Information des patients

Versie:01/05/2016 ARG-F-2121.07 IC vers restmateriaal wetenschap (FR ).doc 1/7
CONSENTEMENT D’UN DON DE MATERIEL
SURNUMERAIRE à LA RECHERCHE SCIENTIFIQUE
Information destinée aux patients
Faire un don de matériel surnuméraire
Vous allez bientôt subir un traitement par FIV / ICSI. Pendant ce traitement des ovocytes seront
prélevés, du sperme utilisé et des embryons créés. Dans certains cas une partie de ce matériel ne
sera pas utilisée pour le traitement et sera généralement détruite. Cela concerne entre autre les
ovocytes immatures non fertilisés, la fécondation anormale, les embryons de mauvaise qualité, les
embryons anormaux après un diagnostic génétique préimplantatoire. Matériel surnuméraire comme le
liquide folliculaire avec lequel les ovocytes ont été en contact et le milieu de culture dans lequel l'
embryon a été cultivé ne sont plus utilisés.
Consentement et refus
Le don de matériel est non obligatoire. Si vous consentez à participer à un projet de recherche, vous
êtes invités à signer le formulaire de consentement destiné aux deux partenaires (voir dernière page).
Vous aurez le droit de changer d’avis et de révoquer votre don de gamètes ou embryons in vitro jusqu’
au commencement de l’étude. Si vous ne désirez pas donner du matériel surnuméraire à la recherche
ou que votre consentement est révoqué, cela n’aura aucun impact au niveau de la qualité du contact
médecin-patient.
Avantages et coûts
Ces études ne vous vous apporteront aucun coût supplémentaire et n’offrent aucun avantage
financier. Les résultats obtenus de ces études pourraient mener à des méthodes nouvelles et plus
efficaces pour le traitement de l'infertilité.
Confidentialité
Si vous acceptez de participer à des études, vos données personnelles et cliniques seront
gardées confidentielles ne donnant aucun accès à votre dossier personnel.
Conformément à la loi belge du 8 Décembre 1992 et la loi belge du 22 Août 2002, votre vie privée
sera respectée. Si les résultats de l'étude sont publiés, votre anonymat sera assuré. En outre, toutes
les recherches sur les embryons humains et les gamètes sont assujetties à la loi sur la recherche sur
les embryons in vitro du 11 mai 2003, publiée dans le Moniteur Belge du 28 mai 2003 interdisant
l’utilisation des gamètes et embryons aux fins suivantes:
* la recherche sur les embryons après les 14 premiers jours de développement, la période
de la congélation n’étant pas incluse.
* le clonage reproductif humain
* la création de chimères ou des créatures hybrides
* le replacement des embryons humains chez les animaux;
* à des fins commerciales.
* à des interventions de recherche génétique qui déboucheraient sur un changement génétique.
Tous les projets suivants ont été approuvés par le Comité Local d'éthique de l'Hôpital Universitaire de
Gand et par la Commission fédérale éthique sur la recherche médicale et scientifique sur les
embryons in vitro. Toutes les études sont menées sous la supervision du professeur Dr. Petra De
Sutter, chef du département de la médecine de la reproduction.

Versie:01/05/2016 ARG-F-2121.07 IC vers restmateriaal wetenschap (FR ).doc 2/7
Projet de recherche 1: Utilisation des gamètes résiduels pour l'étude de mécanisme
d'activation de l'ovocyte et la maturation in vitro
A. Objectif:
Activation de l’ovocyte: Échec ou la fécondation faible aprés l'injection intracytoplasmique de
spermatozoïdes (ICSI) est principalement due à un problème dans l'activation de l'œuf causés par le
sperme ou l'œuf. Dans cette recherche, nous voulons étudier le rôle du sperme et de l'œuf. Pendant la
fécondation du sperme il faut se libérer un protéine (phospholipase C zèta, PLCz) qui provoque
calcium se élève depuis les canaux d'IP3 dans l'ovocyte. Dans certains couples, il peut être quelque
chose de mal avec cette PLCz ou IP3. On peut faire un test avec des souris (MOAT, ovocyte test
d'activation de la souris), où les cellules du sperme humain sont injectés dans des ovocytes de souris,
pour ensemencer les cellules afin de déterminer la capacité d'activation. Ce test n’ est pas facile à
réaliser (souris nécessaire, expertise dans la souris ICSI nécessaire, éthiquement controversée). Par
conséquent, nous étudions à la fois les rôles respectifs du sperme et l'ovule dans le mécanisme
d'activation de l'ovocyte, et nous voulons développer les autres tests de diagnostic, plus précises et
plus conviviales pour prouver un problème dans l'activation de l'ovocyte.
La maturation in vitro: Outre la fertilisation échoué, la maturation de l’ovocyte peut être échoué ou la
division des gamètes peut être échoué. Parfois, il arrive que, après stimulation, aucune ovule mature
est récupéré. En outre, la fertilisation peut être réussie, mais ne subit pas de nouvelles divisions.
L'intention est de savoir par coloration, ou l'analyse de protéines impliquées dans la maturation et de
la division ou anomalies qui constituent la cause sous-jacente de ces maturation ou de division a
échoué.
Congélation : La recherche vise également à optimiser la cryoconservation des gamètes humains.
Cryoconservation du faible nombre de spermatozoïdes nécessite une approche qui diffère de
cryoconservation classiques. Il convient donc d'étudier l'optimisation des volumes minimes pour la
vitrification des spermatozoïdes de l'homme. Cryoconservation dès l’ovocytes est important pour des
raisons médicales et non médicales. Il existe un besoin pour une optimisation continue de techniques
de conservation des différentes étapes du ovules de l'être humain.
B. Méthodologie:
1.ETUDE DU MECANISME ACTIVATION DE L’OVOCYTE:
Analyse de calcium dans l'ovocyte humain (HOCA): L'injection de sperme résiduel dans les ovocytes
résiduelles pour l'analyse de calcium et / ou des agents d'activation artificiels suivie d'une analyse de
calcium. Détermination des protéines (immunomarquage, spectrométrie de masse) en ovocytes
résiduelles: IP3, la phosphorylation de IP3, d'autres protéines / kinases / minéraux (calcium
pertinente) / dans le sperme résiduelle: PLCz, PAWP, d'autres protéines. Détermination de
l'expression des gènes (q-RT-PCR, cytométrie en flux, d'autres techniques) au ovocytes résiduelles:
IP3, d'autres protéines pertinentes / kinases / minéraux (calcium) / spermatozoïdes résiduelle: PLCz,
PAWP, autre protéines. Le développement: l'utilisation d'agents artificiels afin de créer des embryons
de pseudo-parthénogénétique. Le dépistage génétique de PLCz / IP3 / autres gènes dans le sperme
ou des ovules.
2. LA MATURATION ET LA DIVISION D’OVOCYTE
Détermination des protéines impliquées dans la maturation de l’ovocyte et la division de l’ovocyte
(immun marquage, spectrométrie de masse). Le dépistage génétique de gènes impliqués dans la
maturation de l’ovocyte et division mitotique.
3.OPTIMISATION CRYOCONSERVATION DES GAMETES HUMAINS
Optimiser les techniques de vitrification pour un faible nombre de spermatozoïdes des hommes dans
des volumes minimaux et les transporteurs personnalisés. Optimiser les techniques de vitrification
pour les différentes étapes de ovules humains: cryoprotecteurs, les transporteurs, l'automatisation,
normalisation
Pour cette étude, on a donc besoin de ovocytes résiduels (immature, pas de fécondation,
ovules anormale ...), le sperme résiduel, et de repos-zygotes (arrêt PN) pas (plus) peut être
utilisé pour le traitement de la fertilité. Cette gamètes résiduels seront soit utilisées fraîches ou
peur être congelés d’abord.
C. Durée / approbation:.
Cette étude a été approuvée par le Comité d'éthique de l'hôpital universitaire de Gand (2014/1309).

Versie:01/05/2016 ARG-F-2121.07 IC vers restmateriaal wetenschap (FR ).doc 3/7
Projet de recherche 2: La production des cellules souches embryonnaires humaines dans un
état fondamental naïf de la pluripotente
A. Objectif:
Des cellules souches embryonnaires humaines sont dérivées de la masse cellulaire interne d'un
embryon de 5-6 jours (= blastocyste). Les cellules souches embryonnaires peuvent être maintenues
indéfiniment en culture , et peuvent également se développer en n'importe quel type de cellule du
corps humain à condition qu’on ajoute de certains facteurs de croissance. Cette caractéristique offre
des perspectives intéressantes pour de futures applications cliniques telles que la thérapie cellulaire
pour les maladies liées à l'âge, comme un système modèle pour l'étude de l'embryologie et de
maladies humaines, comme un outil pour vérifier la toxicité ou comme point de départ pour le
développement de nouveaux médicaments .
Pour le moment, les cellules souches embryonnaires humaines présentent un certain nombre d'
inconvénients par rapport aux cellules souches embryonnaires de souris de sorte qu'elles sont moins
appropriés pour des applications futures . Par exemple, ils présentent tous un certain degré de
différenciation, ils ne sont pas faciles à cultiver en grandes quantités, et leur différenciation est limitée
à certains types de cellules que les cellules souches embryonnaires de souris. Aussi pourquoi nous
appelons les cellules souches embryonnaires de souris naïve. L'objectif est de comprendre comment
nous pouvons obtenir chez l'homme des cellules souches embryonnaires naïves par l'analyse
moléculaire.
B. Méthodologie:
1) Pendant la dérivation de cellules souches embryonnaires, après six jours, les blastocystes
deviennent une structure cellulaire intermédiaire, et ensuite forment la première colonie de cellules
souches encore 5 jours plus tard. Le but est de réaliser une analyse moléculaire comparative entre le
blastocyste, le stade intermédiaire et la première colonie de cellules souches. Pour cette raison, les
blastocystes et les structures cellulaires doivent être détruites et l'expression des gènes et de l'état
épigénétique sera déterminée par séquençage.
2 ) Nous allons ajouter plusieurs facteurs de croissance qui fonctionnent dans le souris pour produire
des cellules souches embryonnaires humaines naïves. Nous allons également identifier à partir de
l'objectif 1 de nouveaux réseaux qui doivent permettre l'ajout de petites molécules chimiques et les
facteurs de croissance pour obtenir une environnement dans lequel les cellules souches
embryonnaires humaines naïfs peuvent pousser. À cet effet, les blastocystes sont placés dans des
conditions de culture appropriées pour obtenir des cellules souches embryonnaires naïves.
Pour cette étude, embryons surnuméraires peuvent être données qui ne sont pas admissibles
pour le transfert ou la congélation à cause de leur faible qualité ou une anomalie.
C. Durée / approbation:
Cette étude a été approuvée par le comité d'éthique local et fédéral (2013/822 et ADV054) et se
déroulera à partir de 2014 à 2018.

Versie:01/05/2016 ARG-F-2121.07 IC vers restmateriaal wetenschap (FR ).doc 4/7
Projet de recherche 3: L’étude des interactions entre l'endomètre et les embryons dans le
processus d'implantation
A. Objectif:
L'implantation humaine est un événement délicate. La réussite du processus dynamique de
l’implantation engage un embryon génétiquement normal et un endomètre dans un état de réceptivité.
Un troisième facteur important est la sécrétion de l'utérus, ce qui est le premier microenvironnement
maternel avec lequel l’embryon est en contact. Le dialogue complexe entre tous ces acteurs est
essentielle car elle permet la femme de déployer une réponse sélective adaptés aux embryons
individuels. Cette fonction de ‘biosensoring’ peut également être perturbée en différents groupes de
patientes tels que les patientes atteints de fausses couches à répétition ou des échecs de
l'implantation récurrentes. La compréhension de ce processus d’ implantation est loin d’être totale.
Nous souhaitons donc de passer au niveau moléculaire pour caractériser des facteurs déterminants
dans cette interaction.
B. Méthodologie
1) La mise en culture, dans le laboratoire, des embryons en haut d’un tapis de cellules d’endomètre
maternel, afin d'étudier:
a. Les motifs de mouvement de cellules d’endomètre vers l’embryon ou loin d’embryon
b. L’expression de certains gènes dans l'endomètre, et si cela est influencé par la proximité
d'un embryon
c. L’identification de certaines protéines dans le milieu de culture
2) La mise en culture, dans le laboratoire, des embryons en haut d’un tapis de cellules d’endomètre
maternel avec les sécrétions de l'utérus, afin d'étudier:
a. Les motifs de mouvement de cellules d’endomètre vers l’embryon ou loin d’embryon
b. L’expression de certains gènes dans l'endomètre, et si cela est influencé par la proximité
d'un embryon
c. L’identification de certaines protéines dans le milieu de culture
Dans cette étude les embryons surnuméraires utilisés sont ceux de mauvaise qualité qui ne
sont pas retenus pour le transfert d’embryons ou la congélation.
C. Durée / Approbation:
Cette étude a été approuvée par le Comité d'éthique de l'hôpital universitaire de Gand (2015/0973 et
ADV_059_UZ Gent) et se déroule jusqu’à la fin du 2020.

Versie:01/05/2016 ARG-F-2121.07 IC vers restmateriaal wetenschap (FR ).doc 5/7
Projet de recherche 4 : La signalisation de l'embryon lors de l'implantation
A. Objectif:
Au cours d'un traitement FIV, les ovocytes sont fécondés en laboratoire. Les embryons obtenus sont
ensuite cultivés dans le laboratoire. Par la suite, l'embryon est placé dans l'utérus. Après le premier
transfert de l'embryon, malheureusement seulement 30-35% des femmes sont enceintes. Nous
pensons que la raison pour cette observation est que la plupart des embryons ne peuvent pas
implantées dans la muqueuse utérine. Cette étude s’intéresse sur les signaux entre l'embryon et
l'endomètre lors de l'implantation. Avec cette recherche, nous voulons comprendre les signaux de
l'embryon dans le milieu de culture. Ces signaux peuvent être importants pour l'implantation et peut
aider à améliorer le traitement FIV.
B. Méthodologie:
Si vous participez à l’étude, vous recevrez le traitement FIV régulière. Au moment du transfert, un ou
plusieurs d’embryon sont placés dans l'utérus et les embryons surnuméraires seront congelés. Pour
l'étude, nous ne recueillons que la substance de culture après les embryons seront retirés. Les
échantillons de la culture seront congelées et transportés à l'VUMC dans les Pays-Bas pour la
recherche. Au cours de cette étude, certains molécules (signaux) qui ont été sécrétées par l’embryon
seront identifiés et analysées. En outre, le milieu de culture sera également utilisé dans un système in
vitro d'implantation. Dans ce système, les cellules de l'endomètre seront mises en culture dans la
laboratoire. La réaction de ces cellules de l'endomètre sera analysée en présence de milieu de culture
provenant des embryons. Ainsi, on peut vérifié si l'embryon a sécrétée certains signaux qui peuvent
causer une réaction dans la muqueuse utérine et peut-être ainsi avoir un effet sur l'implantation de
l'embryon.
Tous ces tests sont effectués en laboratoire. Pour l'étude, nous ne recueillons que la culture après les
embryons sont retirés. Nous ne utilisons pas des embryons pour la recherche.
Pour cette étude les gouttes résiduelles de milieu de culture peuvent être donner.
C. Durée / Approbation:
Cette étude a été approuvée par le comité d'éthique local (2015/0973). Cette étude est menée sous la
direction du Prof. Dr. Steven Weyers (UZ Gent), Prof. Dr. Petra De Sutter (UZ Gent) et Prof. Nils
Lambalk (VUMC) et se déroule jusqu’à la fin du 2018.