Développement d`un test ELISpot pour mesurer la réponse

Développementd’untestELISpotpourmesurerlaréponseimmunitaireanti‐ZIKVàmédiation
cellulairechezlafemmeenceinteetl’enfant.
LevirusZika(ZIKV)estunFlavivirusré‐émergentquiestparentaveclevirusdelafièvrejauneet
quiesttransmisparlemoustiqueAedesaegypti.L’infectionparleZIKVcausegénéralementune
maladieindolentechezl’Homme.Cependant,l’infectionchezlafemmeenceinteaétéassociée
aveclasurvenuechezsonenfantdemalformationscongénitalesparfoistrèssévères,dontla
microcéphalie.D’autrescomplications,notammentoculaires,ontétéégalementrapportées
chezcesenfants.LeZIKVsembleêtrecapabled’établiruneinfectionpersistancechezlafemme
enceinte.Chezl’homme,ilestégalementretrouvédanslespermeplusieursmoisaprès
l’infectionetpeutêtretransmissexuellement.Laréponseimmunitaireàmédiationcellulairede
l’hôtejoueunrôle‐clédanslecontrôledeplusieursinfectionsvirales.Sonimportancedans
l’InfectionàZIKVarécemmentétémiseenévidencedansunmodèledesouris(Ngonoetal.,
CellHostMicrobe21:35‐46,2017).L’objectifultimedeceprojetestdemieuxcomprendre
commentlaréponseimmunitaireanti‐ZIKVcontribueàlaprotectiondelafemmeenceinteetde
sonenfantcontrel’infectionàZIKVetcontrelesmalformationscongénitalesquiysont
associées.Pourcefaire,nousdevonsprocéderaudéveloppementd’untestpermettantde
mesurercetteréponse.Laméthodeenquestionestunetechniquedited’«ELISpot»(«
Enzyme‐LinkedImmunoSpotAssay»),quiseraréaliséeàpartird’échantillonssanguinsprélevés
chezdesfemmesenceintesporteusesduZIKVetchezleursenfants,qu’ilssoientinfectésou
non.Cetestreposesurlaproductiond’interférongamma(IFN‐g)parleslymphocytesTdu
patientenréponseàunestimulationpardespeptidessynthétiquesquireproduisentla
séquenceetlastructuredesprotéinesviralesC,E,MetNS1duZIKV.Lessujetsàl’étudeseront
recrutésàlaclinique«GAMI»(«grossesseetmaladiesinfectieuses»)duCHUSainte‐Justine.
Desspécimensprovenantde4casd’infectionsàZIKVengrossesseontdéjàétécollectés.Le
projetimpliquerauneformationàlamanipulationdespécimensbiologiquesenconditionsde
confinementbiologiquedeniveau2.Cetteétudemettraentrenosmainsuntestquinous
permettrademesurerlaréponseimmunitaireanti‐ZIKVàmédiationcellulairechezl’Humain,ce
quiouvriralaporteàdesrecherchesvisantàcomprendrelapathogenèsedecetteinfectionetà
trouverdesmoyenspourl’enrayer.