Fiche protocole - CRDP de l`académie de Montpellier

Fiche protocole : Utilisation du microkinétomètre pour
l’étude de la contraction du muscle de lombric
I – Le montage
Connecter une entrée directe (voltmètre) de l’interface ExAO aux bornes de sortie du
microkinétomètre en respectant les polarités (les couleurs des bornes doivent correspondre).
Connecter le stimulateur sur les deux bornes de stimulation (une est attenante à la seringue,
l’autre est derrière le support de l’appareil).
Régler le stimulateur (ou GBF) sur le mode stimulation en rafale, tension de 12 volts et
fréquence 500 Hz.
II - La dissection du lombric
Prendre un lombric dont on va sectionner les extrémités.
L'ouvrir au moyen d'un ciseau fin dans le sens longitudinal dans sa partie dorsale
Le débarrasser ensuite de toute sa partie nerveuse en grattant au moyen d'un scalpel.
III - La fixation du muscle sur le microkinétomètre.
Fixer le muscle du ver à la petite pince en plastique en vérifiant qu'il y a bien contact entre le
muscle et le fil électrique, puis à la pince en plomb sans le lâcher pour éviter la cassure.
Glisser l'ensemble délicatement dans la seringue inclinée.
Fixer la seringue à son support et accrocher le dispositif au bras du levier conducteur.
Régler ensuite la hauteur de la seringue afin que le muscle soit tendu (et non suspendu).
Rajouter dans la seringue le liquide physiologique jusqu'à mi-hauteur du ver.
IV – Configuration du logiciel ( ici Généris 5+ mais tout autre
logiciel ExAO généraliste convient)
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Le microkinétomètre permet de mesurer les petits déplacements grâce au mouvement
d’un petit aimant. Plus l’aimant est proche du capteur, plus le champ produit par
l’aimant est fort, donc plus la tension analogique de sortie enregistrée sera importante.
La mesure de la tension, est donc équivalente à une mesure de distance.
Lancer le logiciel Généris 5+ (démarrer, programme, atelier scientifique, Généris 5+).
Paramétrer l’acquisition : les adaptateurs (ici voltmètre en entrée directe et le
chronomètre) doivent être pris au moyen de la souris et déposés sur l’axe
correspondant.
Cliquer ensuite sur l’entrée directe (voltmètre). Paramétrer la tension entre 0 et 5 volts.
Cliquer sur le chronomètre. Paramétrer l’acquisition sur 10 mn.
Se placer en mode affichage et faire apparaître dans la fenêtre du bas « \\directe ».
Une tension est alors lue. Tendre suffisamment le muscle pour décoller légèrement
l’aimant su capteur. Tourner le potentiomètre situer sous le boîtier de l’adaptateur
(face arrière du microkinétomètre) de façon à afficher une tension un peu inférieure à
5 volts.
Cliquer sur acquisition pour lancer la mesure.
V – Acquisition de la mesure
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Lancer la mesure
Laisser le muscle 30 secondes sans le stimuler.
A 30 secondes, stimuler le muscle au moyen de décharges électriques en rafales
produites par le stimulateur ou le GBF.
Laisser la stimulation permanente jusqu’à ce que le muscle se fatigue.
Tout en continuant la stimulation, injecter alors dans la cuve 2 ml de solution d’ATP
sans toucher le fil de suspension du muscle.
Laisser l’enregistrement se terminer.
Imprimer vos résultats.