- Antigènes-Anticorps, les précurseurs métaboliques, les sondes nucléiques, le microscope,
- l'électrophorèse, microscopie à fond clair et à fluorescence
3- Analyse des constituants cellulaires à partir d'extraits cellulaires et sur cellule fixées
- Southern blot, Northern Blot, Western blot
- Immunodétection/ hybridation in situ
4- Visualisation des constituants cellulaires sur cellules vivantes
- technique de pulse chase
- Marquage GFP
- La technique de FRAP
II- Le noyau cellulaire
1- L'organisation du génome dans le noyau par les approches in situ
- la chromatine (nucléosomes)
- collier de perle/solénoide/boucles territoires chromosomiques
- Organisation du génome dans le noyau
- Les lamines
- liens structure-fonction : organisation fonctionnelle
2- Réplication
- Rappel des grands principe de la réplication de l'ADN
- Mécanismes de la réplication : les fourches de réplication bidirectionnelles
- cas particulier de la réplication des télomères : la télomérase
- quelques exemples du contrôle de la réplication :
les couple cdk1/cycline B, Rb/E2F/Cdk4,6/cycline D.
Dommages de l'ADN : p53/p21,
- Cinétique de la réplication (timing de réplication/richesse en gène/euchromatine/ hétérochromatine)
- Analyse in situ de la réplication
3- la transcription et maturation
- Rappel des principes généraux de la transcription
- Promoteurs et unité de transcription
- Facteurs de transcription
- Polyadenylation, capping
- Epissage et épissage alternatif
- le nucléoles : regroupement fonctionnelle des gènes ribosomaux, synthèse et d'assemblage des ribosomes
- Analyse in situ de l'activité transcriptionnelle
4- Le transport nucleo-cytoplasmique
- les pores nucléaires
- la diffusion passive
- Les signaux NLS/NES
5- La reparation de l?ADN
- Excision de bases et de nucleotides
- Recombinaison par exchange
- Recombinaison homologue
- Fusion d?extrémités non homologues
III- La Traduction
1- Les acteurs de la traduction
1.1 les ARNm
- Les ARNm procaryotes
- Les ARNm eucaryotes