Access HYPERsensitive hTSH

A CCE SSI m m u n o a s s a y S y s t e m s
Access HYPERsensitiv e hT SH
Mode d’ emploi
© 2015 Beckman Coult er , Inc. All righ ts r eser v ed.
T h y r o t r o p i n e
33820
RÉSER VÉ À UN USAGE PROFESSIONNEL
Rx Only
HYPERsensitive hTSH 3e génération (~45 minutes)
Fast hTSH 2e génération (~20 minutes)
RÉVISION ANNUELLE
Revu par Date Revu par Date
PRINCIPE
UTILISA TION
Le test Access HYPERsensitive hTSH utilise une technique immunoenzymatique chimioluminescente à particules
paramagnétiques pour le dosage de la Thyroid Stimulating Hormone (TSH) dans le sérum ou le plasma humain à
l’aide des Systèmes d’Immunoanalyse Access. Ce test est capable de fournir des résultats de 3ème génération
(HYPERsensitive hTSH) et/ou de 2ème génération (Fast hTSH).
GÉNÉRALITÉS
La Thyroid Stimulating Hormone (TSH) fait partie d’un groupe de plusieurs hormones glycoprotéiques constituées
de deux chaînes peptidiques liées de façon non covalente: une chaîne α qui est pratiquement identique pour toutes
et une chaîne β qui est responsable des spécicités immunologiques et biologiques. Ces similitudes entraînent
des degrés variables de réactivité croisée avec dif férents antisérums. Le test Access HYPERsensitive hTSH est
un test immuno-enzymatique en phase solide avec pratiquement aucune réactivité croisée avec d’autres hormones
peptidiques. La sensibilité et la spécicité de ce test permettent une meilleure discrimination entre les sujets hyper
thyroïdiens et les sujets euthyroïdiens.
La TSH humaine libérée à partir de l’antéhypophyse est le principal facteur de régulation du fonctionnement thyroïdien.
La sécrétion de la thyrotropine (TRH ou TRF) à partir de l’hypothalamus, contrôle la sécrétion de la TSH. Ce système,
à son tour , régule la libération des hormones thyroïdiennes, la thyroxine (T4) et la triiodothyronine (T3). Il existe un
mécanisme de feed-back négatif, sensible aux concentrations circulantes d’hormones thyroïdiennes, T3 et T4, contrôlé
par l’hypothalamus. Dans son ensemble, ce système est désigné sous le nom d’axe hypothalamo-hypophyso-thyroïdien.
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T out changement dans le fonctionnement de cet axe peut inuencer les concentrations de T4 et de T3 dans la
circulation.
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La TSH humaine touche un grand nombre de processus métaboliques dans la glande thyroïdienne en se liant à ses
récepteurs membranaires et en activant l’adénylcyclase. L ’adénylcyclase, à son tour , facilite la production d’AMP
cyclique, le “second messager” de la TSH, qui déclenche une cascade de réactions métaboliques dans la cellule. Le
résultat de cette stimulation est une augmentation de la synthèse et de la libération de T3 et de T4, et le maintien de
l’intégrité physique et fonctionnelle de la thyroïde.
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La principale utilisation clinique du dosage de la TSH est l’appréciation de l’état de la thyroïde. Chez les sujets dont le
fonctionnement hypothalamo-hypophysaire est intact, la TSH est dosée pour: 1) mettre en évidence un hypothyroïdisme
(taux élevés de TSH) ou un hyperthyroïdisme (taux abaissés ou non détectables de TSH), 2) contrôler un traitement
supplétif en T4 dans l’hypothyroïdisme primaire ou un traitement antithyroïdien dans l’hyperthyroïdisme, 3) suivre le
freinage de la T4 de l’inuence trophique de la TSH dans les “nodules froids” et le goitre simple, 4) évaluer la réponse du
test de stimulation de la TRH. Comme les méthodes les plus sensibles et les plus précises sont devenues disponibles, les
dosages de TSH sont également de plus en plus utilisés pour identier des hypothyroïdismes ou des hyperthyroïdismes
inapparents ou latents.
4 , 5
A l’origine, la TSH était dosée en utilisant des systèmes biologiques tel que le dosage biologique chez la souris
de McKenzie. Cependant, ces méthodes présentent une sensibilité insuf sante et demandent la concentration de
volumes importants de sérum.
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La préparation d’antisérum anti-TSH par Utiger et coll., a conduit au développement
de la technique du radio-immunodosage de la TSH.
7 , 8
La sensibilité du dosage et le petit volume d’échantillon sérique
nécessaire ont rendu cette méthode attrayante. Un gain de sensibilité a été obtenu grâce à la technologie de la
chimioluminescence.
Le test HYPERsensitive hTSH présente des performances cohérentes avec la dénition de la sensibilité fonctionnelle de
“3ème génération” (0,01 à 0,02 µIU/mL [mIU/L] avec un CV% inter-essai ≤ 20 %) pour la mesure de la TSH humaine.
9 , 1 0
Le test Fast hTSH présente des performances cohérentes avec la dénition de la sensibilité fonctionnelle de “2ème
génération” (0,1 µIU/mL [mIU/L] avec un CV% inter-essai ≤ 20 %) pour la mesure de la TSH humaine.
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METHODOLOGIE
Le test Access HYPERsensitive hTSH est un test immunoenzymatique à deux sites (type “sandwich”). Un échantillon
est ajouté dans un récipient à réaction avec un conjugué phosphatase alcaline-anticorps de chèvre anti-TSH, solution
tamponnée de protéines, et des particules paramagnétiques sensibilisées avec des anticorps monoclonaux de souris
anti-TSH immobilisés. (Des anticorps de chèvre anti-souris sont utilisés pour immobiliser les anticorps de souris.) La
TSH se lie aux anticorps monoclonaux anti-TSH immobilisés sur la phase solide tandis que le conjugué anticorps (chèvre)
anti-TSH-phosphatase alcaline réagit avec un site antigénique dif férent de la TSH. Après incubation dans une cuvette
réactionnelle, les matériels liés à la phase solide sont maintenus dans un champ magnétique tandis que les matériels non
liés sont éliminés par lavage. Puis, le substrat chimioluminescent, Lumi-Phos* 530 est ajouté à la cuvette réactionnelle
et la lumière générée par la réaction est mesurée à l’aide d’un luminomètre. La production de lumi ère est directament
proportionnelle à la concentration de la Thyroid Stimulating Hormone présente dans l’échantillon. La quantité d’analyte
présente dans l’échantillon est déterminée à l’aide d’une courbe d’étalonnage multi-points mise en mémoire.
ÉCHANTILLON
PRÉLÈVEMENT ET PRÉP ARA TION DE L ’ÉCHANTILLON
1. Nature de l’échantillon: sérum et plasma (hépariné).
2. Respecter les recommandations suivantes en ce qui concerne la manipulation, le traitement et la conservation des
échantillons sanguins:
1 1
• Prélever tous les échantillons sanguins en observant les précautions de routine concernant la ponction veineuse.
• Pour les sérums, laisser les échantillons coaguler complètement avant la centrifugation.
• Garder les tubes toujours bouchés.
• Séparer physiquement le sérum ou le plasma des cellules dès que possible.
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• Ne pas conserver les échantillons dans des tubes bien bouchés à température ambiante (15 à 30°C) pendant
plus de huit heures.
• Si le dosage n’est pas terminé dans les huit heures qui suivent, réfrigérer les échantillons entre 2 et 8°C.
• Si le dosage n’est pas terminé dans les 48 heures qui suivent, ou pour l’expédition des échantillons, congeler à
-20°C ou à une température inférieure.
• Décongelez les échantillons une seule fois.
3. Observer les recommandations suivantes lors de la préparation des échantillons:
• S’assurer que toute brine résiduelle et toute matière cellulaire ont été éliminées avant l’analyse.
• Suivre les recommandations du fabricant concernant le tube de prélèvement du sang pour la centrifugation.
4. Chaque laboratoire doit déterminer l’acceptabilité de ses propres tubes de prélèvement de sang et produits de
séparation du sérum. Des variations peuvent exister pour ces produits entre les fabricants et, parfois, de lot à lot.
5. Eviter d’utiliser des échantillons présentant une hémolyse importante.
RÉACTIFS
INFORMA TION SUR LE PRODUIT
Pack Réactifs Access HYPERsensitive hTSH
Code 33820: Coffret de 100 dosages, 2 packs, 50 tests/pack
• Utilisé à la fois pour le test HYPERsensitive hTSH et pour le test Fast hTSH.
• Fournis prêts à l’emploi.
• Conserver en position verticale et réfrigérer entre 2 et 10°C.
• Les Packs doivent être réfrigérés entre 2 et 10°C pendant deux heures minimum avant d’être utilisés sur l’instrument.
• Stables jusqu’à la date de péremption indiquée sur l’étiquette lorsqu’ils sont conservés entre 2 et 10°C.
• Après ouverture, un Pack est stable entre 2 et 10°C pendant 28 jours.
• Les signes d’une détérioration possible sont la rupture de la couche d’élastomère sur le Pack ou des valeurs de
contrôle en dehors des intervalles de conance.
• Si le pack réactifs est endommagé (c’est-à-dire, rupture de la couche d’élastomère), jeter le pack.
• T ous les antisérums sont polyclonaux sauf indication contraire.
R1a:
Particules magnétiques sensibilisées avec des complexes d’IgG (chèvre) anti-souris-anticorps
monoclonaux (souris) anti-TSH, en suspension dans un T ampon TRIS-NaCl, avec surfactant,
sérum-albumine bovine (BSA), < 0,1% d’azoture de sodium et 0,1% de ProClin** 300.
R1b:
T ampon TRIS-NaCl, avec surfactant, BSA, protéine (murine, chèvre), < 0,1% d’azoture de
sodium et 0,1% de ProClin 300.
R1c:
Conjugué anticorps de chèvre anti-TSH-phosphatase alcaline (bovine) dans un tampon
TRIS-NaCl, avec surfactant, BSA, protéine (chèvre), < 0,1% d’azoture de sodium et 0,1% de
ProClin 300.
* * P r o C l i n ™ e s t u n e m a r q u e d é p o s é e d e T h e D o w C h e m i c a l C o m p a n y ( " D o w " ) o u u n e  l i a l e d e D o w .
PRECAUTIONS
• Pour un usage diagnostique in vitro.
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• Les échantillons de patients et les produits dérivés du sang peuvent être traités en routine avec un risque minimum si
la procédure décrite est respectée. Cependant, manipuler ces produits comme s’ils étaient potentiellement infectieux
en suivant les précautions universelles et les bonnes pratiques de laboratoire, quels que soient leur origine, leur
traitement ou leur certication antérieure. Utiliser un désinfectant approprié pour la décontamination. Conserver et
éliminer ces produits et leurs récipients en suivant les règlements et les procédures locales.
• Pour connaître les dangers présentés par le produit, reportez-vous aux sections suivantes : COMPOSANTS
ACTIFS, CLASSIFICA TION DES RISQUES GHS et CLASSIFICA TION EUROPÉENNE DES SUBST ANCES
DANGEREUSES.
INGRÉDIENTS RÉACTIFS
A TTENTION
L ’azoture de sodium, utilisé comme agent de conservation, peut réagir avec
le métal des canalisations et former des composés explosifs. V oir le NIOSH
Bulletin: Explosive Azide Hazards (8/16/76) (Bulletin de l’Institut national pour la
santé et la sécurité au travail : Les dangers d’explosion des azotures).
Pour éviter l’accumulation potentielle des composés d’azoture, rincer les tuyaux
d’évacuation à l’eau après l’élimination de réactifs non dilués. L ’élimination de
l’azoture de sodium doit se faire conformément aux réglementations locales en
vigueur .
CLASSIFICA TION DES RISQUES SGH
TSH PMP (compartiment R1a) A VER TISSEMENT
H317 Peut provoquer une allergie cutanée.
P280
Porter des gants de protection/des vêtements de
protection et un équipement de protection des yeux/du
visage.
P333+P313 En cas d’irritation ou d’éruption cutanée : demander un
avis médical/consulter un médecin.
P362+P364 Enlever les vêtements contaminés et les laver avant
utilisation.
stabilisateur composé de 5-chloro-2-méthyl-4-isothiazolin
-3-one [n° EC 247-500-7] avec du
2-méthyl-4-isothiazolin-3-one [n° EC 220-239-6] (3:1) <
0,05%
Réactif auxiliaire (compartiment
R1b)
A VER TISSEMENT
H317 Peut provoquer une allergie cutanée.
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P280
Porter des gants de protection/des vêtements de
protection et un équipement de protection des yeux/du
visage.
P333+P313 En cas d’irritation ou d’éruption cutanée : demander un
avis médical/consulter un médecin.
P362+P364 Enlever les vêtements contaminés et les laver avant
utilisation.
stabilisateur composé de 5-chloro-2-méthyl-4-isothiazolin
-3-one [n° EC 247-500-7] avec du
2-méthyl-4-isothiazolin-3-one [n° EC 220-239-6] (3:1) <
0,05%
Conjugué TSH (compartiment
R1c)
A VER TISSEMENT
H317 Peut provoquer une allergie cutanée.
P280
Porter des gants de protection/des vêtements de
protection et un équipement de protection des yeux/du
visage.
P333+P313 En cas d’irritation ou d’éruption cutanée : demander un
avis médical/consulter un médecin.
P362+P364 Enlever les vêtements contaminés et les laver avant
utilisation.
stabilisateur composé de 5-chloro-2-méthyl-4-isothiazolin
-3-one [n° EC 247-500-7] avec du
2-méthyl-4-isothiazolin-3-one [n° EC 220-239-6] (3:1) <
0,05%
La che technique santé-sécurité est disponible à l’adresse techdocs.beckmancoulter .com.
CLASSIFICA TION EUROPÉENNE DES RISQUES
TSH PMP (compartiment R1a)
Xi;R43
R43 Peut entraîner une sensibilisation par contact avec la
peau.
S28
Après contact avec la peau, se laver immédiatement et
abondamment avec de l’eau et du savon.
S37
Porter des gants appropriés.
Réactif auxiliaire (compartiment R1b)
Xi;R43
R43 Peut entraîner une sensibilisation par contact avec la
peau.
S28
Après contact avec la peau, se laver immédiatement et
abondamment avec de l’eau et du savon.
Mode d’ emploi A83792 D FR Access HYPERsensitiv e hT SH
DÉCEMBRE 2015 P ag e 5 de 16