin de redresser l’utérus et de permettre
l’introduction du cathéter. Une fois les embryons placés dans l'utérus, la patiente se repose environ 30 minutes.
De la progestérone, administrée par voie vaginale, est prescrite dès le soir du jour de la ponction. Les doses et les modalités de
ce traitement (soutien) sont données par le médecin.
Transfert d’embryons décongelés
Les transferts d’embryons décongelés sont en général réalisés au cours de cycles substitués avec prise d'estrogène et de
progestérone.
Le plus souvent 2 embryons sont transférés.

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Embryon à 4 blastomères ou cellules (45h après l'insémination) et à 8 blastomères (72h après l'insémination)
Embryon au stade de morula (96h après l'insémination) et de blastocyste (120h après l'insémination)
Embryon au stade complet de blastocyste (144 heures après l'insémination)
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Dernière modification le 11.08.2011 - Impressum - Informations juridiques