Faculté des Sciences de Tunis Session de
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Faculté des Sciences de Tunis Session de Rattrapage 2007 MASTERE DE GENETIQUE ET BIOLOGIE MOLECULAIRE EPREUVE D’IMMUNOLOGIE Durée 2 heure 30 I- Leishmania major est un protozoaire parasite des macrophages responsable de la leishmaniose cutanée chez l’homme. Deux lignées de souris sont infectées par Leishmania major par injection, au niveau d’une patte arrière, d’un même nombre de parasites vivants. La maladie évolue chez ces souris de la façon suivante. Phases de l’infection Souris de la lignée A Souris de la lignée B EXPERIENCE 1 Première phase Evolution de l’infection Lésion localisée Dissémination dans les viscères puis Mort Lésion localisée Guérison Les sérums des souris en différentes phases sont prélevés et les Immunoglobulines totales dosées ainsi que les anticorps spécifiques du parasite. Les résultats suivants ont été obtenus. Lignées de souris Souris A en phase de lésion localisée Souris B en phase de lésion localisée EXPERIENCE 2 Immunoglobulines totales Anticorps major anti ++++ ++ ++ ++ Leishmania L’incubation du parasite infectieux en culture avec le sérum normal des deux lignées de souris ainsi qu’avec le sérum des souris infectées montre les résultats suivants : Lignées de souris Lignée A Lignée B EXPERIENCE 3 Incubation des parasites en présence de sérum Sérum normal Sérum de souris infectée Survie des parasites Lyse des parasites Survie des parasites Lyse des parasites a- Interprétez ces résultats. b- La réponse humorale est-elle protectrice contre le parasite in vtro et in vivo ? justifiez votre réponse. II- Les lymphocytes T des lignées de souris infectées sont prélevés et incubés en présence de macrophages infectés par le parasite. La prolifération des cellules lymphocytaires est mesurée in vitro en présence ou en absence d’anticorps. Les résultats suivants sont obtenus. Origine des lymphocytes T Lignée A Lignée B EXPERIENCE 4 Traitement par addition d’anticorps d’anticorps d’anticorps d’anticorps Pas anti TCR anti CD4 anti H-2 anti LFA 1 d’anticorps I-A et I-E Macrophages + ++++ de la lignée A Macrophages + ++++ de la lignée B Origine des macrophages infectés Les clônes de lymphocytes T ont été établis à partir de souris B guéries. L’injection d’un de ces clônes T à des souris B saines avant injection du parasite donne une protection. La caractérisation de ces clônes a été réalisée comme suit : après activation in vitro en présence d’antigènes parasitaires et de cellules présentatrices autologues, le dosage de cytokines dans les surnageants de culture par ELISA. Les résultats suivants ont été obtenus EXPERIENCE 5 Résultats de l’ELISA utilisant des anticorps Surnageant de culture de lignées T de souris B Surnageant de culture de lignées T de souris B Anti IL2 Anti IL4 Anti IL5 Anti IL6 Anti Interféron gamma + - - - + - + + + - a- Interprétez les résultats des expériences 4 et 5. b- Sont-ils compatibles avec ceux obtenus précédemment ? c- L’immunité cellulaire est-elle protectrice dans les deux lignées de souris ? Justifiez votre réponse. III- Le traitement des souris A et B avant infection par le parasite avec des anticorps dirigés contre l’interféron gamma ou contre l’Interleukine 4 donne les résultats suivants : Lignées de souris Souris B Souris A Traitement Anticorps anti Interféron gamma Pas de traitement Anticorps anti Interleukine 4 Pas de traitement EXPERIENCE 6 Infection Infection par Leishmania major Infection par Leishmania major Infection par Leishmania major Infection par Leishmania major Résultats Susceptibilité Résistance Résistance Susceptibilité a- Quel est l’objectif d’utilisation des anticorps anti Interféron gamma et anti IL4 ? b- Quel serait le rôle respectif de ces cytokines dans la réponse contre le parasite ? IV- Les macrophages infectés in vitro sont traités par l’interféron gamma. Le pourcentage de cellules infectées et le nombre de parasites par cellule parasitée sont donnés dans le tableau suivant : EXPERIENCE 7 Origine des macrophages infectés Lignée A Lignée B Traitement Interféron gamma Interféron gamma Pourcentage de macrophages infectés Nombre de parasites par cellule parasitée ++++ + ++++ + ++++ + ++++ + a- Quel est l’effet de l’interféron gamma sur les macrophages infectés ? b- Est-ce-que la différence entre les deux lignées de souris A et B réside dans la capacité intrinsèque des macrophages à éliminer le parasite ? c- Quel est l’effet attendu de l’injection d’interféron gamma à des souris malades A?
