Morbillivirus - About WIV-ISP

Laboratoire de référence Morbillivirus
Morbillivirus 1
1. Coordonnées du Laboratoire de Référence
Dr B. BROCHIER I.S.P. - Virologie Rue J. Wytsman, 14 1050 Bruxelles
Tél. : [phone] Fax : [phone] E-mail : [e-mail]
2. Responsable du programme – personne de contact
Veronik Hutse
Tél : [phone]
Fax : [phone]
Email : [e-mail]
3. Objectifs
La section de Virologie comprend le Centre National de la Rougeole dans le cadre du programme d’élimination de la
rougeole coordonné par l’Organisation Mondiale de la Santé (OMS). Le Bureau régional pour l’Europe de l’Organisation
mondiale de la santé a pour objectif d’éliminer la rougeole vers 2010. A cet effet, une surveillance continue, où les cas
cliniques suspects de rougeole sont confirmés par le laboratoire, est nécessaire pour déclarer la Belgique indemne de
rougeole.
Les différentes missions du Centre National de la Rougeole sont :
• effectuer le diagnostic sérologique (ELISA sur sérum et salive) et moléculaire (PCR sur frottis nasopharyngés et
salive, génotypage sur frottis nasopharyngés) sur échantillons prélevés chez des patients cliniquement suspects
de rougeole;
• confirmer la rougeole lors d’épidémie sur base d’échantillons cliniques;
• participer à la surveillance et à d’autres études épidémiologiques dans la population;
• développer et valider les techniques de diagnostic moléculaire pour la détection de la rougeole dans la salive.
Communication des résultats de laboratoire:
• la section d’Epidémiologie de l’ISP (Dr Martine Sabbe)
• les Communautés
• l’OMS (rapportage mensuel) http://data.euro.who.int/cisid
• les médecins et les laboratoires cliniques.
Collaboration : section d’Epidémiologie de l’ISP.
4. Accréditation
L’accréditation de l’OMS a été obtenue pour 2009 sur base :
• de la réalisation de tests d’aptitude inter-laboratoires organisés par l’OMS (obtention d’un score de 20/20)
• de la communication d’un résultat dans un délai de 7 jours
• d’autres normes de laboratoire qui doivent être achevées.
L’accréditation BELAC a été obtenue en 2009 pour la détection des IgM anti-virus de la rougeole au moyen du kit
Enzygnost® Anti-Measles IgM ELISA (Dade Behring).
5. Réalisations en 2009
Confirmation du diagnostic de la rougeole au laboratoire
Lors d’une suspicion clinique de rougeole chez un patient, les prélèvements suivants peuvent être effectués :
• sérum et/ou salive pour le diagnostic sérologique de la rougeole (détection des anticorps IgM)
• frottis naso-pharyngé et/ou salive pour le diagnostic moléculaire (détection de l’ARN du virus de la rougeole par
PCR et génotypage).
Pour répondre aux recommandations de l’OMS (analyse du plus grand nombre possible d’échantillons prélevés chez
des patients cliniquement suspects) et communiquer le résultat au patient dans un délai de 7 jours, les
médecins/pédiatres/généralistes ont été invités à prélever préférentiellement un échantillon de salive.
Lorsque seul un échantillon de sérum est disponible, le diagnostic est uniquement réalisé par sérologie (détection d’IgM
par ELISA). Si l’échantillon est IgM rougeole négatif, celui-ci est systématiquement testé pour les IgM anti-rubéole, selon
les prescriptions de l’OMS, en raison de la similitude de symptômes cliniques dans les deux infections.

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Résultats
En 2009, un diagnostic de confirmation au laboratoire de la rougeole a été demandée pour 74 patients (tableau 1 et figure
1).
Tableau 1 : Morbillivirus : Nombre d’échantillons reçus et d’analyses effectuées pour la détection des anticorps IgM (ELISA) et de l’ARN
viral (nested RT-PCR) (N, 2009)
NN
Prélèvement éch. EQV* N + N + testés
Sérum 42 3 34 5 - - 42
Frottis nasopharyngé 12 - - - 5 7 12
salive 6 - 4 2 3 2 11
Frottis nasopharyngé + salive 14 0 7 7 8 6 28
Total 74 3 45 14 16 15 93
* EQV= résultat indéterminé k110_t1ref
Nested-RT-PCRIgM
Figure 1 : Morbillivirus : Evolution du nombre d’échantillons reçus et analysés pour la détection d’anticorps IgM (ELISA) et de l’ARN viral
(nested RT-PCR) pendant la période 2003 – 2009
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
2003 2004 2005 2006 2007 2008 2009
Année
N
IgM et/ou ARN négatif pour la rougeole
indéterminé pour la rougeole IgM
IgM et/ou ARN positif pour la rougeole
Conclusions
45 patients furent IgM négatifs pour la rougeole et ont ensuite été testés pour les IgM rubéole. Tous se sont révélés
négatifs.
La rougeole a été confirmée chez 21/74 patients : 5 IgM+ (sérum), 7 ARN+ (frottis naso-pharyngé), 2 IgM+ et ARN+
(salive), 6 IgM+ et ARN+ (frottis naso-pharyngé + salive) et 1 IgM+ (salive). La détection de l’ARN par PCR a permis de
déterminer le génotype du virus chez 15 de ces 21 patients. Deux d’entre eux appartenaient au génotype D4, 6/15 au
génotype D5 et 7/15 au génotype A (rougeole post-vaccinale).
Pour ce qui concerne un des deux cas atteint par le génotype D4, une importation en provenance du Royaume-Uni fut
suspectée, car le patient et sa famille avaient passé des vacances dans ce pays au cours d’une période où sévissait une
épidémie.
Pour les six échantillons du génotype D5, il s’agit de 2 enfants d’une même famille habitant en Flandre, 2 enfants d’une
même famille habitant en Wallonie et 2 autres cas isolés. Il y a pas eu de contact entres les 2 familles et les cas isolés.
Aucun lien épidémiologique n’a réellement pu être établi entre ces 6 cas.
On peut juste dire que trois de ces six personnes revenaient des sports d’hiver en France où circulait ce génotype durant
cette période : deux cas de la famille habitant en Flandre et un cas isolé habitant en Wallonie.
Développement et validation des tests diagnostique moléculaires :
• Diagnostic moléculaire dans les frottis naso-pharyngés et dans la salive (in-house nested RT-PCR) => ré-
évaluation des tests déjà validés sur un autre appareil.
• Génotypage sur salive et sur frottis naso-pharyngé (test in-house).

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6. Publications en 2009
• Jaarrapport FOD Volkgezondheid - DG2 ‘Eliminatie van polio en mazelen in België’ samen met afdeling
Epidemiologie, Dr. Tinne Lernout en Dr. Martine Sabbe.
• Actieplan 2009-2010 voor de Eliminatie van mazelen en rubella in België
• ‘An outbreak of measles in orthodox Jewish communities in Antwerp, Belgium, 2007 – 2008: different reasons for
accumulation of susceptibles’. T. Lernout, E. Kissling, V. Hutse, K. De Schrijver and G. Top. Euro Surveillance
2009 Jan 15;14(2). pii: 19087