Les infections virales associées aux épizooties des

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Rapp. 1" -", Réun. Co n s. in l. ~plor . Mer, 182: 1 37-139 . 19 83
Les infections virales as sociées aux épizooties des huîtres du
genre Crassostrea
Mi chel Co mp s
Lahoratoirc de Patho lo gie. In stitut des Pêches maflt i m e~, l. ruc Jean Vilar. 34200 Sète, France: Laoorawire de Pathologie
comparée. U ni ve rsité des &iences. Montpellier
Des in fe ctions virales o nt été détrites c he l: les huîtr es portugaises CrtlUOS lrtu an-
g u/lita des côtes françl li stS successivement affectées pal hl mailldie des branchies et
par
I ~ mortalité massive de 1970. Ultüieurement. un nou"c:au vi ru s a été trouvé chez
Cra.uoSlfta gigus durant des monalités dans la Baie d'Arcacho n. Les ";ru5 impliqués
ont des caractéristiques si milaires pour ce qui oollCcrnc la taille, la morphologie,
l'ullrastruclure cl la morphog~ n ~se intraçytoplasmique.
D:lO s le cas des virus de mo na lité, les ce llules infectée) du tissu in ters tit ie l re nfer-
men1 un e inclusion cytop la smique ct des granulations ù; lsophiles corresponda nt 11 un
)tro rn3 virugène et à des particule s. Les virions mmures de structure icosaèdre
mesurent 38 0 nm. Il s so nt limités par un sys t ~ m e de I : eu~ membranes ct possèdcnt
une 1.0ne centrale dense de 190 nm .
l'our
Ics vi rus de la maladie des branchie5, les cellules infeetfes 3U niveau de
répithéhum branchIal. som hypcrlrophi~e s ct contiennent des part'cules de 38 0 nm
a SSOCiées à des m3 S!>CS de mat ~riel den se oû la présence d 'ADN a été m ise en
év,dencc p:1r Ie~ 'eehniQue' hi.tochimique s.
l'," ', nl> d le' 'illI' I~c< 'n lllll'nt " ~'l)Il\(Jl d WI ,!c', Lllln.k ( S:)j(/' jl('lIlcnt rtre'
rapprUl:hés du groupe des iridovifll s.
Virus ,nfections in the oystcr CrtUSOSlrtll /lngu/ulU from t he French coast affecled
s
uc<: \!.\sÎve1y by the "glll discase" and Ih e " mass mo rt : ll ily of 19 70" are d e.ow: ribed.
Fm lher a new viru' was found in C. gigus du rin g summer mortalities in Arcachon
fl ay. The implicated viruses ha"c simi lar e har acte ri s l ic.~: 5i7.c. morpll olOJ!Y, ultra-
structure, and intra ey top la s mk rnorphogenesi s.
ln Ill c case of Ihe nl ortalities associated w; tll Ill e ";rus. I ll e infected eells of tll e
interstilial li ss ues conlain cytoplasmie inclusion and granu la r basophilie malerial
ror responding 10 vi ropla5m and partieles. The maturc parliclcs a"eraged 380 nm in
dLameler, and had :1I\ ieosahedral struclure. The "iruse~ ",elc limiled by a membrane
~y)tem :m J h3d eleclron opaque central measunng 1 90 11111 . For I he "irus of I he "gill
J
i:,<.: a )c", Ihe infected cells in tbc cpillleli um of Ihe J!LlIs ", cre hy pcn r op lli ed and
c011laincd panieles J80 nm in size. HSsocia tcd witll ma sses of clcctron dense ma lerial
",Ilerc tll e presen ce of DNA was sho",n by bislochemi c: d lechniques.
Thcse "iruses and Ih e ,,;rus rcccnlly diSCO"ered in C G'Cas resemble tll ~ or Ihe
,dOll lU S group.
Des in fections virales n'olll été mises en é\'idence
qu-assez r éce mm en t ch ez les im 'e rté bré s marins ct c-esi
essentiellement chcz l es crus t acés d éc apode s q ue les re -
cherches on l progr essé le plus rapid e ment depui s la d é-
co uverte par Vago (1966) d'un virus du cr <lb e Macropi-
PliS depura/or.
al., 1972). Que l ques particules d'a l lure vi rale de va ient
par la su ile êlTe obse r vées dans les tissus de d ifférent es
espèces d' huitre s sans loulefois qu'un effe t pa l hogène
pr éc is puisse l eur ê tre ef f ec t ivemenl a llri b uê . Farle y
(J 978) les a
réperlo r iées ct classées en s uggérant des
rapproc h eme nts <lvec ce rt"ins groupe s de virus.
En ce qui concerne l es mollusqu es. el plus partic.:u-
l ière ment l es hu î tr es. peu de virus son l con nu s ch ez teS
ani maux . Bi en que r hypot h èse de maladie v ira le ait élé
ava nc ée pour expliquer ce rt aines mortalité s massives_
lei le
que la maladie de Malpèquc (Rose nfie ld, 1969J, la
première descrip tion d'une v iro se de l' huit re ne remon te
qu'à 1972 avec Je si gnale m ent d'un virus de type H erpès
chez l' hu itre américa i ne Crassostrea vÎr gÎ nÎca (Farleye t
10 Mo ppon <1 Pr o<" _ V.rb.".
Plus lard , avec les r ec her ches sur la mo rtal i lé m assive
de l'huî tr e po r tugaise en 1970 et c onj oi nte ment sur la
maladi e des br an c hie s de cette même espèce allaient
êlre r évé l ées les premi èr es inf ection s vi rale s associée s à
des mal adies épizoo t ique s des huî tres da ns le m il ieu
na lurel. Surven ue plus ieurs an née s après la fin des ép i-
zoolies , la d éco u verte de ces vir ose s n 'a pu êt re suivie
de rech erch es approfond i es su r les cara cté ri sti que s bio -
1 37

chimiques ni sur la pathogénicité des agents infectieux.
Cependant, par les techniques hi stologiques ct hi slO-
chimiques, des précisions ont pu être apportées sur la
virogénèse, sur la morphologie des virio
ns , et sur la na -
ture de l'acide nucléique (Comps et al ., 19 76; Comps et
Duthoit,
19 76; Comps ct Massa, 1978).
L'
in cidence de ces maladies fut considérable puis-
qu'elles devaie nt entra în er la disparition de l'huitre
portug:lÎsc des côtes de France ct son remplacement par
une espèce non indigène, l'huître du Pacifique Cr
as$O -
Slrea giga.f, q
ui devait ultérieurement subir des mortali-
tés avec un e infection virale co mparable il ce lle de la
mortalité massive de
19 70.
Les viroses associées aux monalité s, aussi bien chez
CrassoJtrea angu/ara que chez C. gigas ne correspondent
il aucun sym pt ôme externe fi xe, si ce n'est dans ce rtains
cas une coloration grisâ
ue de la masse viseérale. Par
contre, hi stologiquement on note une forte dégradation
du tissu conjonctif qui prése
nt e de n o mbr e u ~s lacunes.
A ce niveau, on constate une intense infiltration hémo-
cytaire et la présence de cellules atypiques renferma nt
un e inclusi on cytoplasmique fuch si nophile. Ces ce llul es
do
nt le noyau est pratiquement dépourvu de chromati-
ne sont Ic siège de lésions vi rales.
L'étude u lt r,lstructurale montre en effet que l'inclus i-
"II tu dl'1I1U pI1ll.: (,:or r ;,:~pond u un;,: ,lire gr; lI1u ku~t: ho-
mogène, dense aux électrons à la périphéric de laquelle
se form
en t des particules. Sur la bordure de ce vir o-
plasmc, des membranes se différencient, entourant pui s
isol'lnt un e portion du stroma vi rogène. Les particules
ainsi formees présentent un contour hellagonal ou pen-
tagon:!!. indiquant une structure icosaèdre des par-
tic ul es. Morphologiquement, ces "irons so nt consti tu és
d'une zone cent ra le opa que au x. électrons de 250 nm ,
e
nvcl oppée par un système membranaire à quatre feu-
i ll ets, de 25 mn d'épaisseu r. D' autr es partic ul es, l ib res
da ns le cy t op lasme de la ccllule infect ée ont un e struc-
ture plus complexe dérivant de ce l1e des particules initi-
alement formées, à la suite
d'un processus de matura-
tion impliquant un e condensa ti on du matériel. Les p:lr-
ticules matures comporte nt un u lUclé oide» de 220 nm ,
limité
pa r un f eu ill et simple: la pa rtie ce ntrale est dense
ators que la périphérie, sur une
épa isseur ne dépassa nt
pa s 20 nm est claire. Ce ne fo rmation est entourée d'une
couche dense
de 25 nm; les limit es de la pa rt icule sont
constitutées par deux membranes séparées p
ar un espa-
ce peu dense aux éleclrons.
De slructure icosaèdre, ces virions mesurent 380 nm
(coté à côté).
Bi en que le s sy mptômes de la maladie n'aient pas été
reproduits expérimentalement, J'effet pathogène de
ra gent infec ti e ux n'est pas doute ux puisque dans les cas
extrêmes observés. tout le tissu interstitiel est atteint et
cela dans tous les
or ganes.
Ce fait peut. d'ailleur s, être étendu à l 'e ns emble des
populations affectées par les mortalités. Seul sympt
ôme
aisement reconnaissable en microscopie photonique, est
ta présence de ce llul es atypiques, c'est à dire l'infection
138
par le virus a été décelée à l'origine lors des premiè re s
co nstatations de mortalités au cours de l' été 1 970 et
notée systématiquement ehez Ics animaux malades du-
rant toute l'épizootie, soit jusqu'en 19 73. les examens
hi sto lo giques ont par ailleurs permis d 'é tablir que la
virose s'était étendue à tous les ~ it ~s de culture de l'hu-
îlre portugaise en France, exception faite du secteur
méditerran
ée n, ct montré ainsi la possibil it é po ur le
pathogène
de s'adapter à des conditions de milieu aussi
différentes q
ue ce ll es du bass in d 'Arc achon et de la ri-
vière d
'E tel en Bretagne.
P ar contre on a pu noter un e grande spécificité de
ragent
au re gard de l'hôt e. seule I"huî tre portugaise
étant allei
nt e; cohabitant avec celte espèce, 1'huitre du
P aci fique se montra par contre extrêmeme nt résistante.
Dura
nt toute la période des mo rt alités, le s parcs de C.
gigas. dont le développement de la culture avait surto ut
été sens ibl e dans le bassin de Marennes-Oléron, on t cn
e
ff ct été épargnés. La résistan ce de cette e spèœ se ma -
nifest ai t en outrc par un e grande vi gu eur pour cc qui est ~
de la croissa nce et de l'engraissement. En raison des
caracté
ri st iq ues de ee lle huitre, sa culture a représcnt(
un e solution rap id e et efficace aux prohlè Ol es posés par
la mortalité ma ss i ve dc I"hu Ît re portugaise.
Il <;cmhle né:mmnin~ que plu~ tic di, .In' ; Ipr è~ 1c~
p l ellller~ C~~ : U~ d·cl cv ag <.' de C. glg as cn h ance, sa rési-
stan ce doit être remise en cause. L'introduction m as..<;ive
de naissains du Japon, principal eme nt en 1970 et 1971
et le se
mi de géniteurs pro ve nant de Colombie britanni-
que o nt favorisé la reproduction de celte espèce et le
captage massif de naissa
in , permettant ainsi un e im-
plantation rapide. L'adaptation aux conditions hydrolo-
giques des
cô tes françaises et consécuti ve me nt une
surproduction vr
ai semblable ont été assorties d'une
certaine diminution de III vigueur. Ce phénomène se
trou
ve ra it confirmé par des mortalités estivales, no-
tamment en 1977 dans
la Baie d'Arcac hon. Limitée à
un e populati on restreinte, la maladie présenta les mé -
mes caractéristiques que la morta li té de 1 970 avec pr é-
sen ce de lé sions vi rales chez les huîtres atteinte s. r
Au niv eau du ti ss u in ters ti tiel, tes cellules infecté~
renferment un vir op lasme inu acytoplasmiquc à partir
duquel se f
or me nt des part ic ules qui s ubi ssent, co mme
chez l'h
uî tre portugaise un processus de maturation
aboutissa
nt à de s vi rîons icosaèdres de ]8 0 nm . leur
morphologie est similaire à ce ll e du virus de mortalité
de C. an
guf ula.
Le troisième cas de virose nolé chez les huîtres creu-
ses concerne la maladie dcs branchies de I"huÎtrc por-
tugaise qui avait précédé la mortalité massive de 19 70
et dont les c au ses avaie nt été anribuées il un protiste
nouveau, Thunatos/reu p
o/y morphu (Franc et Arv y,
1969). Cette maladie se manifeste par une ul cération
é\"ol utive des branchies et des palpe s, par un amaigris-
sement ct enfin par la mort des animaux. E lle a débuté à
l'automne 1966; son évolution a é té marqu ée par un
m
axi mum en 1967, de s signes de rémissi on très nets
étant constatés en 1968; au début des mortalités massi-

ves de 1 970, les symptômes éta ie nt encore observés
chez certaines
hu îtres. Elle persiste à l'état en dé mi qu e
dans les populations naturelles de C. angillaw qui sub-
sistent au Po
rtu gal et dan s la baie de Cadix.
L
'é tude en microscopie électronique de s ti ss us
nécrosés a mo ntr é que des cellules géantes admises ini-
tialement
comme formes de T. polymorpha étaient in-
fectées
par un virus dont la taille, la morphologie ct le
mode de vi r ogé nèse in traeyt op lasmique indiquaient de s
similitudes importantes llvec les virus de mortalités.
L'infec
ti on parait débu t er par l'apparition d'une in-
clusion cytoplasmique oû l'on note la présence
d'ADN .
Le développement
de cc corps abo utit à un e mll SSC riche
en
ADN , comme le mo ntr ent 13 ré3etion de Feulgen ct
sor
toUi le s examens en nuoresce ncc avec l'acridine-
omllge et le DAP I.
A l'examen au microsco]>c électronique, cette masse
apparaît
dense a ux électrons 3vee des zones plus opa-
ques correspondant à une basophilie plus accusée sm
coupes semi-fines Ct ... une nuorescence plus intense.
Suivant un mode id emique :1 cel ui décr it po ur les virus
de mortalités, de s particules sc forment à la pér iph érie à
partir du st r oma de nse. La morpho logie est co mp arable
à ce ll e des précédents \'irus: à noter t ou tefois que le
_nucl
éo ide .. cen tral n'est pas général eme nt ent ouré
d'une couche l'laire [:t rai ll e ( Ic ~ \"i ri on ~ m:ltur c, eq d ~ '
380 r ll ll.
Les virus empliqués dan s ces trois épizoo ti es, dont on
a vu qu'ils pr ésen taient des caractères communs pour cc
qui est de la structure. de la morphologie, de la taille ct
du m
ode de virogénèse, peuvent être rapprochés des
iridovir us en tenant compte des in dications ob tenues s ur
la nature de l'acide nu cléiqu e.
Certaines particularités comme 13 présence dans le
cas du virus de C. gigas d'un réseau paracristallin c om -
parable auX" formations de même type signalées par
Kelly et Tins le y (1974) dan s des cellules d"AelieJ
aegypri infect ées par des iridorivus, confirmeraient ees
r
app rochements.
Dans le
cas. du \'irus de la mala di e de s branchies.
l'hypertrophie cellulaire qui parait consécutive à l'in-
fection rappelle le s symptômes de la maladie Iymp ho-
cystis de ce rta in s poissons, également attribuée à de s
iridovirus.
Il convient néanmoins de pr éciser que par rappoTl à
ce groupe, le s virus des huîtres C. angula/a el C. gigas
occuperaient un e position particulière.
C'es t vraisemblablement encore il cc groupe que
pou rrr ait aussi être rattaché un quatrième virus dont
Elston (1
979) a donné une description récente. Ce p;.t-
thogène a en effet été décelé dan s les cellules é pi théliales
du velum de larves de C. gigas subissant d es mortalités
en é
le vage co ntr ôlé dan s une é cl ose ri e aux Etats Unis.
'""
Selon l'auteur, les particules « comp l ètes .. sont asso-
ciées à des vacuoles claires. alors que le s part ic ules « in -
complètes.. sont associées à des inclusi
ons den ses aux
électrons; peu de dét
ai ls sont f ou rn is sur le mode de
virogénèsc ct aucune prés ici on fl 'est appor tée sur la
nature
de l'acide nu cléique. Les virions, d'une ta ill e de
228 ± 7 nm sont li mi tés par une double membrane de
8' 5 nm d'épa i ss eur ; il s possèdent une 7.one centrale
paracircu
la ire de 106 nlll de large ct de 160 nm pour la
plus grande
di mension.
Avec cette nouvelle vi
ro se, on notera que les résultats
acquis au cours de ces dernières années sur les in fec-
tions virales des huîtres indiquent des progrés sensibles
dans
un domaine encore peu exp loré ct lwnoncen t,
comme le montrent déjà certaines recherches e ntr epri-
ses sur le plan expérimental (Hill ct A
ld erma n, 1 977),
une évolution nouvelle de la p:Hhologie de ces mollus-
ques.
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