Références bibliographiques

REPUBLIQUE ALGERIENNE DEMOCRATIQUE ET POPULAIRE
MINISTERE DE L’ENSEIGNEMENT SUPERIEUR
ET DE LA RECHERCHE SCIENTIFIQUE
UNIVERSITE KASDI MERBAH, OUARGLA
FACULTE DES SCIENCES DE LA NATURE ET DE LA VIE
DEPARTEMENT DES SCIENCES BIOLOGIQUES
Projet de Fin d’Etudes
En vue de l’obtention du diplôme de
Licence
Domaine : Sciences de la nature et de la vie
Filière : Biologie
Spécialité : Biochimie fondamentale et appliquée
Thème
Encadreur : Mr. BOUAL Zakaria
Présenté par :
Co-encadreur : Mlle. BENAOUN Fatima
DAHMANI Souraya
Examinatrice : Mme. BAYOUSSEF Zahia
BAZZINE Messaouda
SENANE Soltana
Synthèse bibliographique sur les techniques
d’isolements et de culture des macrophages
In vitro
Année universitaire 2013/2014

II
Remerciements
Avant tout, nous remercions Dieu tout puissant de nous avoir donné la force, le courage,la
persistance et nous a permis d’exploiter les moyens disponibles à fin d’accomplir ce modeste travail. Merci de
nous avoir éclairé le chemin de la réussite.
Nous tenons à remercier particulièrement M BOUAL Zakaria, Maître Assistant au Département
des Sciences de la Nature et de la Vie à la Faculté des Sciences de la Nature et de la Vie et Sciences de la
Terre et de L’Univers de l’Université Kasdi Merbah-Ouargla,et Melle BENAOUN FATIMA qui ont
encadrés ce travail depuis les premiers instants, leur pédagogie, leur écoute, leur ouverture d’esprit et leur
vision de la recherche scientifique, ont été importants pour nous que leurs connaissances éclectiques et ont
largement contribué à l’évolution de ce travail.
Nous exprimons nos profondes reconnaissances à M OULD ELHADJMohamed
Didi,Professeur au Département des Sciences de la Nature et de la Vie à la Faculté des Sciences de la
Nature et de la Vie et Sciences de la Terre et de L’Univers de l’Université Kasdi Merbah-Ouargla, qui nous
a ouvrir les portes de l’écosystème.
Nous tenons aussi à remercier Mme BAYOUSSEF Zahia,Docteur au Département des Sciences de
la Nature et de la Vie à la Faculté des Sciences de la Nature et de la Vie et Sciences de la Terre et de
L’Univers de l’Université Kasdi Merbah-Ouargla, pour avoir accepté d’examiner ce travail.
Nous remercions Dr.BRADAI Lyès de nous pour son ouverture et son attention vis-à-vis de nos
questions et sa soutenance depuis les trois derniers années.
On n’oublie pas nos parents pour leur contribution, leur soutien et leur patience.
Un grand merci pour DAHMANI Omar pour leur soutien et leur générosité.
Enfin, nous adressons nos plus sincères remerciements à tous nos proches et amis, qui nous ont toujours
encouragées au cours de la réalisation de ce mémoire.
Merci à tous et à toutes.

III
Abréviations
BSA : Albumine bovine sérique
BCG : Mycobacterium bovis bacillus
calmette-guérin
CCE : Elutriation centrifuge à Contre-
courant
CMH : Complexe Majeur
DMEM: 
Dulbecco
EDTA : Acide Ethylène Diamine Tétra
acétique
EGF: Epidermal Growth Factor
EtOH: éthanol
FCS: 
FIM: Factor Increasing the
Monocytopoiesis
GM-CSF: Granulocyte-macrophage
colony-stimulating factor
HBSS : Solution saline équilibrée de Hank
HS :Sérum de cheval
IFN-γ :Interféron
IL-1 : Interleukine -1
IL-10 : Interleukine-10
IL-12 : Interleukine-12
IL-15 : Interleukine-15
IL-4 : Interleukine-4
IL-6 : Interleukine-6
iNOS: inductible Nitric Oxide
Synthetase
KC: Cellule Küpffer
LPS: Lipopolyscharides
M-CSF: Monocyte colony-stimulating
factor
MPO : Myéloperoxydase
MPS : Système Phagocytaire
Mononucléaire
NK: Naturel Killer
NO :Oxide Nitrique
PAMP: Pathogen Associated Molecular
Patten
PBMC : Cellules Mononuclées du Sang
Périphérique
PBS: Phosphate Buffered Saline
PGDF: Platelet-Derived Growth Factor
PGN: Peptidoglycane
PRR: Pattern-Recognition Receptors
RPMI -1640 : Roswell Park Memorial
Institute
S.M.A.F : Macrophage Armés par un
Facteur Spécifique
TGF-β : de Transforming Growth
Factor-
TLRs: Toll-Like Receptors
TNF: Tumor Necrosis Facteur
TNF α : Tumor Necrosis Facteur 
DTH : Hypersensibilité retardée
MCP-1 : Protéine Chimio-attractive
Monocytaire 1
SR : Récepteur Scavenger
PGE2 : Prostaglandine E2
GBSS : Gey de l'équilibre Solution de
Sel
GBS : Gélose de Base
LCM : Cellule Milieu Conditionné

IV
Liste des tableaux
No
Titre
Page
01
Les phénotypes de deux meilleurs caractéristiques des monocytes
chez le mammifère (GORDON et TAYTOR, 2005)
07
Liste des figures
No
Titre
Page
01
(A) Image prise en microscopie électronique à balayage (SEM)
montrant des macrophages alvéolaires humains isolés par lavage
bronchioalvéolaire adhérant sur verre pendant 15 min avant fixation
(×3000),(B) Image prise en microscopie électronique à transmission
(TEM) montrant une coupe axiale de macrophages alvéolaires
humains (N :noyau) (FEREOL, 2005).
05
02
Schéma illustrant les différentes étapes de la différenciation de la
cellule souche en macrophage (FEREOL, 2005).
11
03
Apoptose des neutrophiles et clairance de phagocytose par les
TEO, 2003).
14

V
Table de matière
Abréviation
Liste des tableaux
Liste des figures
Introduction 02
Chapitre I
Cellules mononuclées macrophages
I.-Macrophages 04
I.1.-Définition et historique 04
I.2.- Monocytes 05
I.2.1.-  05
I.2.2.- Hétérogénéité des monocytes chez les souries 06
I.3.- Origine des macrophages 09
I.4.- Morphologie des macrophages 10
I.5.- Rôle des macrophages 11
I.5.1.- Filtration 11
I.5.2.- Reconnaissance et phagocytose 12
I.5.3.-  12
I.5.4.- Sécrétion des cytokines 12
I.5.5.- Synthèse des protéines du complément 13
I.5.6.- Régulation de la production des monocytes au cours une inflammation
aiguë 13
I.5.7.- Apoptose 14
I.5.8.- Autres rôles 14
Chapitre II
Isolement et purification des macrophages
II.1.- Isolement des monocytes 17
II.1.1.- Séparation des cellules mononuclées par gradient de densité 17
II.1.2.- Isolement des monocytes par la méthode de PETIT HORY et HO
THIN SAUJ 17
II.1.2.1.- Principe 17
II.1.2.2.- Méthode 17
II.1.3.- Isolement des monocytes par contre-centrifuge 18
II.2.- Purification des monocytes 18
II.2.1.- Epuisement des monocytes utilisant L-leucine méthyle ester 18