Chap 5 – Méthodes de séparation
Chap 1 Méthodes Chromatographique: principe et fonctionnement
Chap 2 Chromatographie planaire
Chap 3 HPLC (et GC)
Chap 4 Chromatographie ionique
Chap 5 Méthodes de séparation par centrifugation /osmometrie
Transformation chimique et séparation
sylvestre.toumieux@u-picardie.fr – gwladys.pourceau@u-picardie.fr
Licence Biologie Humaine-Technologie de la Santé
8h de cours (Sylvestre Toumieux)
7h de TD (Gwladys Pourceau)
Introduction
Problématique : Comment extraire différentes molécules au sein d’un mélange homogène
Lait Sang Sel de mer
Comment identifier, qualifier, quantifier Il faut séparer
Introduction
Séparation en fonction de l’état physique
Solide Liquide Gazeux
Filtration
Centrifugation
Décantation
Décantation
Osmométrie
Dialyse
Centrifugation
Cristallisation
Distillation
Evaporation
Sublimation
Chromatographie
Tamisage
Flottaison
Introduction
Chromatographie
Mikhaïl Tswett
Botaniste Russe
1872-1919
Tswett sépare les pigments végétaux colorés sur une colonne carbonate de calcium pulvérulent
(CaCO3)
les pigments étaient entraînés avec de l'éther de pétrole (mélange pentanes et d’hexanes).
- formation de bandes de couleur différente (vert, orange, jaune..).
- Technique appelée chromatographie (écriture des couleurs).
1930, Edgar Lederer purifie par la méthode de Tswett la lutéine du jaune d’œuf.
1940, Martin et Synge théorie de la chromatographie Nobel en 1952
1952 mise au point de la Chromatographie en Phase Gazeuse (CPG).
1968 mise au point de la Chromatographie Liquide Haute Performance CLHP ou HPLC en anglais.
1979 première séparation chirale par HPLC.
Université Lille1 – ATEM Chimie
Chap 1 Méthodes Chromatographique: principe et fonctionnement
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La chromatographie: Technique où les constituants d’un mélange se séparent en fonction des vitesses
auxquelles ils sont entrainés. On parle d’affinité d’un analyte entre une phase stationnaire et une
phase mobile. Le résultat est un chromatogramme,
Chromatogramme: C’est 1 diagramme qui restitue la concentration en fonction du temps pour un ou
plusieurs analytes.
Phase stationnaire: C’est la phase immobilisée (CaCO3 par ex) qui, conjointement à la phase mobile
permet la séparation. Elle peut être solide ou liquide.
Phase mobile: C’est la phase en mouvement qui, conjointement à la phase stationnaire, permet la
séparation. Elle peut être liquide ou gazeuse. Est aussi appelé éluant.
Le développement: Correspond au passage de la phase mobile sur la phase stationnaire. A pour effet
d’entrainer les analytes.
Temps de rétention: C’est le temps mis par un analyte pour traverser la phase stationnaire.
Définitions
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