Lalvin VP41®: au-delà de la fermentation malolactique, une bactérie œnologique à fort impact sensoriel 74 résumé L’inoculation de bactéries sélectionnées aide à contrôler le déclenchement et la durée de la fermentation malolactique. Elle exerce aussi un effet positif sur l’arôme du vin et donc sa qualité sensorielle. La bactérie Lalvin VP41®, isolée à partir de vins Amarone Valpolicella, se distingue par son adaptabilité à de hautes teneurs en alcool (jusqu’à 16 % vol.) et par sa remarquable tolérance à un faible pH abstract (jusqu’à 3,1). Dans des conditions aussi difficiles et helps to control the start-up and the length of the sans inoculation d’une bactérie sélectionnée, où on malolactic fermentation. It also exercises a positive assiste souvent à un retard, voire à l’échec complet effect on the aroma of the wine and thus its quality. de la FML, Lalvin VP41 affirme son efficacité, grâce The bacterium Lalvin VP41®, isolated from Amarone à un vaste champ d’application. Valpolicella wines, distinguishes itself by its adapta- En parallèle, elle favorise la formation des esters bility with high contents in alcohol (until 16 %) and de fruits et intensifie l’arôme de baies rouges dans by its remarkable tolerance in a low pH (until 3.1). les vins rouges. Elle a un faible degré d’affinité avec In conditions so difficult and without inoculation of a l’acide citrique, ce qui en ralentit la dégradation selected bacterium, there is often a delay or even a et restreint la formation de diacétyle. Ainsi, Lalvin complete failure of the MLF. VP41 convient également pour l’élaboration des Lalvin VP41® confirms its efficiency due to a vast vins blancs en leur conférant des notes fruitées plus scope. It favors the formation of fruity esters and in- soutenues. tensifies the aroma of red berries in red wines. It has ® ® The inoculation of selected bacteria a low degree of affinity with citric acid, which slows Sibylle A. KRIEGER Lallemand In den Seiten 53, D-70825 Korntal-Muenchingen, Allemagne [email protected] +33562745555 Ann DUMONT Lallemand 1620, rue Préfontaine, Montréal (QC) Canada H1W 2N8 Sandra ESCOT Anthony SILVANO Magali DÉLÉRIS-BOU Lallemand 19, rue des Briquetiers, BP 59, 31702 Blagnac Cedex France Sibylle A. KRIEGER Mots clés Bactérie, adaptabilité, arômes down its degradation and therefore restricts the formation of diacetyl. Thus, Lalvin VP41® also suits for white wines by conferring them more steady fruity notes. Keywords Bacteria, adaptability, aromas elevage et conditionnement des vins Beyond the malolactic fermentation, a wine bacteria with high sensory impact 75 21 L a fermentation malolactique (FML) dans le vin découle de l’activité métabolique d’un nombre relativement faible de bactéries lactiques appropriées. On considère que la diminution de l’acidité et la modification des propriétés aromatiques du vin à la suite de cette seconde fermentation permettent d’améliorer la qualité du vin, en particulier celle des vins rouges mais aussi celle des vins blancs. Pour contrôler la FML, le recours à l’inoculation avec des bactéries sélectionnées a gagné en popularité auprès des producteurs de vins. En effet, dans des conditions de vinification difficiles (faible pH et très haute teneur en acide malique, ou très haut degré d’alcool), des bactéries œnologiques particulièrement vigoureuses sont nécessaires pour réussir la FML. Mais au-delà du bon déroulement de la FML, © Lallemand nos récentes études permettent de considérer la contribution sensorielle de certaines bactéries sélectionnées et ouvrent de nouvelles opportunités pour les vinificateurs. • Facteurs ayant un impact sur la fermentation malolactique Le SO2, le pH, la teneur en alcool et la température ont un impact notoire sur le déroulement de la FML dans le vin. Pour réussir la FML, les valeurs associées à ces facteurs doivent respecter les seuils établis pour la croissance bactérienne. Il convient de garder à l’esprit que ces facteurs agissent en synergie, c’est à dire que les influences combinées exercent un effet beaucoup plus important que la somme des facteurs individuels. Ainsi, l’influence positive d’un composant peut compenser l’influence négative Lalvin VP41®: au-delà de la fermentation malolactique, une bactérie œnologique à fort impact sensoriel 76 1 point chacun 2 points chacun 8 points chacun 10 points chacun Alcool (% vol) FACTEUR <13 13 – 15 15 – 17 > 17 ➔ Evaluation pH >3,4 3,1 – 3,4 2,9 – 3,1 < 2,9 ➔ SO2 libre (mg/L) <8 8 – 12 12 – 15 > 15 ➔ SO2 total (mg/L) <30 30 - 40 40 - 60 > 60 ➔ Température (°C) 18 - 22 14 – 18 ou 22 - 24 10-14 ou 22 - 24 < 10 ou >29 ➔ Besoins en azote de la levure Faibles Moyens Elevés Très élevés ➔ Sans problème Levure légèrement stressée FA ralentie ou arrêtée Contact prolongé avec la levure ➔ 2-4 4 – 5 ou 1 - 2 5 - 7 ou 0,5 - 1 > 7 ou > 0,5 ➔ <2 2-4 4-6 >6 ➔ Déroulement de la fermentation alcoolique Concentration initiale d’acide malique (g/L) Vitesse maximale de la FA (diminution de la valeur Brix/jour) Remarque : ce tableau d’évaluation ne tient pas compte des facteurs dont l’impact sur la FML est moins connu, dont la concentration d’oxygène dissous, la teneur en polyphénol, le compactage des lies, les résidus de pesticides, etc. RESULTATS Favorable : < 13 points – Surveiller le développement de la flore indigène (Brettanomyces, bactéries contaminantes, etc.) Inoculer rapidement avec des bactéries œnologiques sélectionnées. Plus ou moins favorable : 13 – 22 points – Sélectionner la bactérie adaptée pour le vin. Un nutriment bactérien peut être nécessaire. Difficile : 23 – 40 points – Utiliser de préférence une bactérie de type 1-STEP® adaptée au vin. Rajuster les conditions de manière à faciliter la FML : température, nutrition des bactéries, etc. Extrême : >40 points – Procéder à une analyse rapide ou consulter votre représentant Lallemand. Améliorer les conditions avant de procéder à l’inoculation : coupage, désacidification, température, nutrition des bactéries, etc. tableau 1 d’un ou plusieurs autres composants. Le tableau 1 présente les principaux facteurs influant sur la FML et peut aider à évaluer les chances de réussite de la FML dans un vin donné. La bactérie d’Œnococcus oeni Lalvin VP41® a été sélectionnée dans le cadre d’un projet de recherche européen conjoint, Craft in Fair Project, dont l’objectif était de déterminer la contribution d’Œnococcus oeni à la qualité et à la typicité, en lien avec le terroir, de vins européens. Pour la première fois, des caves commerciales Evaluation des facteurs influant sur la fermentation malolactique. Déroulement de la FML dans un vin blanc Trebbiano Toscano 2007 (Toscane, Italie) après l’inoculation spontanée avec différentes bactéries, en comparaison avec une FML spontanée; 13,8%vol., pH 3,3, température 16°C. figure 1 1,6 et des instituts viticoles provenant de différents pays ont mis leurs ressources en commun pour sélectionner une bactérie œnologique hautement efficace en tenant compte à la fois des aspects microbiologiques et œnologiques. Cette bactérie a été retenue pour son excellente résistance aux caractéristiques physicochimiques limitantes du vin. Les seuils d’application de Lalvin VP41® sont les suivants : jusqu’à 16 %vol. d’alcool, jusqu’à pH 3,1, jusqu’à un SO2 total de 60 mg/L, une activité optimale entre 16 et 24°C, et de faibles besoins en nutriments (ajout recommandé en conditions difficiles). Matériel et méthodes 1,4 1,0 0,8 spontanée VP41© souche ML1 souche ML2 souche ML3 0,6 0,4 0,2 ct . 22 o o ct . oc t. 20 oc t. 18 t. 16 o c ct . Temps (en jours) 14 t. oc 12 o oc t. 10 8 t. oc t. 6 ct . 4 oc pt . 2 o pt . se 28 30 se pt . 0,0 26 se Acide malique (g/L) 1,2 La bactérie Lalvin VP41® a été sélectionnée à partir d’un Amarone della Valpolicella. Quatre séries d’expérimentations ont été réalisées en blanc et en rouge, sur des matières premières difficiles, afin de démontrer l’intérêt de cette souche. ➔ Essai 1 : cet essai a été réalisé en Bourgogne sur un chardonnay 2002 affecté par les facteurs limitants suivants : pH faible (3,1), SO2 total élevé (50 mg/L), teneur en alcool moyenne (13,4 % elevage et conditionnement des vins 77 2,0 Cab 15% v/v, pH 3,55 Lalvin VP41 ® Cab 16% v/v, pH 3,56 Lalvin VP41® Shiraz 16.5% v/v, pH 3,61 Lalvin VP41® 1,5 Acide malique (g/L) vol.) et température de 17°C. Trois modalités ont été réalisées. Fermentation spontanée ; ensemencement avec Lalvin 31® ; ensemencement avec Lalvin VP41® et ensemencement avec ML 1, au dosage recommandé. ➔ Essai 2 : essai effectué sur des lots de 100 litres dans les caves expérimentales d’ISVEA (Toscane, Italie) (fig.1), un vin blanc Trebbiano Toscano 2007 a été inoculé simultanément avec quatre bactéries œnologiques différentes. Les moûts ont été inoculés avec la levure sélectionnée Cross Evolution® (25 g/hL), réhydratée au préalable avec le protecteur de levures GoFerm® Protect (30 g/hL) avant d’être répartis dans les cuves. Au bout de 24h, les bactéries œnologiques ont été mises en suspension dans l’eau à 20 °C pendant 15 minutes, conformément aux directives du fabricant, puis inoculés directement dans le moût en fermentation. Au premier tiers de la fermentation alcoolique (FA), on a ajouté 40 g/hL de Fermaid®E Blanc, un nutriment levurien spécifique. Le témoin est un lot non ensemencé (fermentation malolactique spontanée). La fermentation malolactique a été conduite à une température de 16°C. ➔ Essai 3 : en Australie, deux cabernet-sauvignon et une syrah (fig.2) du millésime 2005 ont été ensemençés avec Lalvin VP41® par l’AWRI. Les degrés alcooliques étaient respectivement 16%v/v ; 15%v/v et 16,5%v/v. Dans les chaudes régions viticoles de l’hémisphère sud, les hautes teneurs en alcool constituent le principal facteur limitant. ➔ Essai 4 : essai réalisé à Bordeaux en 2005 sur des vins de merlot très riches en tanins. Afin d’étudier l’influence de Lalvin VP41® sur les qualités sensorielles des vins, 3 autres séries d’essais ont été réalisées : ➔ Essai 5 : expérimentation réalisée par l’Australian Wine Research Institute (AWRI) sur un cabernet-sauvignon 2006 de Clare Valley (Australie) : fermentation alcoolique avec la levure sélectionnée Lalvin 2056®. Puis le pH a été porté à 3,3 et le vin a été inoculé avec trois souches ML différentes, Lalvin VP41, R1106, R1118, pour réaliser la fermentation malolactique à une température de 18°C en conditions particulièrement difficiles, avec un faible pH et une teneur élevée en alcool (14,7 % vol.). 1,0 0,5 0,0 5 10 15 Temps (en jours) 20 25 figure 2 ➔ Essai 6 : étude menée à l’AWRI sur la production de diacétyle de Lalvin VP41, composé participant à la note beurrée. Essai sur cabernetsauvignon 2008 (Adelaide Hills, Australie) : inoculation séquentielle avec différentes bactéries œnologiques. ➔ Essai 7 : essais sur chardonnay 2010 produits dans la région de Baden, en Allemagne. Observation de la cinétique de dégradation de l’acide malique dans un vin de faible pH (3,15) et à 13%vol. d’alcool, inoculé avec Lalvin VP41® à la fin de la FA, en comparaison avec deux souches citrate-négatives. Mesure des concentrations de diacétyle dans les essais et le témoin sans FML. Résultats et discussion Afin de vérifier et démontrer les bonnes performances de la souche Lalvin VP41®, des expérimentations ont été conduites dans différents pays en situation réelle. Elle a été évaluée sur le plan de la vitesse fermentaire, la résistance à l’alcool, la résistance aux tannins et sur sa qualité aromatique. Le lien entre l’acide citrique et la réduction du diacétyle a également été étudié. • Évaluation de la vitesse de fermentation Deux essais ont été réalisés afin d’évaluer la rapidité fermentaire de cette souche (essais 1 et 2). Dans le premier, la bactérie Lalvin VP41® a été comparée à trois souches de références : fermentation spontanée, Lalvin 31® et ML1. Les Cinétique de dégradation de l’acide malique dans des vins de cabernet et shiraz 2005 (Australie du Sud) après l’inoculation séquentielle par Lalvin VP41. Lalvin VP41®: au-delà de la fermentation malolactique, une bactérie œnologique à fort impact sensoriel 78 résultats (non présentés) montrent que Lalvin VP41® a une vitesse de fermentation supérieure aux souches de référence avec une durée totale de FML de 35 jours contre plus de 45 pour les références. La vitesse fermentaire de la souche est donc tout à fait satisfaisante. Dans le deuxième essai, présenté figure 1, sur un vin blanc de Toscane, la bactérie Lalvin VP41® a été comparée à quatre autres souches. Là encore, elle a été la plus rapide à terminer la FML, en 10 jours tandis que les autres modalités ont nécessité entre 16 et 25 jours. La FML spontanée ne s’est pas déclenchée. • Évaluation de la résistance à l’alcool : essai 3 La figure 2 présente les résultats d’essais en cave lors des vendanges de 2005 sur des vins rouges issus de cabernet-sauvignon et de syrah, en Australie. Dans les chaudes régions viticoles de l’hémisphère sud, les hautes teneurs en alcool constituent le principal facteur limitant. Dans ces conditions, LalvinVP41® a démontré une très grande tolérance lors de l’inoculation et après la fermentation alcoolique, et ce, même pour des teneurs en alcool supérieures à 15 % vol. • Évaluation de la sensibilité aux tanins : essai 4. Afin de vérifier la résistance de cette souche aux tanins, des essais ont été menés à Bordeaux en 2005 sur des vins de merlot très riches en tannins. Le merlot est un cépage naturellement riche en tannins galloylés connus pour inhiber Fermentation malolactique dans un vin de merlot 2005 (Bordeaux, France) ; 14 % vol., pH 3,5, SO2 total 52 mg/L, 23°C. la fermentation malolactique. Lalvin VP41® a permis une fermentation malolactique très rapide de 16 jours (fig. 3) tandis que la FML spontanée a nécessité plus de 30 jours. Cette souche a donc montré une grande résistance aux tannins galloylés. figure 3 3,0 Merlot, spontanée Merlot, Lalvin VP41© Acide malique (g/L) 2,5 2,0 1,5 1,0 0,5 0,0 0 5 10 15 20 25 Temps (en jours) 30 35 40 • Renforcement de l’arôme de fruits rouges des vins rouges L’AWRI a étudié l’influence de différentes bactéries œnologiques sur les qualités sensorielles et la teneur en composés aromatiques dans des vins de pinot noir, de cabernet-sauvignon et de merlot (Bartowsky et al. 2011).Tous les vins fermentés au moyen de Lalvin VP41® avaient une teneur elevage et conditionnement des vins 79 120 pH 3,3 110 Total des esters de fruits rouges (% relatif) 100 90 80 1 Évaluation sensorielle (par rapport au témoin sans FML) 0,5 0 Notes de framboise Fruits noirs frais -0,5 Fruits noirs cuits Fruité global R1118 R1106 VP41® Sans FML -1 figure 4 © Lallemand en esters de fruits rouges, notamment l’acétate de 2-méthyl propyl et le butanoate d’éthyle, sensiblement accrue. Lors de l’analyse sensorielle, ces vins ont également été jugés supérieurs pour l’arôme fruité global et pour les arômes de baies rouges. Dans l’essai 5, malgré un faible pH (3,3) et une teneur élevée en alcool (14,7 % vol.), les trois souches ont assuré la dégradation de l’acide malique, laquelle s’est déroulée lentement, mais en continu. Pour différentes valeurs de pH, le métabolisme des souches d’O. oeni exerce une influence notable sur la production des esters d’éthyle, qui contribuent au développement des notes de fruits rouges dans les vins de cabernet-sauvignon. La teneur totale en esters de fruits rouges a été mesurée (fig. 4) ainsi que l’impact sensoriel de LalvinVP41®. Malgré un faible pH de 3,3, la teneur totale de ces esters était nettement plus élevée dans les vins ayant achevé la FML par rapport aux vins sans FML. On a pu constater pour les souches d’O. oeni du type VP41® et R1106 des concentrations accrues des composés volatils se formant lors de la fermentation, en particulier ceux contribuant au développement d’un arôme de fruits rouges (Pineau et al., 2009). Cela démontre un lien clair entre l’accroissement de la teneur en esters d’éthyle et la perception sensorielle renforcée de notes de fruits rouges dans ces vins de cabernet-sauvignon après la FML avec Teneur totale en esters de fruits rouges et évaluation des propriétés sensorielles des vins de cabernet-sauvignon (Clare Valley, Australie du Sud, 2006) après la FML avec trois souches différentes d’Oenococcus oeni (présenté sous la forme de pourcentage relatif à un vin sans FML). Lalvin VP41®: au-delà de la fermentation malolactique, une bactérie œnologique à fort impact sensoriel 80 16 14 sans FML R1106 VP41© R1118 12 10 8 6 4 2 0 Clare Valley Adelaide Hills Landhorn Creek Padthaway figure 5 Concentration en diacétyle dans les vins de cabernetsauvignon 2008 (Adelaïde Hills, Australie) à la fin de la FML suivant une inoculation séquentielle (Bartowsky, 2011). Concentration en diacétyle dans des vins de chardonnay 2010 (Baden, Allemagne) après l’inoculation séquentielle avec Lalvin VP41 et deux bactéries citrates-négatives, par rapport au vin témoin sans FML. des souches spécifiques d’O. oeni (Bartowsky et al., 2011). L’AWRI a mené des essais comparables pour les millésimes 2008 et 2009 de vins de cabernetsauvignon issus du même domaine viticole de Clare Valley, en utilisant ces trois souches. Pour les deux millésimes, les souches d’Œnococcus oeni Lalvin VP41® et R1106 ont systématiquement produit des vins avec une concentration accrue des composés volatils se formant pendant la fermentation malolactique, lesquels favorisent l’apparition de l’arôme de baies rouges dans les vins de cabernet-sauvignon. Lors de la dégustation, on a également relevé des arômes de baies noires et rouges plus intenses dans ces vins de cabernet-sauvignon, de même que des arômes de fruits plus prononcés en fin de bouche. Ces essais, comme ceux menés avec d’autres variétés de vins rouges, démontrent que la FML achevée avec la souche Lalvin VP41® contribue à rehausser les arômes de fruits rouges. • Faible production de diacétyle De nombreux essais (Bach et al., 2003) ont démontré que l’acide acétique ne se forme pas pendant la fermentation malolactique active. Dans les faits, une légère augmentation n’a été tableau 2 Traitement Diacétyle (mg/L) FML avec Lalvin VP41® 0,12 FML avec ferment citrate-négatif 1 0,16 FML avec ferment citrate-négatif 3 0,12 Vin témoin sans FML 0,10 observée que pendant le dernier tiers de la FML, ou une fois la FML achevée, avec la dégradation de l’acide citrique. En fonction de l’oxygène présent ou disponible et du potentiel redox du vin, l’acide citrique est le plus souvent transformé en acide acétique, dont une partie se transforme en diacétyle. Pendant la FML, le diacétyle est un important métabolite des bactéries lactiques. En petites quantités, il constitue un composant aromatique qui peut être recherché. En grandes quantités, il peut entraîner l’apparition d’une note beurrée indésirable dans les vins blancs. Nos propres essais, ainsi que des études menées au Geisenheim Research Institute (Knoll et al., 2011), ont montré que sous l’effet de Lalvin VP41® la dégradation de l’acide citrique survenait tardivement, vers la fin de la FML, voire après son achèvement. Une autre étude, l’essai 6, menée à l’AWRI (Bartowsky, 2010) a également démontré que cette bactérie ne produisait que très peu de diacétyle. La figure 5 montre les teneurs en diacétyle dans un cabernet-sauvignon 2008 (Adelaide Hills, Australie) après l’inoculation séquentielle avec différentes bactéries œnologiques. Lalvin VP41® a produit les plus petites quantités de diacétyle. Lors d’essais conduits à Veitshöchheim, en Allemagne (Köhler et al., 2011), Lalvin VP41® a été comparée, notamment, à des bactéries ML citrate-négatives. Les teneurs en diacétyle dans les vins fermentés avec VP41® étaient aussi faibles que dans les vins qui avaient été ensemencés avec les cultures citrate-négatives. Ces résultats ont été confirmés lors de l’essai 7 mené sur des vins de chardonnay du millésime 2010 produits dans la région de Baden, inoculés avec Lalvin VP41® à la fin de la FA, en comparaison avec deux souches citrate-négatives. Lalvin VP41® a agi efficacement malgré le faible pH (3,15) et a dégradé l’acide malique en moins de trois semaines, alors que les deux cultures citrate-négatives ont mis cinq et six semaines respectivement pour arriver au même résultat. Les concentrations de diacétyle (tabl. 2) étaient faibles dans les trois vins soumis à la FML (0,12 - 0,16 mg/L) et ne présentaient qu’une légère augmentation par rapport au vin sans FML (0,1 mg/L). elevage et conditionnement des vins 81 Conclusion Sélectionnée à partir d’un Amarone della Valpolicella, Lalvin VP41® est une bactérie œnologique vigoureuse qui se montre tout aussi efficace dans les vins présentant un faible pH et une forte acidité, que dans les vins ayant une haute teneur en alcool. Les études menées dans pratiquement toutes les régions viticoles du monde ont confirmé son efficacité. Lalvin VP41® bénéficie en plus d’un métabolisme spécifique qui favorise la formation des esters fruités et, par conséquent, intensifie l’arôme de baies rouges dans les vins rouges. Elle présente un faible degré d’affinité avec l’acide citrique, ce qui en ralentit la dégradation et restreint la formation du diacétyle. Ainsi, Lalvin VP41® convient également pour les vins blancs en leur conférant des notes fruitées plus soutenues. Son vaste champ d’application et son implantation rapide expliquent le grand succès que remporte Lalvin VP41® depuis sa mise en marché, en 2002. Bibliographie • Bach H. P. & Krieger S., 2003. BSA – Wechselwirkung mit Hefe und Hefenährstoffen [MLF –Interaction with yeast and yeast nutrients]. Der Deutsche Weinbau. 16/17, 22-25. • Bartowsky E., Costello P., Krieger-Weber S., Markides A., Leigh F. & Brooke T., 2011. Influence de la FML sur le caractère fruité des vins rouges: de la chimie à la science sensorielle. Wine & Viticulture Journal. 26 (6), 27-33. • Köhler H. J., Maier C., Burkert J. U. & J. V. Herrmann, 2011. Diacetyl – heute noch ein Problem? Das Deutsche Weinmagazin. 21, 8-13. • Pineau B., Barbe J. C., Van Leeuwen C. & Dubourdieu D., 2009. Examples of Perceptive Interactions Involved in Specific “Red-” and “Blackberry” Aromas in Red Wines. Journal of Agricultural and Food Chemistry. 57, 3702-3708