12/10/16 La cellule procaryote ribosomes éléments obligatoires Les chromosomes [paroi] chromosome membrane cytoplasmique cytoplasme [cytosquelette] La mitose éléments facultatifs pili sexuels • • • • • •• • • vésicules de gaz microEPS fimbriae compartiment (capsules) et/ou couche S plasmide membranes internes endospore magnétosomes flagelle inclusions de réserve (PHB, volutine, glycogène) Génome des procaryotes Généralement : 1 molécule DNA circulaire dans cytoplasme : Le chromosome bactérien. Gamme de taille : 0.58 - 13.0 Mpb E. coli : 4 640 000 paires de bases = 4 640 kpb (kilopaires de bases) = 4,640 Mpb (mégapaires de bases) Peu de gènes à introns. Plasmides : éléments génétiques extrachromosomiques. Indépendants du chromosome. ADN (circulaire ou linéaire). Pas de forme extracellulaire (≠ virus). Chez bcp de procaryotes et qques Eukarya. Ne contiennent pas de gènes indispensables au fonctionnement cellulaire (≠ chromosome). réticulum endoplasmique granuleux (REG) noyau La cellule eucaryote lysosomes membrane plasmique nucléole mitochondrie • • • • • • • • • Chromosomes des eucaryotes - Molécules d ADN linéaires comportant de nombreux gènes - Localisés dans le noyau - Il existe deux formes : forme condensée (compactée) ou non. gènes Homme : cytosquelette 1 chromosome fait : 50 000 000 à 247 000 000 pb (50 - 247 Mpb) • • • • • • • • • Existence de 23 chromosomes ≠ ribosomes cytoplasme centrosome Appareil de Golgi chromosomes BioGen 8 - 2016-2017 - DC Gillan UMons Longeur totale : (2003) 3 177 Mpb femme (génome haploïde) 3 079 Mpb homme 1 12/10/16 Détail d un chromosome Chromatides soeurs ADN : 1 pb = 0.34 nm Longeur totale : = 3 177 Mpb femme (génome haploïde) 3 079 Mpb homme 1 mètre de long (génome haploïde non compacté) Réplication de l ADN (réplisome) Chromatides soeurs compaction ADN linéaire, répliqué Non condensé ADN linéaire Non condensé Taille des chromosomes centromère centromère ADN linéaire, répliqué Condensé Chez les eucryotes l ADN forme un complexe avec des protéines : la chromatine (ADN + protéines) Les protéines de la chromatine sont les histones Les histones ont une charge + (bcp lysine et arginine) Sont très conservées chez les eucaryotes. 1 pb = 0.34 nm Homme : Les histones forment des octamères : 1 chromosome non compacté : 1.7 cm - 8.4 cm H2A 1 chromosome compacté : 1 - 10 µm H2B H4 H3 Association à l ADN pour former la fibre de 10 nm La fibre de 10 nm ADN nucléosomique (double hélice) La fibre de 30 nm histone H1 nucléosome 30 nm 10 nm nucléosome ADN internucléosomique (double hélice) BioGen 8 - 2016-2017 - DC Gillan UMons 2 12/10/16 Les chromosomes sont visibles pendant la mitose Caryotype Homo sapiens : 23 paires de chromosomes Mitose = division cellulaire chez les eucaryotes BioGen 8 - 2016-2017 - DC Gillan UMons Le nombre de chromosomes est caractéristique de l espèce. Poulet : 78 chromosomes (39 paires) 3 12/10/16 Chromatine = ADN + protéines (histones) Hétérochromatine : chromatine condensée; l'ADN est inaccessible à la transcription. Forme de la chromatine au moment de l interphase (amas irréguliers visibles au microscope photonique). Euchromatine : forme peu compacte, disponible pour la transcription. La mitose La division cellulaire ou mitose Rôles - Reproduction : ex : amibes - Croissance et développement - Régénération des tissus stade 1 cellule Oeuf fécondé = zygote embryon humain au stade 8 cellules BioGen 8 - 2016-2017 - DC Gillan UMons 4 12/10/16 Walther Flemming (1843 - 1905) Biologiste allemand, père de la cytogénétique (étude des chromosomes) Grâce à des colorants contenant de l’aniline il visualisa la chromatine. Voit que la chromatine forme des structures allongées dans le noyau (chromosomes, nommés par Wilhelm von Waldeyer-Hartz) Etudie la division cellulaire et la nomme « mitose » Zellsubstanz, Kern und Zelltheilung, 1882 La mitose permet de répartir la même quantité d’ADN entre les deux cellules filles. Mécanisme très fidèle. Etapes de la mitose 2n cellule parentale 0. Interphase 1. 2. 3. 4. 5. cellules filles 2n 2n Prophase Prométaphase Métaphase Anaphase Télophase Génomes identiques formation d un clone cellulaire Reproduction asexuée (Protozoa, hydres, stolons des plantes, ...) Les phases du cycle cellulaire Etapes de la méiose interphase : 90% du temps phase G1 phase S phase G2 0. Interphase synthèse ADN - Réplication de tous les chromosomes (dans le noyau) Les chromatides soeurs restent liés par le centromère S G2 G1 centromère chromatides soeurs chromosome chromosome répliqué pas de synthèse d ADN Synthèse de protéines et d organites. M phase mitotique (phase M) + cytocinèse 10% du temps BioGen 8 - 2016-2017 - DC Gillan UMons 5 12/10/16 Exemple d une cellule humaine Cycle complet : 24h - Le centrosome ( de l aster 10-12 h ) se dédouble et s entoure de microtubules Phase G2 Interphase aster S G2 G1 5-6 h 4-6 h M >1h noyau ADN nucléole 9 triplets de microtubules Le centrosome Organite non membraneux qui organise les microtubules tout au long du cycle cellulaire. On le nomme également centre organisateur des microtubules (MTOC). Une centriole 1 centrosome = 2 centrioles perpendiculaires (cellules animales). 1 centriole = 9 triplets de microtubules. Les microtubules sont des protéines du cytosquelette Microtubule en coupe transversale Ce sont des polymères de tubuline α ( 55 kDa) et β ( Tubuline α et β forment des protofilaments Protofilament 55 kDa) hétérodimère Tubuline α Tubuline β 13 protofilaments (-) (+) 80 Å polarité hélice 13 dimères/tour 25 nm microtubule 200 nm - 25 µm BioGen 8 - 2016-2017 - DC Gillan UMons 6 12/10/16 1. Prophase Rôle des microtubules • Maintien de la forme cellulaire La condensation de l ADN en chromosomes débute dans le noyau. Chromosomes = longs filaments très fins • Mobilité cellulaire (cils et flagelles) • Mouvement des organites (« rails ») centromère • Mouvements des chromosomes (mitose) Les microtubules peuvent s’allonger grâce à l’ajout de dimères à une de leurs extrémités. Ils peuvent aussi se démonter. condensation chromatides soeurs La cellule prend une forme sphérique (désorganisation du cytosquelette) fuseau de division aster Les nucléoles disparaissent L enveloppe nucléaire commence à se fragmenter Le fuseau de division se constitue dans le cytoplasme : il s agit d un assemblage de microtubules, qui prennent l aspect d un fuseau, et qui se prolongent entre les deux centrosomes. Les microtubules rayonnent des centrosomes en une formation étoilée appelée aster. démantèlement de l enveloppe nucléaire Les centrosomes s éloignent l un de l autre 2. Prométaphase L enveloppe nucléaire achève sa fragmentation Chaque chromatide possède un kinétochore dans la région du centromère : complexes de 45 protéines ≠ capables de fixer l extrémité d un microtubule Les fibres du fuseau envahissent le contenu du noyau et interagissent avec les chromosomes, qui ont poursuivit leur condensation. • Certains microtubules s attachent aux kinétochores et deviennent des microtubules kinétochoriens. • Les microtubules polaires interagissent avec leur vis-à-vis du pôle opposé. déplacement du chromosome kinétochore microtubule kinétochore protéines motrices (dynéine et kinésine) BioGen 8 - 2016-2017 - DC Gillan UMons sous-unités de tubuline chromosome 7 12/10/16 Le nombre de microtubules attachés au kinétochore varie selon les espèces : µT kinetochoriens µT de l aster µT polaires - Levure : un microtubule kinétochorien / chromosome - Mammifères : plusieurs microtubules kinétochorien / chromosome µT µT Levures Mammifères Métaphase 3. Métaphase Phase la plus longue : 20 minutes µT kinétochoriens Les centrosomes sont aux extrémités opposées de la cellule plaque équatoriale Les chromosomes s alignent sur la plaque équatoriale (plan imaginaire à égale distance des deux pôles du fuseau) Chaque kinétochore d’une paire fait face à un pôle ≠ µT polaires Métaphase 4. Anaphase Phase la plus courte : quelques minutes microtubules kinétochores chromosomes Le centromère de chaque chromosome se sépare en deux, libérant les chromatides soeurs, qui deviennent des chromosomes à part entière. Les chromatides soeurs migrent vers des pôles opposés à mesure que les microtubules kinétochoriens raccourcissent au niveau du kinétochore (« anaphase A ») Les microtubules polaires s allongent ce qui éloigne les pôles l’un de l’autre (« anaphase B ») Les deux pôles possèdent des jeux équivalents et complets de chromosomes. BioGen 8 - 2016-2017 - DC Gillan UMons 8 12/10/16 Métaphase Anaphase plaque équatoriale 5. Télophase et cytocinèse plaque équatoriale Télophase L enveloppe nucléaire commence à se reconstituer aux deux pôles. sillon de division Les nucléoles réapparaissent Les chromosomes commencent à perdre leur organisation condensée La caryocinèse est terminée. Cytocinèse : un sillon de division étrangle la cellule mère et la sépare en deux cellules filles. Les chromosomes dans leur état condensé ne sont visibles qu à la mitose. Des bandes apparaissent après coloration. Nomenclature : BioGen 8 - 2016-2017 - DC Gillan UMons La coloration de Feulgen rend visible, au microscope photonique, des bandes sombres fortement colorées, correspondant à des régions de chromatine condensée et des bandes plus claires, moins condensées. 9 12/10/16 Mitose et cellules végétales Coenocyte – Plasmode - Syncytium Les cellules végétales possèdent une paroi Chez certains organismes la caryocinèse n est pas toujours suivie de la cytocinèse : formation d un coenocyte contenant plusieurs noyaux. La cytocinèse diffère entre cellules animales et végétales sillon de division (anneau contractile) plaque cellulaire Termes synonymes : Plasmode Cellules végétales : accumulation équatoriale de vésicules issues de l appareil de Golgi. Fusion des vésicules et formation de la plaque cellulaire. Syncytium Ex : chez le Fungi Chromosomes polytènes chez Axarus Endomitose • Parfois l ADN se réplique de nombreuse fois (x 1000, x 10 000...) sans qu aucune caryocinèse ni aucune cytocinèse n ait lieu et les copies des chromosomes restent associées : chromosomes polytènes ou géants Ex : chez les Diptères (drosophile, chiromomes) (cellules des glandes salivaires) • Différence avec les cellules polyploïdes (les copies ne s associent pas et ne sont donc pas visibles) Ex: hépatocytes Les chromosomes polytènes avaient été observés par Flemming Axarus sp Phyl. Arthropoda Cl. Insecta O. Diptera BioGen 8 - 2016-2017 - DC Gillan UMons 10 12/10/16 Chironomus plumosus Linné Phyl. Arthropoda Cl. Insecta O. Diptera F. Chironomidae vers de vase Rôle des chromosomes polytènes ? Augmenter l expression génique Ex : dans glandes salivaires des larves de diptères, juste avant la pupation Autres exemples connus chez : - Protozoaires (ex: macronucléus de certains ciliés) - Plantes (ex: tissu ovarien de Phaseolus coccineus) - Mammifères (ex: cellules géantes du trophoblaste du placenta) Définition de la méiose La méiose Processus au cours duquel une cellule eucaryote diploïde se transforme en 4 cellules haploïdes 2n gamètes ou spores n n n n • Processus essentiel pour la reproduction sexuée • Les 4 gamètes ont un génome ≠ les uns des autres • Deux gamètes peuvent fusionner pour former un zygote (2n) BioGen 8 - 2016-2017 - DC Gillan UMons 11 12/10/16 Cycle de développement chez les organismes sexués Rappel : la mitose 2n 2n Individu A Individu B méiose 2n méiose ... n n n n cellule prentale n ... n n n n cellules filles n 2n 2n fécondation 2n zygote 2n mitose Individu C Génomes identiques formation d un clone cellulaire Reproduction asexuée (Protozoa, hydres, stolons des plantes, ...) La formation des gamètes par méiose = gamétogénèse. Cellule de départ = gamétocyte ou méiocyte. Exemples de gamètes : Animalia : La gamétogénèse se déroule dans les gonades : - ovaires - testicules ovules (oogénèse) spermatozoïdes (spermatogénèse) Plantae : Gamètes mâles = spermatozoïdes Gamètes femelles = ovules Localisation des gonades chez Homo sapiens La gamétogénèse se déroule dans les gamétanges : - archégones, ovaires ovules ou oosphères - anthéridies (étamines) spermatozoïdes (pollen) anthérozoïdes Bryophytes Anthéridie Archégone BioGen 8 - 2016-2017 - DC Gillan UMons 12 12/10/16 Remarques - Pas de méiose chez Bacteria et Archaea - Certains Eukarya ne font pas de méiose : Excavata : euglènes Metazoa : rotifères (parthénogénèse) euglènes rotifères Rem : ovaire non visible ici Etapes de la méiose Méiose 0. Interphase Divison réductionnelle Division équationnelle 1. Prophase I a. Leptotène b. Zygotène c. Pachytène d. Diplotène e. Diakinèse 2. Métaphase I 3. Anaphase I 4. Télophase I 5. 6. 7. 8. Méiocyte (2n) Prophase II Métaphase II Anaphase II Télophase II Division réductionnelle Division équationnelle Gamètes (n) - Le centrosome ( de l aster Etapes de la méiose ) se dédouble et s entoure de microtubules 0. Interphase - Réplication de tous les chromosomes (dans le noyau) - Les chromatides soeurs restent liés par le centromère aster centromère chromatides soeurs noyau chromosome chromosome répliqué BioGen 8 - 2016-2017 - DC Gillan UMons ADN 13 12/10/16 1.a. Prophase I, stade leptotène (leptos, « mince ») 1.b. Prophase I, stade zygotène (zugon, « joug; couple ») La condensation de l ADN en chromosomes débute dans le noyau. Chromosomes = longs filaments très fins Appariement des chromosomes homologues (≠ mitose). La condensation de l ADN se poursuit. centromère condensation chromatides soeurs (non visibles) Exemple pour 2n = 6 1.c. Prophase I, stade pachytène (pachys, « épais ») Les chromosomes ont l aspect de filaments épais. Les chromosomes homologues s accolent avec précision (processus de synapsis) grâce à un complexe protéique : le complexe synaptonémal. Enjambement tétrade ou bivalent Enjambement possible : échanges de chromatides non soeurs entre certains chromosomes homologues (« crossing-over ») chiasmas non visible au microscope à ce stade! 1.d. Prophase I, stade diplotène (diplos, « double ») Remarque : Le complexe synaptonémal est dégradé Eloignement des chromosomes homologues de chaque paire (restent accolés aux chiasmas) • Oogénèse humaine : La méiose débute dans l embryon A la naissance : les oocytes sont bloqués en stade diplotène A la puberté : la méiose reprend • Spermatogénèse humaine : Tout débute à la puberté. Les chiasmas maintiendront les chromosomes ensembles jusqu à l anaphase I BioGen 8 - 2016-2017 - DC Gillan UMons 14 12/10/16 1.e. 1.e. Prophase I, stade diakinèse (kinéto, « mouvement ») fuseau de division Chromosomes : Les chromosomes se déplacent vers le centre de la cellule Les tétrades sont bien visibles. aster Noyau : La membrane nucléaire se désintègre en vésicules. Le nucléole disparaît. chiasmas Fuseau : Le fuseau de division apparaît. tétrade démantèlement de l enveloppe nucléaire 2. Métaphase I 2. Métaphase I plaque équatoriale Les paires de chromosomes homologues s alignent sur la plaque équatoriale, un chromosome face à chaque pôle. Chaque chromosome homologue est fixé aux microtubules kinétochoriens d’un pôle. Trois types de microtubules : - Microtubules de l aster - Microtubules kinétochoriaux - Microtubules polaires centromère avec kinétochore 3. Anaphase I 3. Anaphase I plaque équatoriale Les chiasmas se rompent. Les chromosomes migrent vers les pôles, guidés par le fuseau de division. - longeur microtubules kinétochoriaux - longeur microtubules polaires Les chromatides soeurs restent liées par leur centromère et se dirigent enemble vers le même pôle. BioGen 8 - 2016-2017 - DC Gillan UMons 15 12/10/16 4. Télophase I et cytocinèse 4. Télophase I et cytocinèse - Un jeu haploïde complet de chromosomes, chacuns d’eux encore formé de deux chromatides soeurs, est présent à chaque pôle de la cellule. - Cellules animales : un sillon de division apparaît - Cellules végétales : une plaque cellulaire se constitue sillon de division Chez certaines espèces : - Les chromosomes sortent de leur état condensé; - Les membranes nucléaires et les nucléoles se reforment; - Présence d une interphase II, durée variable, sans réplication ADN. 5. Prophase II 5. Prophase II Le centrosome se dédouble. Dispariton membrane nucléaire et nucléole (si reformés). Un nouveau fuseau de division se forme. Les chromosomes se déplacent vers une nouvelle plaque équatoriale. 6. Métaphase II 7. Anaphase II plaque équatoriale BioGen 8 - 2016-2017 - DC Gillan UMons plaque équatoriale 16 12/10/16 7. Anaphase II 8. Télophase II et cytocinèse Les centromères de chaque chromosome se séparent et les chromatides soeurs deviennent indépendants Les chromatides soeurs se dirigent vers les pôles opposés de la cellule. Reformation de l enveloppe nucléaire Chaque cellule est génétiquement différente des autres et de la cellule mère. 8. Télophase II et cytocinèse Les noyaux se forment. Les chromosomes commencent à sortir de leur état condensé. La cytocinèse à lieu. Résultat de la méiose : Chaque cellule possède un jeu haploïde de chromosomes non répliqués. Chaque cellule est génétiquement différente des autres et de la cellule mère. Remarque : Anomalies du nombre des chromosomes Métaphase I Non-disjonction : plaque équatoriale Les χ homologues ne se séparent pas pour un bivalent donné (anaphase I) ou les chromatides soeurs en anaphase II. →#gamète anormal →#zygote et individu anormal Nombre anormal de chromosomes = aneuploïdie - 3 exemplaires d’un χ#: individu trisomique pour le - 1 exemplaire monosomique Exemple : syndrome de Down (trisomie 21); syndrome de Patau (trisomie 13); syndrome d Edward (trisomie 18). BioGen 8 - 2016-2017 - DC Gillan UMons centromère avec kinétochore 17 12/10/16 Non-disjonction Anaphase I En résumé : plaque équatoriale Trois caractéristiques de la méiose (≠ mitose) - Alignement des chromosomes homologues (synapsis). Tétrades. - Enjambement, chiasmas. - Le tétrades se placent sur le plan équatorial et les chromosomes homologues sont séparés. La méiose contribue à la diversité génétique des organismes sexués : - Assortiment indépendant des chromosomes Assortiment indépendant des X Exemple n=2 Métaphase I indépendance - L enjambement - La fécondation aléatoire Reproduction sexuée →#diversité génétique → évolution Anaphase I Enjambement Assortiment indépendant des X →#nombre élevé de possibilités en métaphase I Nombreux enjambements possibles sur toute la longeur du exemple n=2 n=3 → 4 possibilités (2 2 ) → 8 possibilités (2 3 ) Les X sont recombinés. Homme : n = 23 → 8 388 608 possibilités (2 23) Millions de possibilités ≠ pour 2 X homologues ! Rem : assortiment indépedant également en métaphase II ! 2 23 x 2 23 = 2 46 possibilités Homme : 1-3 enjambements / paire de X Un chromosome humain comporte : 50 000 000 à 247 000 000 pb (50 - 247 Mpb) BioGen 8 - 2016-2017 - DC Gillan UMons 18 12/10/16 Fécondation aléatoire Zygote = une combinaison du jeu de X pour Histoire de la Méiose et Sans tenir compte de l enjambement : 2 46 x 2 46 = 2 92 zygotes possibles ! Darwin : 1859 Mendel : 1865 1878 : Première description chez l oursin par Oscar Hertwig (1849-1922) 1883 : Description au niveau des chromosomes par Edouard Van Beneden (1846-1910) (ULg) chez l ascaris. 1890 : Auguste Weismann (1834-1914). Note que deux divisions cellulaires sont nécessaires. 1911 : Thomas Hunt Morgan (1866-1945) : observation des enjambements chez la drosophile. Les gènes sont transmis par les chromosomes. Diversité des cycles de développement sexués • Animaux (+ certains Protozoa) : Seuls les gamètes sont n Organisme (2n) → méiose → gamètes (n) Gamètes → fécondation → zygote (2n) → croissance (mitose) → organisme (2n). • Végétaux (+ certaines algues) : Alternance de génération • Fungi (+ certains Protozoa et algues) : Méiose au stade zygote Gamètes n → zygote 2n → méiose immédiate → cellules n → mitose → organisme multicellulaire n Pas d individu pluricellulaire 2n - phase multicellulaire (2n) = sporophyte méiose → spores (n) - spores (n) → phase multicellulaire (n) = gamétophyte →#mitose → gamètes (n) - fécondation → zygote (2n) → sporophyte (2n) En résumé : éléments clés • Méiose = processus au cours duquel une cellule eucaryote diploïde se transforme en 4 cellules haploïdes : gamètes. Organismes diplophasiques Organismes haplo-diplophasiques Organisme haplophasique • Les méiocytes subissent la méiose dans les gonades ou les gamétanges • Grande variabilité de gamètes chez un même individu ≠ cellules parentales • Deux divisions successives (réductionnelle et équationnelle) • Reproduction sexuée → diversité génétique → évolution - Assortiment indépendant - Enjambement - Fécondation aléatoire BioGen 8 - 2016-2017 - DC Gillan UMons 19