Laboratoire de Microbiologie et Biologie Moléculaire Université Mohamed V - Agdal• Faculté des Sciences B.P. 1014 - Rabat - MAROC Filière SVI - S6 Module de Génétique et Biologie Moléculaire – M21 Elément 2: Biologie Moléculaire - Pr. Pr Abdelkarim FILALI-MALTOUF FILALI MALTOUF Exposé réalisé par: Afrouch Rajae, Hassanaïn Imane, Lakhmi Rabab & Zrag Meryem La conjugaison j chez les bactéries Partie 1 Afrouch Rajae (G1); Hassanaïn Imane (G2); Lakhmi Rabab (G3); Zrag Meryem(G3). I. La conjugaison bactérienne : I 1 Défi I.1 Définition iti ; I.2 Utilité. II L II. Les plasmides l id conjugatifs j tif : II. 1 .définition & description II. 2 le facteur de fertilité. III Transfert III. f du plasmide l conjugatif: f III. 1 Etapes ; III.2 régulation III. 3 Exclusion donneur-donneur IV. Recombinaison des gènes bactériens par conjugaison V. Conséquences et applications I .La conjugaison bactérienne I 1 Défi I.1 Définition f iti Processus normal de transfert génétique entre bactéries Le contact physique entre les deux bactéries ss’impose impose Beaucoup dd’espèces espèces de bactéries possèdent cette faculté Ob Observée pour lla 1ère 1 fois f i en 1946 par LLederberg d b et TTatum La souche A est : Souche A metmet biothr+ leu+ thi+. Souches A + B La souche B est : Souche B met+ bio+ thrleul thi- Joshua Lede Lederberg be g et Edward Edwa d Tatum atum (1946) Pas de colonies Colonies bactériennes Pas de colonies I 2 Utilité I.2 Utilité. SSurvivre i en présence é de conditions difficiles II L II. Les plasmides l d conjugatifs j f II 1 Définition & description. II.1. description forme circulaire formée d’ADN à double brin transfert de Plasmides dit « Conjugatifs »d’une cellule donneuse (mâle) À une cellule receveuse (femelle) II 2 Le II. L ffacteur t dde ffertilité. tilité Présent chez toutes les bactéries donatrices (F+) contrairement aux bactéries réceptrice Notée ( F-) Peut être libre dans le cytoplasme des bactéries ou être intégré dans le chromosome origine de réplication (oriV V) et son système y de contrôle M i t Maintenu à un p par p cellule. exemplaire Répliqué p q comme n’importe quel p parties du chromosome. III.Transfert III T f ddu plasmide l d conjugatif III.1Etapes • Le transfert entre les organismes donneur et accepteur de pplasmide se fait f en quatre q grandes g étapes p : •Reconnaissance Reconnaissance entre donneur (F+) et accepteur (F-) grâce au pilis •Transfert d'un des deux brins du plasmide •Synthèse y du brin complémentaire p chez l'accepteur •R i l i ti du •Recircularisation d plasmide l id chez h l'accepteur p 1- Reconnaissance et contact •La reconnaissance se fait par l'intermédiaire du ppili. Il est synthétisé y par le donneur ,il est constitué de filaments protéiques et a la forme d'un T b creux. Tube •Une fois en place, le pili sert à rapprocher h les l deux d bactéries b é i et à les l amener au contact. contact Ce rapprochement se ffait par p dépolymérisation p y du milieu du pili, raccourcissant ainsi le pont entre les deux bactéries et tirant les d cellules deux ll l l'une l' vers l'autre. l' t •Une fois ce contact réalisé, il y a réorganisation du pili qui se transforme en port de sécrétion. Le reste du pilis sert à perforer la membrane de l'accepteur afin de faire passer le plasmide. l id 2- Transfert f •Une U fois f i que l'agrégat l' é des d deux d bactéries est stabilisé, stabilisé il y a transfert d'un des deuxx brins du plasmide. p •Il y a donc coupure p simple p brin du plasmide au niveau de son origine de transfert f (oriT) ( ) puis, lle brin b va "glisser" l vers la bactérie hôte dans le sens 5' vers 3. 3'. •En même temps, du côté de la bactérie donneuse, le brin complémentaire est resynthétisé théti é afin fi de d garder d un plasmide l id double brin. brin •La bactérie donatrice conserve une copie du plasmide transféré. 3- Synthèse du brin complémentaire •Une U fois f introduit d dans d la l bactérie b acceptrice, t i il y a alors l synthèse thè ddu brin complémentaire complémentaire, afin de former un nouveau plasmide double brin. •Cette synthèse se fait de façon discontinue. Des protéines primases synthétisent des amorces à ppartir desquelles q les ADN polymérases pourront démarrer leur synthèse. thè 4- La recircularisation: i l i i •La recircularisation du nouveau plasmide se fait grâce à une ne protéine (relaxase) qui va permettre la jonction des deux bouts. III.22 La Régulation Rg III E III.3 Exclusion l i ddonneur/donneur /d Exposé effectué par : Afrouch Rajae (G1); Hassanaïn Imane (G2); L kh i Rabab Lakhmi R b b (G3); (G3) Zragg Meryem(G3). y (G )