Le lymphocyte Fonction Lymphocyte = support de l’immunité Antigène = substance reconnue par le système immunitaire Lymphocytes T et B T = immunité à médiation cellulaire B = immunité humorale Lymphocytes non T non B (NK – Natural Killer) NK = immunité innée (cytotoxique) Immunité innée (non spécifique) – immunité acquise (spécifique) Lymphogénèse NK Organes lymphoïdes primaires Moelle osseuse Lymphocyte indifférencié Précurseur non lymphoïde Organes lymphoï lymphoïdes secondaires mIg Lymphocyte Pré-B B TCR Thymocyte (Pré-T) Thymus Thymocyte (Pré-T) T Différenciation et prolifération Maturation T Ganglion lymphatique Maturation B Immunoblaste B Paracortex et medulla Cellule plasmocytoïde Moelle osseuse Lymphoblaste B précurseur Cellule B naïve Antigène Antigène Lymphocyte B mémoire Plasmocyte Zone du manteau Organe lymphoï lymphoïde secondaire Zone marginale Centre germinatif Description des cellules Description de l’extérieur vers l’intérieur Doute : supervision par un spécialiste Observation et interprétation Critères morphologiques Taille Contour cytoplasmique Cytoplasme Noyau Critères morphologiques Taille Contour cytoplasmique Cytoplasme Noyau Sang périphérique Se référer à la taille du globule rouge =< 1 x taille GR Petite cellule >= 2x taille GR Grande cellule Critères morphologiques Taille Contour cytoplasmique Cytoplasme Noyau Contour cytoplasmique Lisse ou irrégulier ? Contour cytoplasmique Irrégularité polarisée ou non ? Attention aux artéfacts de l’étalement et au vieillissement cellulaire ! Préservation de la morphologie : délai < 4h 2 Comment s’assurer de l’irrégularité des contours cytoplasmiques ? 1. Par analyse d’images 2. A frais au microscope à contraste de phase 3. Par coloration immunocytochimique 4. Sur les cytogrammes de l’appareil de numération 5. Cytométrie en flux 6. Je ne me prononce pas Comment s assurer de l irrégularité des contours cytoplasmiques ? 1. Par analyse d images 0 2. A frais au microscope à contraste de phase 1 3. Par coloration immunocytochimique 0 4. Sur les cytogrammes de appareil de numération 1 5. Cytométrie en flux 1 6. Je ne me prononce pas 0 0 1 Critères morphologiques Taille Contour cytoplasmique Cytoplasme Noyau Rapport Nucléo/cytoplasmique Elevé ou faible ? Elevé (>0.9) Moyen (0.6 – 0.9) Faible (<0.6) Basophilie Cytoplasme (hyper)basophile ou clair ? Basophile Clair Hyperbasophile Granulations ou corps intracytoplasmiques La cellule possède-t-elle des grains ? ou des vacuoles ? ou des cristaux ou autres ? Comment qualifieriez-vous cette cellule au niveau du2 rapport N/C et de son cytoplasme ? 1. Rapport N/C élevé, granuleuse et hyperbasophile 2. Rapport N/C faible et hyperbasophile 3. Rapport N/C élevé et cytoplasme clair 4. Rapport N/C faible, granuleuse et cytoplasme légèrement basophile 5. Rapport N/C élevé, granuleuse et cytoplasme clair Comment qualifieriez-vous cette cellule au niveau du rapport N/C et de son cytoplasme ? 1. Rapport N/C élevé, granuleuse et hyperbasophile 0 2. Rapport N/C faible et hyperbasophile 0 3. Rapport N/C élevé et cytoplasme clair 0 4. Rapport N/C faible, granuleuse et cytoplasme légèrement basophile 2 5. Rapport N/C élevé, granuleuse et cytoplasme clair 0 0 1 2 Critères morphologiques Taille Contour cytoplasmique Cytoplasme Noyau Forme Régulier ou irrégulier ? Régulier Incisé, clivé Forme Régulier ou irrégulier ? Bilobé Binucléé Convoluté Cérébriforme Boursouflé Bourgeonnant Texture Chromatine condensée, fine, mottée ? Fine Imparfaitement condensée Mottée Nucléoles 0, 1 ou plusieurs nucléoles ? Centré, pas centré ? Nucléoles 1 gros nucléole bien visible Nucléoles 0, 1 ou plusieurs nucléoles ? Plusieurs nucléoles Chromatine fine Gros nucléole Pas de nucléole Décrivons ces cellules… 1 2 3 4 5 6 Et celles-ci… 1 2 3 4 5 6 Parmi les deux cas proposés, lequel correspondrait 2 à une hémopathie maligne ? 1. N°1 2. N°2 3. Aucune 4. Je ne me prononce pas et j’appelle le superviseur Parmi les deux cas proposés, lequel correspondrait à une hémopathie maligne ? 1. N°1 0 2. N°2 1 3. Aucune 0 4. Je ne me prononce pas et j appelle le superviseur 1 0 1 Polymorphisme réactionnel Décrire les cellules Confirmation par : 1. Les tests sérologiques (EBV, CMV, Toxoplasmose, Hépatite…) 2. L’immunophénotypage : 1. Lymphocytes CD3+/CD8+/CD38+ (activation)/HLADR+ (activation) Vous avez confirmé un contexte réactionnel : parmi1 ces 4 cellules la(es)quelle(s) classeriez-vous en cellule(s) hyperbasophile(s) ? 1. N°1 2. N°2 3. N°3 4. N°4 5. Aucune Vous avez confirmé un contexte réactionnel : parmi ces 4 cellules la(es)quelle(s) classeriez-vous en cellule(s) hyperbasophile(s) ? 1. N°1 0 2. N°2 0 3. N°3 2 4. N°4 2 0 5. Aucune 0 1 2 Polymorphisme réactionnel Cas particulier : Lymphocytose B polyclonale Chez le fumeur Plus fréquemment chez la femme Associée à une expression du HLA DR7 Hyperlymphocytoses Infections aiguës Infections chroniques Thyrotoxicose Tabagisme LLC Autres leucémies et lymphomes Lymphocytoses à grands lymphocytes à grains A partir de quelle valeur définissez vous une hyperlymphocytose dans votre laboratoire ? 1. > 2500 /µl 2. > 40 % 3. > 3000 /µl 4. > 5000 /µl 5. > 45 % 6. Ne sais pas 1 A partir de quelle valeur définissez vous une hyperlymphocytose dans votre laboratoire ? 1. > 2500 /µl 0 2. > 40 % 0 3. > 3000 /µl 1 4. > 5000 /µl 0 5. > 45 % 1 6. Ne sais pas 0 0 1