Structure 3D de protines d`enveloppe virales avant et aprs le

Session 3 - Club ExoEndo 2004
Structure 3D de protéines d'enveloppe virales avant et après le changement
conformationnel fusogénique: implications pour le mécanisme de fusion
membranaire
Félix Rey.
Laboratoire de Virologie Moléculaire & Structurale, UMR 2472 CNRS / 1157 INRA, 1
Avenue de la Terrasse, 91198 Gif-sur-Yvette, France.
Les virus enveloppés infectent les cellules cibles en faisant intervenir un processus de fusion
des membranes virale et cellulaire qui leur permet de libérer le génome viral dans le
cytoplasme. Un changement de conformation important des protéines d'enveloppe du virus est
responsable de ce processus, déclenché soit par l'interaction avec le(s) récepteur(s), soit par le
milieu acide des endosomes. Je présenterai les résultats de nos études structurales sur deux
virus appartenant à deux familles différentes, les alpha- et les flavivirus. Les structures
cristallographiques de leurs protéines de fusion, dans leur deux conformations (avant et après
le changement conformationnel), apportent des renseignements permettant de proposer un
modèle moléculaire pour le mécanisme de fusion. Ce modèle implique des contacts protéineprotéine, observés à la fois dans les cristaux et par microscopie électronique, qui conduisent à
des déformations concertées des deux bicouches lipidiques pour entraîner tout-d'abord la
fusion des feuillets externes (l'hémifusion), suivie de l'ouverture du pore initial de fusion et
son élargissement pour permettre le passage du génome viral. Ce modèle permet d'expliquer
de nombreuses observations biophysiques et biochimiques obtenues en étudiant la réaction de
fusion provoquée par des virus appartenant à des familles très différentes, comme le virus de
la grippe ou le VIH, ce qui suggère qu'il s'agit d'un mécanisme universel utilisé par tous les
virus enveloppés.
Session 3 - Club ExoEndo 2004
Application de la microscopie à ondes évanescentes à l’étude de l’exocytose
régulée dans les astrocytes
Fabien Nadrigny, ESPCI.
Lors de la stimulation des astrocytes, qui se traduit par l’augmentation de la concentration
calcique intracellulaire, on a constaté la libération de substances capables d’agir à la fois sur
les astrocytes eux-mêmes et sur les neurones ambiants. Ainsi l’ATP participe-t-il
probablement comme messager extracellulaire à la propagation des vagues calciques tandis
que le glutamate pourrait influencer l’activité synaptique du réseau neuronal. Différentes
observations indirectes ont montré que l’exocytose régulée participe, parmi d’autres voies
également probables, à la libération de ces gliotransmetteurs. Mais aucune démonstration
directe de ce phénomène dans les astrocytes n’a à ce jour été réalisée. Dans notre présentation,
nous montrerons la présence dans les astrocytes d’organelles juxta-membranaires dont nous
décrirons la libération régulée suivie par microscopie à ondes évanescentes.