Faculté des Sciences de Tunis Session de

Faculté des Sciences de Tunis Session de Rattrapage 2007
MASTERE DE GENETIQUE ET BIOLOGIE MOLECULAIRE
EPREUVE D’IMMUNOLOGIE
Durée 2 heure 30
I- Leishmania major est un protozoaire parasite des macrophages responsable de la leishmaniose
cutanée chez l’homme. Deux lignées de souris sont infectées par Leishmania major par injection, au
niveau d’une patte arrière, d’un même nombre de parasites vivants. La maladie évolue chez ces souris
de la façon suivante.
EXPERIENCE 1
Phases de l’infection
Première phase
Evolution de l’infection
Souris de la lignée A
Lésion localisée
Dissémination dans les viscères puis Mort
Souris de la lignée B
Lésion localisée
Guérison
Les sérums des souris en différentes phases sont prélevés et les Immunoglobulines totales dosées ainsi
que les anticorps spécifiques du parasite. Les résultats suivants ont été obtenus.
EXPERIENCE 2
Lignées de souris
Immunoglobulines totales
Anticorps anti Leishmania
major
Souris A en phase de lésion
localisée
++++
++
Souris B en phase de lésion
localisée
++
++
L’incubation du parasite infectieux en culture avec le sérum normal des deux lignées de souris ainsi
qu’avec le sérum des souris infectées montre les résultats suivants :
EXPERIENCE 3
Lignées de souris
Incubation des parasites en présence de sérum
Sérum normal
Sérum de souris infectée
Lignée A
Survie des parasites
Lyse des parasites
Lignée B
Survie des parasites
Lyse des parasites
a- Interprétez ces résultats.
b- La réponse humorale est-elle protectrice contre le parasite in vtro et in vivo ? justifiez
votre réponse.
II- Les lymphocytes T des lignées de souris infectées sont prélevés et incubés en présence de
macrophages infectés par le parasite. La prolifération des cellules lymphocytaires est mesurée in vitro
en présence ou en absence d’anticorps. Les résultats suivants sont obtenus.
EXPERIENCE 4
Origine des
lymphocytes
T
Origine des
macrophages
infectés
Traitement par addition
d’anticorps
anti TCR
d’anticorps
anti CD4
d’anticorps
anti H-2
I-A et I-E
d’anticorps
anti LFA 1
Pas
d’anticorps
Lignée A
Macrophages
de la lignée A
-
-
-
+
++++
Lignée B
Macrophages
de la lignée B
-
-
-
+
++++
Les clônes de lymphocytes T ont été établis à partir de souris B guéries. L’injection d’un de ces clônes
T à des souris B saines avant injection du parasite donne une protection. La caractérisation de ces
clônes a été réalisée comme suit : après activation in vitro en présence d’antigènes parasitaires et de
cellules présentatrices autologues, le dosage de cytokines dans les surnageants de culture par ELISA.
Les résultats suivants ont été obtenus

EXPERIENCE 5
Résultats de l’ELISA utilisant des anticorps
Anti IL2
Anti IL4
Anti IL5
Anti IL6
Anti
Interféron
gamma
Surnageant de
culture de lignées T
de souris B
+
-
-
-
+
Surnageant de
culture de lignées T
de souris B
-
+
+
+
-
a- Interprétez les résultats des expériences 4 et 5.
b- Sont-ils compatibles avec ceux obtenus précédemment ?
c- L’immunité cellulaire est-elle protectrice dans les deux lignées de souris ? Justifiez
votre réponse.
III- Le traitement des souris A et B avant infection par le parasite avec des anticorps dirigés contre
l’interféron gamma ou contre l’Interleukine 4 donne les résultats suivants :
EXPERIENCE 6
Lignées de souris
Traitement
Infection
Résultats
Souris B
Anticorps anti
Interféron
gamma
Infection par
Leishmania major
Susceptibilité
Pas de traitement
Infection par
Leishmania major
Résistance
Souris A
Anticorps anti
Interleukine 4
Infection par
Leishmania major
Résistance
Pas de traitement
Infection par
Leishmania major
Susceptibilité
a- Quel est l’objectif d’utilisation des anticorps anti Interféron gamma et anti IL4 ?
b- Quel serait le rôle respectif de ces cytokines dans la réponse contre le parasite ?
IV- Les macrophages infectés in vitro sont traités par l’interféron gamma. Le pourcentage de
cellules infectées et le nombre de parasites par cellule parasitée sont donnés dans le tableau
suivant :
EXPERIENCE 7
Origine des
macrophages
infectés
Traitement
Pourcentage de
macrophages infectés
Nombre de parasites
par cellule parasitée
Lignée A
-
++++
++++
Interféron
gamma
+
+
Lignée B
-
++++
++++
Interféron
gamma
+
+
a- Quel est l’effet de l’interféron gamma sur les macrophages infectés ?
b- Est-ce-que la différence entre les deux lignées de souris A et B réside dans la
capacité intrinsèque des macrophages à éliminer le parasite ?
c- Quel est l’effet attendu de l’injection d’interféron gamma à des souris malades
A ?